应用SPA-COA技术对牛奶中青霉素残留快速检测的初步研究

论文摘要

在畜牧业生产中,青霉素类药物常用于奶牛疾病的治疗、预防及用作饲料添加剂,但它们的残留和毒性会对食品安全、人体的健康造成潜在危害,因此,青霉素类药物在牛乳等动物性食品中的残留问题日益受到关注。目前检测青霉素类药物残留的主要方法有 HPLC、TTC 法等,这些方法虽然非常敏感,但费时、耗资大、操作繁琐。 本研究分别以牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA）为蛋白质载体,采用碳二亚胺法（CDI）将半抗原青霉素钠（PEN）分别与 BSA、OVA 偶联,合成了完全抗原 PEN-EDC-BSA 和 PEN-EDC-OVA。用合成的完全抗原免疫大白兔获得抗青霉素免疫球蛋白（IgG）。以不同浓度的 IgG 和葡萄球菌 A 蛋白（SPA）相偶联,用以制备 SPA 诊断液,并做葡萄球菌 A 蛋白-协同凝集试验（SPA-COA）检测青霉素残留。通过试验得出以下结论:（1）SPA 最佳浓度为 5%;（2）IgG 和 SPA 稳定液最佳比例为 1︰5;（3）PBS 稀释液以 0.01M pH 7.4 为最好;（4）初步确定 SPA-COA 最低检测限为 10μg/L;（5）本研究建立的方法对牛奶中 PEN 残留进行检测具有一定的实用意义。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文注释
• 1 引言
• 1.1 我国奶业发展概况
• 1.2 国内外牛奶中青霉素残留概况
• 1.3 青霉素 G 作用机理、限量标准与结合抗原合成
• 1.4 牛奶中青霉素残留的主要原因及其危害
• 1.5 牛奶中残留青霉素的检测方法
• 1.6 减少和避免抗生素残留的对策
• 1.7 本课题的目的、意义及研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 实验药品
• 2.1.2 实验动物及饲养
• 2.1.3 实验主要仪器
• 2.1.4 实验器械和器皿
• 2.1.5 主要试剂的配制
• 2.2 方法
• 2.2.1 青霉素结合抗原制备
• 2.2.2 结合抗原的鉴定
• 2.2.3 兔多克隆抗血清的制备
• 2.2.4 抗血清的纯化
• 2.2.5 SPA-COA 检测牛奶中青霉素残留
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介