鸡肾型传染性支气管炎病毒陕西分离株N、M和S1基因的分子遗传变异研究

论文摘要

传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是鸡的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸疾病,以气管啰音、咳嗽和打喷嚏为特征畛跞衔狪B主要是幼鸡的一种疾病,但后来发现该病在育成鸡和产蛋鸡群中也普遍存在。IB可引起鸡的增重和饲料报酬降低,参与混合感染引起气囊炎使肉鸡在加工过程中被淘汰,引起产蛋鸡的产蛋率和蛋品质量下降,该病的高度传染性和传染性支气管炎病毒众多的血清型,使免疫预防复杂化并增加了防控成本。因此具有重要的经济意义。传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）是冠状病毒科（Coronariyidae）冠状病毒属（Coronavirus）的成员,其基因组RNA由大约27 600个核甘酸组成,全序列已被克隆和测序。IBV粒子含有纤突糖蛋白（S）、膜糖蛋白（M）和核衣壳蛋白（N） 3种主要结构蛋白。S蛋白由S1和S2两种糖蛋白组成,血凝抑制（HI）抗体和大部分病毒中和（VN）抗体由S1诱导产生。20世纪60年代和70年代,美国和澳大利亚就报道了明显不同于已知Mass血清型的几种IBV血清型。此后,在亚洲和欧洲也发现了多个新的IBV血清型。近年来,我国IBV分离株大多为肾变型,主要分离株为肾型变异株,给免疫防控带来了很大困难。因此,对肾型IBV分离株的致病性和分子生物学特性进行测定,特别是对肾型IBV分离株的主要结构基因N、M、S1的遗传变异进行研究,将对我国IB的免疫预防等起到推动作用。作者针对肾型IBV分离株,主要进行了以下研究:1.对陕西省流行的肾型IBV进行了分离鉴定。从陕西省20个发生呼吸道疾病的病鸡场中分离到18株病毒。通过鸡胚感染,HA试验,干扰NDV试验,耐酸碱试验,电镜观察,血清学鉴定,证明其中13株是鸡传染性支气管炎病毒（IBV）。动物感染试验及EID50试验发现,8个IBV分离株（BJ2、FF2、YL2、B01、G5、YX、WH、WG）具有很强的嗜肾性,可引起感染鸡肾肿大,呈花斑样,肾小管和输尿管有尿酸盐沉积。血清中和试验表明,IBV分离株的血清型与W118毒株相同,而与IBV H120、H52和W93株有一定的差异。2.用RT-PCR对8个肾型IBV分离株的N基因进行了扩增,均获得1160bp左右的目的条带,与预期相符。8个分离株的N基因测序后与GenBank登录的7个IBV参考毒株的N基因比较发现,部分IBV陕西分离株N基因与参考毒株的同源性在85.5%～87.3%,差异性较大,说明我国IBV地方分离株N基因变异有不断加大的趋势,氨基酸推导序列表明,N蛋白突变以散在的点突变形式为主,其变异特点与组织嗜性无明显相关性。系统进化分析表明,WH、YX、YL株与参考毒株Ark99及Gray在同一进化分支上,差异较小;BJ、WG、G株3个毒株则形成一个独立的进化分支,与我国疫苗毒株W93、H120及其他参考

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 文献综述
• 第一章 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展
• 1.1 IBV 基因组结构
• 1.2 IBV 的非结构域
• 1.3 IBV 的S 基因及其编码的S 蛋白
• 1.4 IBV M 基因及其编码的M 蛋白
• 1.5 IBV N 基因及其编码的N 蛋白
• 1.6 结语
• 第二章 鸡传染性支气管炎病毒分子遗传变异和免疫机制研究进展
• 2.1 概述
• 2.2 IBV 基因组
• 2.3 IBV 的分子变异机制
• 2.4 IBV 遗传变异的研究近况
• 2.5 IBV 的免疫机制
• 2.6 小结
• 试验研究
• 第三章 鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 第四章 鸡肾型传染性支气管炎病毒分离株部分生物学特性测定
• 4.1 材料
• 4.2 方法
• 4.3 结果
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 第五章 鸡肾型IBV 陕西分离株N 基因的克隆及分子遗传变异分析
• 5.1 材料
• 5.2 方法
• 5.3 结果
• 5.4 讨论
• 5.5 小结
• 第六章 鸡肾型IBV 分离株M 基因的克隆与特性分析
• 6.1 材料
• 6.2 方法
• 6.3 结果与分析
• 6.4 讨论
• 6.5 小结
• 第七章 鸡肾型IBV 陕西分离株51 基因分子遗传变异分析
• 7.1 材料
• 7.2 方法
• 7.3 结果
• 7.4 讨论
• 7.5 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介