栉孔扇贝与太平洋牡蛎雌核发育二倍体的生物学特性研究

论文摘要

人工诱导雌核发育是指利用遗传失活的精子,与正常卵子“受精”,而后通过抑制第一卵裂使单倍体胚胎的染色体加倍从而发育成雌核发育二倍体。与传统育种技术相比,由于雌核发育后代的遗传物质完全来源于母体,因而人工雌核发育可作为确定性别遗传机制、基因-着丝点重组、基因作图以及快速建立高纯合度品系、纯系和克隆的有效手段,在贝类中有着十分广泛的应用前景,并有望为贝类的遗传改良提供新的技术途径,培育出具有优良性状的新品种。本研究以我国北方养殖的栉孔扇贝（Chlamys farreri）和太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）为研究对象,对雌核发育二倍体的生物学特性进行了分析。结果如下:1、栉孔扇贝成活与生长特性方面:利用紫外线照射精子遗传失活方法和6-DMAP抑制第二极体的染色体加倍法,诱导出栉孔扇贝的雌核发育二倍体,观测了幼体不同时期的成活率,生长速度等生物学特性。结果发现,雌核发育二倍体的卵裂率、早期胚胎成活率、D形幼虫发生率,孵化后3d、6d、9d、12d、15d、18d的幼体成活率显著低于对照组。在生长速度方面,在孵化后3天内雌核发育二倍体个体大小与对照组没有明显差异,但在3 d后显著大于对照组。这显示随着致死隐性基因因纯合而被自然排除,栉孔扇贝雌核发育二倍体的生长性状可能逐渐优于正常个体。2、栉孔扇贝遗传特性方面:利用紫外线照射精子遗传失活方法和6-DMAP抑制第二极体的染色体加倍法,构建了3个栉孔扇贝雌核发育家系。采用8个微卫星标记对3个雌核发育家系进行分析,M-C距离通过子代的杂合率来计算。结果发现,当把无效等位基因考虑在内时,所有的微卫星位点符合孟德尔遗传定律。父本基因的缺失确定了雌核发育诱导的100%成功率。3个家系的基因重组率是0.4-0.64,小于报道的其他种类,而平均重组率是0.53,也就是说雌核发育F1代的纯合率是0.47,大约是近亲交配纯合率（0.25）的2倍,因此减数分裂型雌核发育是快速获得纯系的有效手段。三个家系8个位点的M-C距离为13-38cm。M-C距离的确定对于将来栉孔扇贝遗传图谱的构建具有重要的意义。3.太平洋牡蛎成活与生长特性方面:利用紫外线照射精子遗传失活方法和6-DMAP抑制第二极体的染色体加倍法,诱导出太平洋牡蛎的雌核发育二倍体,观测了幼体不同时期的成活率,生长速度等生物学特性。结果发现,雌核发育二倍体的卵裂率、早期胚胎成活率、D形幼虫发生率,孵化后3d、6d、9d、12d、15d、18d的幼体成活率显著低于对照组。在生长速度方面,在孵化后6天内雌核发育二倍体个体大小与对照组没有明显差异,但在6 d后显著大于对照组。这显示随着致死隐性基因因纯合而被自然排除,太平洋牡蛎雌核发育二倍体的生长性状可能逐渐优于正常个体。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 海洋贝类雌核发育研究进展
• 第一节 贝类人工雌核发育二倍体的研究历史及现状
• 第二节 人工诱导贝类雌核发育二倍体的原理和方法
• 第三节 贝类雌核发育二倍体的鉴定
• 第四节 雌核发育贝类的生物学特性
• 第五节 雌核发育在贝类遗传育种中的意义和应用
• 第六节 微卫星在贝类遗传育种中的应用
• 第二章 栉孔扇贝雌核发育二倍体生物学特性研究
• 第一节 栉孔扇贝雌核发育二倍体成活与生长特性研究
• 第二节 栉孔扇贝雌核发育二倍体遗传学特性研究
• 第三章 太平洋牡蛎雌核发育二倍体成活与生长特性研究
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 第四章 总结
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间学术成果