首页> 正文

308nm准分子激光对角质形成细胞影响的研究

2020-12-03阅读(800)

308nm准分子激光对角质形成细胞影响的研究

论文摘要

背景:白癜风是一种原发性的、局限性或泛发性的皮肤色素脱失症。据估计,人群中至少有1-2%人患白癜风。组织病理发现:黑素细胞部分或完全缺失,表皮基底层、真皮浅层T淋巴细胞浸润。黑素细胞消失的潜在机制尚不清楚,有3种可能机制诱导白癜风的发生:自身免疫、神经体液因素、自身细胞毒性。由于白癜风发病机制不明,因此其治疗效果不能使人满意,目前的治疗包括:局部用皮质类故醇激素、光线疗法（NB-UVB,UVB,UVA）、光化学疗法（UVB+补骨脂素）、黑素细胞移植及近两年出现的308nm准分子激光。据文献报道,不管采用何种治疗方法,白癜风患者皮损区色素恢复最主要的原因是毛囊乳头处的黑素细胞移行到表皮内增殖分化,合成黑素,并转运其至周围的角质形成细胞。308nm准分子激光属于UVB紫外光（波长位于308nm±1nm）,被推测具有和UVA、UVB相似的生物学效应和临床效果。308nm准分子激光在临床上一经用于白癜风的治疗,就显示其疗效好、见效快的优点。进两年来已有多个国家关于308-nm准分子在治疗白癜风有效性、安全性的临床研究报道。308nm准分子激光治疗机制尚不明确,推测可能有以下几个方面:（1）刺激黑素细胞增生,促进黑素生成。（2）诱导皮损处病理性T淋巴细胞凋亡。因此,本课题根据以卜这两点推测分别进行探讨。1.308nm准分子激光对角质形成细胞分泌细胞因子的影响研究依据:①既往研究表明中波紫外线（UVB）可诱导角质形成细胞（Humankeratinocyte,HKC）分泌多种细胞因子,如干细胞生长因子（SCF）、成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、内皮素（Endothelin-1,ET）、集落细胞生长因子（granulocyte-macrophagecolony-stimulating,GM-CSF）等,而这些细胞因子能产生某些生物学效应,如诱导黑素细胞移行、增殖、分化及促进黑素合成。②308nm准分子激光的照射能量主要集中于表皮,只有大约20%的射线能到达真皮,即大部分能量集中于表皮。基于以上两点,因此提出假设:308nm准分子激光刺激角质形成细胞（KC）合成分泌细胞因子（SCF、GM-CSF、bFGF）,而这些角质形成细胞源性的细胞因子（部分KC源性的细胞因子已被证实）刺激无色素毛囊黑素细胞的移行、增殖、分化和黑素形成。基于这一假设,本课题拟研究308nm准分子对角质形成细胞的作用。目的:探讨308nm准分子激光对角质形成细胞（HKC）增殖及分泌细胞因子的影响。方法:用CCK-8法检测不同剂量308nm准分子激光照射人角质形成细胞（HKC）后12及24小时对细胞增殖的影响;不同剂量的308nm准分子激光照射HKC后12及24小时ELISA检测角质形成细胞培养上清液中的干细胞生长因子（SCF）、集落细胞生长因子（GM-CSF）、成纤维细胞生长因子（bFGF）的浓度变化。结果:角质形成细胞活力与照射剂量呈负相关,不同剂量照射对角质形成细胞的活力影响差异有显著性意义（F=30.672,P=0.000）,3个不同时间点间差异有显著性意义（F=206.134,P=0.000）。不同照射剂量对角质形成细胞分泌SCF的影响差异有显著性意义（P=0.014,F=6.033）,5个不同时间点间差异无显著性（F=0.966,P=0.054）;不同照射剂量对角质形成细胞分泌GM-CSF的影响差异无显著性意义（P=0.225,F=2.249）。5个不同时间点间差异无显著性（F=7.294,P=0.052）;不同照射剂量对角质形成细胞分泌bFGF的影响差异有显著性意义（P=0.018,F=11.889）,5个不同时间点间差异无显著性（F=49.105,P=0.001）。2.308nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡的作用研究研究依据:①既往研究发现中波紫外线（UVB）能诱导人T淋巴细胞调亡。②T淋巴细胞是308nm准分子激光治疗的靶细胞。③局部转移生长因子（TGF-β1）是一种表皮细胞增殖的负调节TGF-β1能诱导多种细胞发生凋亡。UVB照射后,TGF-β1水平升高,TGF-β1具有免疫调节作用,提示UVB诱导局部TGF-β1水平升高,从而抑制了局部免疫和炎症反应,促进局部色素恢复。目的:探讨308nm准分子激光对T淋巴细胞的直接和间接诱导凋亡作用及转化生长因子β1（TGF-β1）在诱导T淋巴细胞凋亡中的作用。方法:ELISA检测308nm准分子激光照射KC前及照射后12、24及48h HKC分泌TGF-β1的浓度变化;308nm准分子激光照射体外分离的活动期白癜风患者外周血T淋巴细胞,流式细胞仪检测照射后48小时T淋巴细胞凋亡情况;建立transwell细胞共培养系统（角质形成细胞位于上室,T淋巴细胞位于下室）,照射前加入不同浓度的抗TGF-β1抗体（25、250、2500pg/ml）,308nm准分子激光照射transwell上室,照射后48小时检测T淋巴细胞凋亡。结果:流式细胞术结果显示:308nm准分子激光可直接诱导T淋巴细胞凋亡;308nm准分子激光照射transwell上室可间接诱导T淋巴细胞凋亡。308nm准分子激光诱导角质形成细胞分泌TGF-β1的增加呈剂量依赖性;照射前加入抗TGF-β1抗体,可抑制准分子激光的诱导凋亡作用。3.结论:①308nm通过照射表皮的角质形成细胞,使角质形成细胞分泌SCF、GM-CSF、bFGF等具有促使黑素细胞增殖、分化及黑素合成的细胞因子,通过以上的细胞因子间接作用于黑素细胞。②308nm准分子激光直接照射可诱导T细胞凋亡,也可作用于角质形成细胞间接诱导T细胞凋亡,TGF-β1在准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡中起重要作用。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 前言
  • 1.1 白癜风的发病机制
  • 1.2 白癜风的治疗现状
  • 1.2.1 光化学疗法
  • 1.2.2 中波紫外线（UVB）疗法
  • 1.2.3 药物治疗
  • 1.2.4 其他
  • 1.3 308nm准分子激光在白癜风的应用现状
  • 1.3.1 308nm准分子激光的物理特性
  • 1.3.2 308nm准分子激光治疗白癜风的机制
  • 1.3.3 308nm准分子激光的临床应用现状
  • 1.4 角质形成细胞在白癜风发病的作用是什么?
  • 1.5 角质形成细胞源性的细胞因子在黑素细胞移行、增殖、分化和黑素形成中的作用
  • 1.5.1 角质形成细胞源性细胞因子
  • 1.5.2 角质形成细胞源性细胞因子的作用
  • 1.5.2.1 角质形成细胞源性细胞因子参与黑素细胞增殖、分化的调控
  • 1.5.2.2 角质形成细胞源性细胞因子促进黑素细胞轴突形成
  • 1.5.2.3 角质形成细胞与黑素细胞直接接触对黑素细胞形态的影响
  • 1.6 课题的研究依据、意义和研究内容
  • 1.7 参考文献
  • 第二章 308nm准分子激光对角质形成细胞分泌细胞因子的影响
  • 2.1 引言
  • 2.2 实验材料
  • 2.2.1 主要仪器
  • 2.2.2 试剂
  • 2.2.3 细胞
  • 2.3 技术路线
  • 2.4 实验方法
  • 2.4.1 角质形成细胞的传代培养
  • 2.4.2 CCK-8法测定308-nm准分子激光对角质形成细胞增殖的影响
  • 2.4.3 ELISA检测308nm准分子激光照射后12、24及48hHKC分泌SCF、GM-CSF、bFGF浓度变化
  • 2.5 DNA Ladder法检测不同剂量准分子激光照射后HKC凋亡情况
  • 2.6 统计学方法
  • 2.7 结果
  • 2.7.1 308-nm准分子激光对角质形成细胞增殖的影响
  • 2.7.2 ELISA检测308nm准分子激光照射后6、12、24及48h HKC分泌SCF、GM-CSF、bFGF的浓度变化
  • 2.7.3 DNA Ladder法检测不同剂量准分子激光照射后HKC凋亡情况
  • 2.8 讨论
  • 2.9 参考文献
  • 第三章 308-nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡的作用研究
  • 3.1 引言
  • 3.2 实验材料
  • 3.2.1 主要仪器
  • 3.2.2 主要试剂
  • 3.3 技术路线
  • 3.4 实验方法
  • 3.4.1 人角质形成细胞的培养
  • 3.4.2 外周血T淋巴细胞的分离
  • 3.4.3 分组—Transwell共培养模式的建立
  • 3.4.4 流式细胞仪检测T细胞凋亡情况
  • 3.5 结果
  • 3.5.1 308-nm准分子激光对T淋巴细胞的直接作用
  • 3.5.2 308nm准分子激光对T细胞的间接作用
  • 3.6 讨论（与第四章一起讨论）
  • 3.7 参考文献
  • 1在308nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡中的作用'>第四章 转化生长因子β1在308nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡中的作用
  • 4.1 引言
  • 4.2 实验材料
  • 4.2.1 主要仪器
  • 4.2.2 主要试剂
  • 4.3 技术路线
  • 4.4 实验方法
  • 4.4.1 人角质形成细胞的培养
  • 4.4.2 外周血T淋巴细胞的分离
  • 4.4.3 ELISA检测308nm准分子激光照射KC前及照射后12、24及48h HKC分泌TGF-β1的浓度变化
  • 4.4.4 Transwell共培养模式的建立
  • 4.4.5 流式细胞仪检测T细胞凋亡情况
  • 4.5 统计学方法
  • 4.6 结果
  • 1的浓度变化'>4.6.1 ELISA检测308nm准分子激光照射后24h、48h KC分泌TGF-β1的浓度变化
  • 1在准分子激光诱导T细胞凋亡中的作用'>4.6.2 TGF-β1在准分子激光诱导T细胞凋亡中的作用
  • 4.7 讨论
  • 4.8 参考文献
  • 第五章 全文总结
  • 英文缩写词对照表
  • 攻读硕士学位期间的成果
  • 致谢
  • 研究生毕业论文统计学审稿证明

    • 相关论文文献

    • [1].准分子激光在矫正近视的临床应用[J]. 健康之路 2017(07)
    • [2].局部封闭联合308nm准分子激光治疗白癜风的临床疗效观察[J]. 中国保健营养 2012(16)
    • [3].白癜风患儿在308nm准分子激光治疗中实施精细化护理干预的效果[J]. 皮肤病与性病 2020(05)
    • [4].308nm准分子激光联合祛白汤治疗白癜风的临床疗效观察[J]. 中国民康医学 2014(08)
    • [5].308nm准分子激光联合卡介菌多糖核酸治疗斑秃42例临床观察[J]. 新医学 2014(04)
    • [6].补肝肾法联合308nm准分子激光治疗成人面部白癜风的疗效观察[J]. 中国中西医结合皮肤性病学杂志 2014(05)
    • [7].308nm准分子激光联合梅花针治疗斑秃的疗效观察[J]. 中国中西医结合皮肤性病学杂志 2013(02)
    • [8].0.1%他克莫司软膏联合308nm准分子激光治疗面颈部白癜风疗效观察[J]. 皮肤性病诊疗学杂志 2013(04)
    • [9].二氧化碳激光磨削联合308nm准分子激光治疗稳定期白癜风疗效观察[J]. 中国皮肤性病学杂志 2013(09)
    • [10].308nm准分子激光治疗白癜风随机对照试验的系统评价[J]. 中国皮肤性病学杂志 2012(06)
    • [11].他克莫司软膏联合308准分子激光治疗白癜风疗效观察[J]. 基层医学论坛 2012(32)
    • [12].308nm准分子激光对寻常型白癜风患者ICAM-1表达的影响及其作用机制[J]. 中国现代药物应用 2012(24)
    • [13].308nm准分子激光与308nm准分子光治疗白癜风随机自身对照研究[J]. 中国美容医学 2012(09)
    • [14].308nm准分子激光与窄谱中波紫外线治疗局限性白癜风疗效比较[J]. 中国中西医结合皮肤性病学杂志 2011(03)
    • [15].准分子激光原位磨镶手术对近视患者的临床疗效观察与分析[J]. 中国医药导刊 2011(06)
    • [16].复方血栓通胶囊治疗准分子激光原位磨镶术后黄斑出血[J]. 广东医学 2010(09)
    • [17].准分子激光技术发展(邀请论文)[J]. 中国激光 2010(09)
    • [18].308nm准分子激光对人角质形成细胞活力及bFGF表达与分泌的影响[J]. 中国病理生理杂志 2010(08)
    • [19].308nm准分子激光治疗皮肤病的进展[J]. 岭南皮肤性病科杂志 2009(05)
    • [20].308nm准分子激光对角质形成细胞分泌细胞因子的影响[J]. 中国皮肤性病学杂志 2008(05)
    • [21].308nm准分子激光辅以免疫制剂治疗白癜风的临床效果分析[J]. 江西医学院学报 2008(03)
    • [22].硒酵母联合308nm准分子激光治疗白癜风的临床疗效观察[J]. 福建医药杂志 2014(03)
    • [23].评价308nm准分子激光联合卡泊三醇软膏治疗斑块状银屑病的效果[J]. 中国实用医药 2014(33)
    • [24].308nm准分子激光治疗白癜风临床分析[J]. 皮肤病与性病 2013(04)
    • [25].308nm准分子激光联合复方甘草酸苷片治疗斑秃的疗效观察[J]. 皮肤性病诊疗学杂志 2012(04)
    • [26].308nm准分子激光在皮肤科的应用[J]. 实用医院临床杂志 2009(03)
    • [27].他克莫司软膏联合准分子激光治疗白癜风的疗效观察[J]. 求医问药(下半月) 2013(08)
    • [28].准分子激光近视矫正术后角膜前表面形态变化分析[J]. 吉林医学 2012(19)
    • [29].准分子激光近视治疗2645例术前处置临床研究[J]. 现代预防医学 2011(17)
    • [30].激光联合复方甘草酸苷治疗白癜风的疗效分析[J]. 中国热带医学 2011(12)

    标签：;  ;  ;  ;  ;  ;  

    308nm准分子激光对角质形成细胞影响的研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5