附子大黄不同配伍层次对阳虚便秘的治疗作用及其机制研究

论文摘要

目的:通过附子大黄不同配伍层次对阳虚便秘的治疗作用及其作用机制研究,揭示中医药的配伍规律并为临床中药配伍的科学应用提供依据。方法:采用山西白醋加活性炭冰水灌胃法复制阳虚便秘动物模型,进行模型动物的排便实验、小肠推进实验、结肠肌电实验、胃肠肽指标测定实验、肠病理检测实验以研究附子大黄饮片配伍、组分配伍治疗阳虚便秘的作用机制;采用KM乳鼠的结肠Cajal间质细胞（结肠ICC）研究附子大黄成分配伍对结肠ICC的作用机制。结果:附子大黄饮片水煎剂按不同比例配伍对阳虚便秘模型动物的排便疗效优于单用附子或大黄,作用机制与其调节胃肠激素和肠神经递质的分泌有关。附子大黄组分配伍预防给药时,附子总碱与大黄总蒽醌2:1配伍和大黄结合型蒽醌1:1、2:1配伍对阳虚便秘模型大鼠均具有增效作用;附子大黄组分配伍治疗给药时,附子总碱与大黄总蒽醌1:2配伍对阳虚便秘模型大鼠的增效作用最优;其发挥温阳通便功效的作用机制与调控肠运动相关胃肠肽的分泌有关,主要与调节MTL、SS、AchE的水平有关。乌头碱、大黄素对KM乳鼠结肠ICC的最大毒性浓度和临界作用时间点分别为0.1%、1min、15min、30min、60min、120min、180min、240min,0.5%、1min、15min、30min,毒作用机制可能与其升高细胞内MDA含量、降低细胞介质中Na+K+-ATP酶活力和细胞内电解质含量有关;大黄素与最大毒性浓度的乌头碱按1:2配伍可拮抗乌头碱对结肠ICC的损伤,作用机制可能与其抗细胞生物膜的氧化损伤、保护细胞内环境和细胞的能量代谢有关。结论:研究结果表明:预防给药时,附子总碱与大黄总蒽醌或与大黄结合型蒽醌2:1配伍对阳虚便秘的治疗作用最优,以“扶正”为主;治疗给药时,附子总碱与大黄总蒽醌1:2配伍对阳虚便秘的治疗作用最优,以“祛邪”为主。大黄素与最大毒性浓度的乌头碱按1:2配伍对结肠ICC具有减毒增效作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词表
• 前言
• 1 配伍规律和配伍层次
• 2 附子大黄配伍
• 3 附子大黄不同配伍层次的研究意义
• 实验研究
• 第一部分 附子大黄饮片配伍对阳虚便秘模型动物的疗效与机制研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 3.1 阳虚便秘动物模型的建立
• 3.2 附子大黄饮片配伍预防给药时对阳虚便秘模型动物的疗效与机制
• 3.2.1 对阳虚便秘模型小鼠排便的影响
• 3.2.2 对阳虚便秘模型小鼠小肠推进率的影响
• 3.2.3 对阳虚便秘模型大鼠排便的影响
• 3.2.4 对阳虚便秘模型大鼠胃肠激素及肠神经递质的影响
• 3.2.5 对阳虚便秘模型大鼠小肠、结肠病理的影响
• 4 小结
• 第二部分 附子大黄组分配伍对阳虚便秘模型动物的疗效与机制研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 3.1 附子总碱与大黄各组分配伍对正常大鼠排便的影响
• 3.2 附子总碱与大黄各组分配伍预防给药时对阳虚便秘模型大鼠的疗效与机制
• 3.2.1 预防给药时对阳虚便秘模型大鼠体重和排便的影响
• 3.2.2 预防给药时对阳虚便秘模型大鼠胃肠激素及肠神经递质的影响
• 3.2.3 预防给药时对阳虚便秘模型大鼠小肠、结肠、直肠病理的影响
• 3.3 附子总碱与大黄各组分配伍治疗给药时对阳虚便秘模型大鼠的疗效
• 3.3.1 治疗给药时对阳虚便秘模型大鼠体重和排便的影响
• 3.3.2 治疗给药时对阳虚便秘模型大鼠结肠肌电的影响
• 4 小结
• 第三部分 附子大黄成分配伍对结肠ICC的作用机制研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 3.1 结肠ICC的培养方法及不同培养时间其形态变化
• 3.2 结肠ICC原代培养对数生长期的确定
• 3.3 乌头碱、大黄素对结肠ICC最大毒性浓度的确定
• 3.4 乌头碱、大黄素对结肠ICC最大毒性浓度时临界作用时间点的确定
• 3.5 乌头碱、大黄素在最大毒性浓度临界作用时间点时对结肠ICC形态损伤观察
• 3.6 乌头碱、大黄素在最大毒性浓度作用临界时间点时对细胞生物膜、细胞内环境和细胞能量代谢的影响
• 3.6.1 乌头碱、大黄素对细胞生物膜的影响
• 3.6.2 乌头碱、大黄素对细胞内环境的影响
• 3.6.2.1 乌头碱、大黄素对细胞内电解质的影响
• +K⁺-ATP酶的影响'>3.6.2.2 乌头碱、大黄素对细胞内Na⁺K⁺-ATP酶的影响
• 3.6.3 乌头碱、大黄素对细胞能量代谢的影响
• 3.7 大黄素与最大毒性浓度的乌头碱按不同比例配伍在乌头碱作用临界时间点时对细胞生物膜、细胞内环境和细胞能量代谢的影响
• 3.7.1 大黄素与最大毒性浓度的乌头碱配伍对细胞生物膜的影响
• 3.7.2 大黄素与最大毒性浓度的乌头碱配伍对细胞内环境的影响
• 3.7.2.1 对细胞内电解质的影响
• +K⁺-ATP酶的影响'>3.7.2.2 对细胞内Na⁺K⁺-ATP酶的影响
• 3.7.3 大黄素与最大毒性浓度的乌头碱配伍对细胞能量代谢的影响
• 4 小结
• 讨论
• 1 方法的建立
• 1.1 关于阳虚便秘动物模型
• 1.2 关于结肠Cajal间质细胞
• 1.3 关于均匀设计
• 2 附子大黄不同配伍层次对阳虚便秘的作用机制
• 2.1 附子大黄饮片配伍对阳虚便秘的作用机制
• 2.2 附子大黄组分配伍对阳虚便秘的作用机制
• 2.3 附子大黄成分配伍对结肠ICC的作用机制
• 3 附子大黄配伍的科学应用
• 结论
• 问题与展望
• 1 整体实验存在的问题与不足之处
• 2 细胞实验存在的问题与不足之处
• 致谢
• 参考文献
• 综述Ⅰ 便秘动物模型的研究进展
• 综述Ⅱ 肠Cajal间质细胞与肠动力
• 综述Ⅲ 附子生物碱、附子多糖、大黄蒽醌、大黄多糖的药理学研究进展
• 附件Ⅰ 在读期间参加的课题、参编的专著和发表的文章