论文摘要
柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus A16, CA16）属于小核糖核酸病毒科（Picornaviridas）、肠道病毒属（Enterovirus）成员,它与肠道病毒71型（Enterovirus 71, EV71）是儿童手足口病（hand-foot-mouth disease, HFMD）的两大主要病原。相对EV71而言,CA16感染引起的HFMD临床症状较轻,并发症的发生率也较低,所以对其研究也远不及前者。但近年越来越多的报道指出,CA16感染可能与心肌炎、难治性休克等致死性并发症的发生有关,个别地区还有引起成人致死性肺炎的报道。CA16有可能成为长期存在于人类宿主并引发一系列疾病的病原,所以有必要对此病毒加深了解。本文针对前期研究中的CA16分离株G20的生物学特点进行了探讨,并进一步研究了其在不同细胞基质内和不同培养条件下的增殖情况。本研究结果显示,通过蚀斑筛选和细胞适应传代,G20株能够在Vero细胞和KMB-17细胞中获得增殖扩增,并可观察到细胞的显著病变；动物实验表明,经颅内注射病毒的ICR乳鼠腿部出现麻痹。此株病毒在Vero和KMB-17两种细胞中：pH6.0与6.5环境下在实验温度病毒不增殖或增殖非常缓慢；一般pH7.0时病毒增殖速度及24小时内所达到的滴度小于pH7.5的情况；在33℃～37℃环境下,pH7.0～8.5时病毒均有不同程度的增殖；在较低温度33℃、35℃时稍高pH8.0与8.5环境更有利于病毒快速增殖；39℃环境下,pH7.5～8.5时病毒均有不同程度的增殖。在41℃环境下：各pH环境中病毒基本不增殖或增殖很缓慢,达到的滴度很小；Vero细胞中pH8.0与8.5时病毒似有增殖；KMB-17细胞中pH8.0时病毒似有增殖。两种细胞在不同条件下对病毒增殖影响基本相似,但依具体情况稍有不同。整体来看,偏碱性环境一定条件下有利于病毒快速增殖,但有时过碱可观察到细胞破碎严重；实验中两种细胞在37℃、pH7.5培养条件下病毒增殖速度和所达到的滴度都较可观。