论文摘要
柿子中富含天然多酚类化合物,具有抗氧化、降低胆固醇、凋节血糖、提高免疫力、抗癌、抗炎症、加速乙醇代谢等多种生理功能。本课题通过对柿子多酚提取工艺,单酚检测方法、分离纯化工艺及其体外抗氧化能力的研究,建立了先进、高效、安全的分离纯化柿子中GA、C、EC、CA四种单酚类化合物的方法,并测定了 GA和C的体外抗氧化能力。主要研究内容及结论如下:(1)采用 2%三氯化铁溶液显色法证明柿子提取液中多酚类化合物的存在。建立柿子提取液中总酚的FC检测方法,通过两次正交试验最终确定柿子多酚最佳提取工艺为:乙醇体枳分数60%,温度55 ℃,提取时间30min,液固比15:1。在此条件下提取,柿子中总酚含量为3.0667mg/g F.W.。建立多酚类化合物定性、定量的HPLC/HPLC-MS检测方法。最终确定柿子多酚提取液中含有GA、C、EC、CA,总量达到总酚含量的 45.45%,四种单酚的含量依次为:GA>C>EC>CA。GA的含量最高,占四种单酚总量的68.34%,占总酚含量的31.06%。柿子多酚提取液中不存在 FA、CHA。(2)通过对所选的八种树脂进行静态吸附及解吸试验,最终确定出HP2MGL大孔吸附树脂用于纯化柿子多酚的效果最好,经动态纯化后,柿子总多酚由原来的45.37%提高到88.52%,纯化倍数为1.95倍。并建立Sephadex LH-20、ODS填料柱层析法分离纯化四种单酚,纯化出的单品 GA、C、EC、CA,纯度分别为 95.15%,95.04%,87.47%,85.0%。(3)通过测定淸除ABTS,DPPH自由基的能力表明柿皮、柿肉提取液及采用整套分离纯化工艺获得的柿子中GA和C均具有较好的体外抗氧化能力。
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