微乳毛细管电动色谱同时分离水溶性和脂溶性维生素

论文摘要

维生素是维持机体正常生长的必不可少的化合物,对人体和动物的生理活动有非常重要的作用,可以分为水溶性维生素和脂溶性维生素。微乳毛细管电动色谱（MEEKC）可以同时分离分析水溶性和脂溶性的物质。本论文的研究主要基于MEEKC的分析测定技术,建立快速分析脂溶性物质的新型微乳体系,并建立快速分析水溶性和脂溶性维生素的MEEKC的方法。本文分为以下四部分。第一部分:对各种维生素进行了简介,对电化学分析法、分光光度法、荧光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等各种分析方法在维生素测定中的应用进行了综述,并介绍了MEEKC法的基本原理、影响其分离的因素以及应用。第二部分:在MEEKC经典微乳体系的基础上进行了改进,建立了新型微乳体系,旨在解决MEEKC分析脂溶性物质时间太长的问题,而解决问题的关键是减少离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）的用量。为了减少SDS的用量,又能保证微乳体系的稳定性,同时具备足够的分离效率,本文采用了两种方式改进微乳体系:一、采用非离子表面活性剂与SDS复配;二、大幅度增加助表面活性剂。研究表明:两种体系均能使脂溶性物质分析速度加快,但前者分离效率不如后者。大量的助表面活性剂使微乳粒子变得松散,有利于脂溶性维生素在油相和水相之间的进出,缩短了脂溶性物质的分离时间,提高了分离效率。第三部分:维生素A、D3、E是三种最常见的脂溶性维生素,利用新型微乳体系,建立了MEEKC快速分析脂溶性维生素A、D3、E的方法。该微乳液的组成为:1.2%（W/W）SDS-21%（V/V）正丁醇-18%（V/V）乙腈-0.8%（W/W）正己烷-20 mmol/LpH8.4 H3BO3-Na2B4O7缓冲液。该微乳体系中,助表面活性剂正丁醇和有机溶剂乙腈对脂溶性维生素的分离起到了重要的作用。当分离电压为25 kV,柱温为25℃时,维生素A、D3、E在13 min内达到基线分离。三种脂溶性维生素的迁移时间和峰面积的RSD（n= 5）小于2.5%和4.5%;维生素A、D3、E分别在201000μg/mL,51000μg/mL,51000μg/mL范围内与峰面积呈线性关系;检出限（S/N=3）分别为12、0.72、0.29μg/mL。该体系直接应用于市售维生素E胶囊的测定,测定结果与标示值相符。第四部分:利用该微乳体系对13种脂溶性维生素和水溶性维生素进行了快速分析。该微乳体系中,微乳体系中缓冲溶液的pH和浓度以及正丁醇和乙腈的用量分别对水溶性维生素和脂溶性维生素的分离起到了重要的作用。当分离电压为25 kV,柱温为25℃时,13种维生素在30 min内达到基线分离。表明该MEEKC是一个快速、简单的分离测定脂溶性维生素和水溶性维生素的有效方法。该体系适用于市售多维维生素片的测定,准确性高,灵敏度好。各种维生素的回收率在97%105%之间。除了维生素C,样品测定值与药品标示值相符。该MEEKC方法适用于维生素相关药物制品的质量控制,具有应用前景。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 维生素简介
• 1.2 维生素分析现状
• 1.2.1 电化学法
• 1.2.2 分光光度法
• 1.2.3 荧光光度法
• 1.2.4 高效液相色谱法
• 1.2.5 毛细管电泳
• 1.2.6 其它方法
• 1.3 微乳毛细管电动色谱法
• 1.3.1 MEEKC 分离机理
• 1.3.2 影响MEEKC 分离的因素
• 1.4 微乳毛细管电动色谱的应用
• 1.4.1 药物
• 1.4.2 天然产物
• 1.4.3 生物分子
• 1.4.4 环境物质
• 1.4.5 其它物质
• 1.5 本课题的目的和意义
• 2 微乳毛细管电动色谱新型微乳体系的建立
• 2.1 微乳简介
• 2.2 实验药品和仪器
• 2.2.1 实验药品
• 2.2.2 实验仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 标准溶液和样品溶液的配制
• 2.3.2 微乳液制备
• 2.3.3 微乳液在MEEKC 中的应用
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 表面活性剂
• 2.4.2 助表面活性剂和有机溶剂
• 2.4.3 其他因素
• 2.5 本章小节
• 3、E'>3 微乳毛细管电动色谱快速分析脂溶性维生素A、D₃、E
• 3.1 引言
• 3.2 实验药品和仪器
• 3.2.1 实验药品
• 3.2.2 实验仪器
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 标准溶液和样品溶液的配制
• 3.3.2 微乳液的制备
• 3.3.3 试验方法
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 SDS 对MEEKC 分离的影响
• 3.4.2 正丁醇对MEEKC 分离的影响
• 3.4.3 有机溶剂对MEEKC 分离的影响
• 3.4.4 油相对MEEKC 分离的影响
• 3.4.5 缓冲液浓度和pH 对MEEKC 分离的影响
• 3.4.6 电泳条件对MEEKC 分离的影响
• 3.5 线性范围、检出限和重现性
• 3.6 样品测定和回收率实验
• 3.6.1 样品测定
• 3.6.2 加标回收实验
• 3.7 本章小节
• 4 微乳毛细管电动色谱快速分析水溶性和脂溶性维生素
• 4.1 引言
• 4.2 实验药品和仪器
• 4.2.1 实验药品
• 4.2.2 实验仪器
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 标准溶液和样品溶液的配制
• 4.3.2 微乳液的制备
• 4.3.3 试验方法
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 SDS 对MEEKC 分离的影响
• 4.4.2 正丁醇对MEEKC 分离的影响
• 4.4.3 有机溶剂对MEEKC 分离的影响
• 4.4.4 油相对MEEKC 分离的影响
• 4.4.5 缓冲液pH 对MEEKC 分离的影响
• 4.4.6 缓冲液浓度对MEEKC 分离的影响
• 4.4.7 电泳条件对MEEKC 分离的影响
• 4.5 线性范围、检出限和重现性
• 4.6 样品测定和回收率实验
• 4.6.1 样品测定
• 4.6.2 加标回收实验
• 4.7 本章小结
• 5 展望
• 致谢
• 参考文献
• 表论文清单