论文摘要
目的:探讨局部应用色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)滴眼液抑制大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的作用及其可能机制。 方法:建立 SD 大鼠(受体)72 只和 Wistar 大鼠(供体)36 只同种异体间穿透性角膜移植模型。每只受体动物均行右眼手术,术后的 SD 大鼠随机平均分成实验组(10nM的 PEDF 滴眼液)和对照组(赋形剂滴眼液)。术后每天对术眼角膜用显微镜观察和照相,记录植片存活时间;定量分析角膜新生血管(corneal neovascularization, CNV)面积;比较各组移植排斥指数(rejection index,RI),包括角膜植片透明度、水肿、和新生血管程度;术后 1 周,2 周,3 周,1 月,2 月,3 月,每个组随机处死 6 只动物,取其角膜标本进行苏木素/伊红(hemotoxylin and eosin,HE)染色观察新生血管生长和炎性浸润情况;透射电镜(transmission electron microscope,TEM)观察超微结构;免疫组织化学方法检测 PEDF 的表达;流式细胞技术(flow cytometry,FCM)监测动物外周血中的 T 细胞亚群变化、CD4+/CD8+比值。 结果: 1. 实验组与对照组角膜植片平均存活时间分别为 22.564±0.321d 和 12.125±0.313d,实验组比对照组角膜植片存活时间显著延长(P﹤0.01﹚。 2. 实验组角膜新生血管面积在术后 1 周,2 周,3 周,1 月,2 月时较对照组显著减少(P﹤0.01 或 P﹤0.05)。 3. 实验组 RI 在 1 周,2 周,3 周,1 月,2 月时明显小于对照组(P﹤0.01或 P﹤0.05)。 4. 实验组比对照组血管生长少和炎性浸润程度轻;在术后 2 周,3 周,1 月,2 月实验组 PEDF 的表达水平显著高于对照组(P<0.05 或 P<0.01)。
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