首页> 正文

疟原虫表达的巨噬细胞迁移抑制因子同源分子的功能研究

2020-11-22阅读(538)

疟原虫表达的巨噬细胞迁移抑制因子同源分子的功能研究

论文摘要

疟疾是世界上最严重的传染性疾病之一,全球每年有200万人死亡。一方面,疟疾的发病机理非常复杂,人们对其仍然缺乏了解。另一方面,迄今为止疟原虫逃逸宿主免疫攻击的机理还不清楚,并且目前没有任何疟原虫来源的分子被认为直接参与了对宿主免疫系统的调节。本研究鉴定了2个来源于疟原虫的巨噬细胞迁移抑制因子同源分子:PfMIF和PyMIF,它们分别来源于恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）和约氏疟原虫（Plasmodium yoelii）。本研究发现,疟原虫来源的MIF分子在氨基酸序列上与MIF家族成员的一致性在27-30%,Proline 2等主要氨基酸位点高度保守,三维结构与MIF家族成员高度相似。PfMIF具有互变异构酶活性,但是与HuMIF相比活力较低。PfMIF在趋化方面具有与HuMIF相当的活性。PfMIF分子能够从体外培养的感染红细胞或者转染的哺乳动物细胞系中释放。感染恶性疟的病人血清中能检测到PfMIF分子,感染约氏疟的小鼠体内Pymif转录水平在感染后第四天开始持续升高,而血清中的PyMIF分子持续升高至30%虫血率后下降,最高浓度在40-50ng/ml。本研究结果表明,PfMIF和PyMIF是MIF家族的两个新成员,并且可能调节宿主免疫反应、在感染过程中扮演一定角色。本研究有助于进一步理解寄生虫逃逸宿主免疫反应和感染的机理,并对这些方面的研究提供了新的思路。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 实验材料
  • 实验方法
  • 1.分子生物学实验方法
  • 2.RNA制备和cDNA合成
  • 3.变性条件下的蛋白电泳
  • 4.半干法Western blot
  • 5.重组蛋白纯化
  • 6.动物免疫
  • 7.常规ELISA
  • 8.抗体纯化
  • 9.单克隆抗体制备
  • 10.MIF-Specific Sandwich ELISA
  • 11.酶活性测定
  • 12.细胞生物学方法.
  • 13.Lipofectin2000介导真核细胞瞬时转染
  • 14.恶性疟原虫体外培养和同步化
  • 15.人外周血单核细胞分离
  • 16.单核细胞趋化实验
  • 17.约氏疟原虫培养
  • 18.疟原虫蛋白提取
  • 19.Pfmif在不同恶性疟原虫虫株间多态性的检测
  • 20.间接免疫荧光（IFA）
  • 21.免疫组化
  • 22.小鼠体内实验
  • 实验结果
  • 实验流程图
  • 1.Pfmif基因克隆和序列分析
  • 1.1 已经发现的MIF家族分子
  • 1.2 恶性疟原虫MIF同源分子的发现
  • 1.3 Pfmif基因序列分析
  • 1.4 PfMIF氨基酸序列分析
  • 1.5 Pfmif基因多态性鉴定
  • 1.6 Pfmif基因克隆
  • 2.约氏疟原虫MIF（PyMIF）同源分子的发现和基因克隆
  • 3.PfMIF/PyMIF三级结构预测
  • 4.蛋白表达和纯化
  • 4.1 蛋白表达
  • 4.2 蛋白纯化
  • 1) GST标签重组蛋白纯化
  • 2) His标签重组蛋白纯化
  • 5.多克隆抗体制备
  • 6.单克隆抗体制备
  • 7.体外培养的恶性疟原虫感染红细胞（PRBC）分泌PfMIF分子
  • 8.体外转染真核细胞证实PfMIF分泌
  • 9.Western blot
  • 10.间接免疫荧光观察PfMIF的分布
  • 11.恶性疟原虫感染病人血清检测
  • 12.酶活性检测
  • 13.纯化低内毒素的PfMIF/HuMIF重组蛋白
  • 14 PfMIF的细胞因子活性检测
  • 15.感染小鼠体内PyMIF分子的检测
  • 16.感染小鼠体内抗体水平的检测
  • 17.感染小鼠体内注射PyMIF分子并观察其对感染过程的影响
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 文献综述一:巨噬细胞迁移抑制因子研究进展
  • +T细胞在抗疟原虫红内期免疫中的作用'>文献综述二:CD4+T细胞在抗疟原虫红内期免疫中的作用
  • 附录
  • 附录Ⅰ:本论文所用的英文缩略语
  • 附录Ⅱ:PfMIF-His重组蛋白N末端测序报告
  • 附录Ⅲ:硕博连读期间发表的文章和参加的会议
  • 致谢

    • 相关论文文献

    • [1].研究生学位论文过程管理体系构建与质量控制研究[J]. 教育教学论坛 2020(12)
    • [2].高校研究生学位论文档案的价值与开发利用[J]. 大众文艺 2020(09)
    • [3].基于过程管理的研究生学位论文质量保障体系探索——以北京建筑大学为例[J]. 黑龙江教育(高教研究与评估) 2020(02)
    • [4].近10年国内发表的推拿治疗膝骨关节炎的研究生学位论文概况[J]. 中医正骨 2020(04)
    • [5].地方院校研究生学位论文反向人工智能倾向的成因与破解[J]. 黑龙江教育(高教研究与评估) 2020(08)
    • [6].“差评”研究生学位论文主要特点鉴别[J]. 黑龙江高教研究 2019(05)
    • [7].研究生学位论文的开发与利用[J]. 内蒙古科技与经济 2017(23)
    • [8].研究生学位论文写作的论证意识——一种教育学的视角[J]. 学位与研究生教育 2018(03)
    • [9].研究生导师责权机制的研究与实践[J]. 哈尔滨职业技术学院学报 2018(02)
    • [10].关于提高高校研究生学位论文质量的探索研究[J]. 教育教学论坛 2018(30)
    • [11].研究生学位论文研究热点和发展趋势的定量分析方法探析——基于文献经济学和知识经济学的思考[J]. 科技经济市场 2017(04)
    • [12].研究生学位论文质量保障体系探析[J]. 西部素质教育 2017(04)
    • [13].近10年我国科学技术哲学专业研究生学位论文选题与发展态势研究[J]. 科学技术哲学研究 2017(03)
    • [14].提高研究生学位论文质量的探索研究——以广州美术学院为例[J]. 湖北函授大学学报 2017(04)
    • [15].研究生学位论文英文摘要翻译中的问题与应对[J]. 吉林省教育学院学报 2017(07)
    • [16].聚类算法在研究生论文质量分析中的应用[J]. 中国教育信息化 2017(19)
    • [17].浅析高校研究生学位论文管理存在的问题及解决途径[J]. 价值工程 2017(34)
    • [18].研究生学位论文管理系统设计与实现[J]. 信息系统工程 2016(02)
    • [19].化工研究生学位论文质量的管理研究[J]. 广东化工 2016(20)
    • [20].研究生学位论文抽检中的问题预判与解决对策[J]. 学位与研究生教育 2016(01)
    • [21].HACCP视角下研究生学位论文质量监控应树立的理念和意识[J]. 高教学刊 2016(23)
    • [22].研究生学位论文网络评审系统的研发与实践[J]. 高等农业教育 2015(06)
    • [23].研究生学位论文撰写问题刍议[J]. 科技情报开发与经济 2015(20)
    • [24].研究生学位论文实行网络评阅的探析[J]. 学位与研究生教育 2014(08)
    • [25].研究生学位论文管理体系的改革探索[J]. 继续教育研究 2015(12)
    • [26].“双一流”建设背景下探讨提升研究生学位论文质量的措施[J]. 山西青年 2020(07)
    • [27].基于过程管理的研究生学位论文质量研究[J]. 课程教育研究 2020(21)
    • [28].研究生培养全过程管理的探索与实践[J]. 文教资料 2017(07)
    • [29].研究生学位论文中存在的问题及对策[J]. 教书育人 2008(27)
    • [30].对社科类研究生学位论文题目的思考[J]. 教书育人(高教论坛) 2019(33)

    标签：;  ;  ;  ;  

    疟原虫表达的巨噬细胞迁移抑制因子同源分子的功能研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5