促进沙枣浓缩鞣质合成的植株栽培和愈伤组织培养技术研究

论文摘要

沙枣（Elaeagnus angustifolia L.）属胡颓子科植物,其主要活性成分为浓缩鞣质。为了有效开发沙枣生产浓缩鞣质,本文研究了沙枣植株浓缩鞣质含量的时空变化,施肥和外源诱导物对沙枣植株浓缩鞣质含量的影响;本文同时开展了沙枣愈伤组织培养浓缩鞣质生物合成的调控的可行性研究。结果如下:1沙枣中浓缩鞣质含量动态变化的研究一个生长季中不同月份的沙枣叶片中浓缩鞣质含量差异显著,在7月份和10月份两次达到高峰,分别为2728和34.36 mg·g-1DW;沙枣各个部位浓缩鞣质含量的高低顺序是:树皮＞树根＞树叶＞一年生新枝;腐殖土适于沙枣生长与浓缩鞣质的积累,施肥促进沙枣生物量的迅速增加、不利于浓缩鞣质的积累,单独合理施用氮肥既能促进植物生长也能促进沙枣叶片中浓缩鞣质的积累。2外源诱导物对沙枣中浓缩鞣质含量的影响外源水杨酸和脂肪酸诱导均可促进沙枣浓缩鞣质的积累,400 mgL-1水杨酸溶液诱导第3天时沙枣叶片和一年生新枝中浓缩鞣质含量最高、分别达到50.87和20.01 mg·g-1DW,分别是对照的2.43和1.53倍;250mgL-1脂肪酸溶液诱导第2天时沙枣树皮中浓缩鞣质含量最大、为90.78 mg·g-1DW,是对照的1.77倍。3沙枣组织培养体系的建立以叶片为外植体,以MS培养基附加2,4-D1.00 mgL-1+BA0.50 mgL-1激素组合对沙枣愈伤组织进行诱导,诱导率达98.00%;附加BA1.00 mgL-1的MS培养基为沙枣愈伤组织分化培养的最适培养基;附加IBA 1.00 mgL-1的MS培养基为沙枣最适生根培养基,移栽1月后成活率可达92.00%。4促进沙枣愈伤组织中浓缩鞣质合成技术的研究附加2,4-D1.00 mgL-1和BA0.50 mgL-1的MS基本培养基利于愈伤组织生长和浓缩鞣质的积累,培养20天时浓缩鞣质含量达到19.46 mg·g-1DW;愈伤组织分化不利于浓缩鞣质的积累;添加蛋白胨和紫外辐射促进沙枣愈伤组织浓缩鞣质的积累,愈伤组织中浓缩鞣质最大可达56.25 mg·g-1DW,是对照的2.89倍。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 植物组织培养在离体快繁中的应用
• 1.1.1 影响木本植物组织培养的有关因子及研究进展
• 1.2 植物组织培养生产次生代谢产物的研究概况
• 1.3 影响植物组织培养生产次生代谢产物的因素
• 1.3.1 外植体的选择
• 1.3.2 培养基
• 1.3.3 培养条件
• 1.4 提高次生代谢产物的途经
• 1.4.1 诱导剂及前体物的加入
• 1.4.2 毛状根培养技术
• 1.4.3 冠癣培养技术
• 1.4.4 生物反应器技术
• 1.5 药用植物栽培中的施肥技术研究
• 1.5.1 施肥对药用植物品质的影响
• 1.5.2 施肥在药用植物栽培中的应用
• 1.6 沙枣的开发利用现状
• 1.6.1 沙枣的种属特性
• 1.6.2 沙枣的开发利用
• 1.7 本研究的目的和意义
• 2 沙枣中浓缩鞣质含量动态变化的研究
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 植物材料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 仪器与设备
• 2.1.4 实验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 沙枣叶片生长及浓缩鞣质含量季节性变化及与植物体生长之间的关系
• 2.2.2 沙枣不同部位浓缩鞣质含量差异
• 2.2.3 沙枣不同部位浓缩鞣质平均聚合度
• 2.2.4 土壤基质对沙枣生长及浓缩鞣质积累的影响
• 2.2.5 施肥对沙枣生长及浓缩鞣质积累的影响
• 2.2.6 氮肥对沙枣生长及浓缩鞣质积累的影响
• 2.3 讨论
• 2.4 本章小结
• 3 外源诱导物对沙枣中浓缩鞣质含量的影响
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 植物材料
• 3.1.2 主要试剂
• 3.1.3 仪器与设备
• 3.1.4 实验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 水杨酸诱导对沙枣叶片浓缩鞣质积累的影响
• 3.2.2 水杨酸诱导对沙枣不同部位浓缩鞣质积累的影响
• 3.2.3 脂肪酸诱导对沙枣叶片浓缩鞣质积累的影响
• 3.2.4 脂肪酸诱导对沙枣不同部位浓缩鞣质积累的影响
• 3.3 讨论
• 3.4 本章小结
• 4 沙枣组织培养体系的建立
• 4.1 材料和方法
• 4.1.1 植物材料
• 4.1.2 主要试剂
• 4.1.3 仪器与设备
• 4.1.4 实验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 不同激素组合对沙枣愈伤组织诱导培养的影响
• 4.2.2 不同激素组合对沙枣愈伤组织继代增殖培养的影响
• 4.2.3 不同浓度BA对沙枣愈伤组织分化培养的影响
• 4.2.4 不同浓度IBA和NAA对沙枣愈伤组织生根培养的影响
• 4.3 讨论
• 4.4 本章小结
• 5 促进沙枣愈伤组织中浓缩鞣质合成的技术研究
• 5.1 材料和方法
• 5.1.1 植物材料
• 5.1.2 主要试剂
• 5.1.3 仪器与设备
• 5.1.4 实验方法
• 5.1.5 培养条件
• 5.2 结果与分析
• 5.2.1 对照品溶液的紫外（UV）全波段扫描
• 5.2.2 不同提取方式对沙枣样品浓缩鞣质含量的影响
• 5.2.3 不同基本培养基对愈伤组织生长和浓缩鞣质合成的影响
• 5.2.4 不同外植体来源对愈伤组织生长和浓缩鞣质含量的影响
• 5.2.5 不同激素组合对愈伤组织生长和浓缩鞣质含量的影响
• 5.2.6 有机添加物对愈伤组织浓缩鞣质含量的影响
• 5.2.7 愈伤组织分化与浓缩鞣质积累的关系
• 5.2.8 紫外辐射对愈伤组织浓缩鞣质积累的影响
• 5.3 讨论
• 5.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢