亚急性硒中毒对雄鼠生殖与免疫的影响

论文摘要

本试验以健康雄性昆明小鼠为研究对象,设置4个剂量组：空白对照组（O.OOmg/kg）、亚硒酸钠低剂量组（1/80LD50,0.14mg/kg）、中剂量组（1/20LD50,0.54mg/kg）和高剂量组（1/5LD50,2.16mg/kg）,每天上午同一时间灌胃,连续30d。分别于染毒10d、20d和30d后,颈椎脱臼法处死小鼠,迅速采取睾丸、胸腺和脾脏,分别按不同需要进行相应的处理和保存。通过对睾丸胸腺脾脏系数、睾丸与脾脏组织学结构、精子活力与密度、精子畸形率、睾丸与脾脏能量代谢与抗氧化能力、脾脏硒含量、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏抗体形成细胞水平以及外周血中T淋巴细胞水平的检测,探讨亚急性硒中毒对小鼠生殖与免疫系统的毒性作用。研究结果如下：硒染毒后,小鼠睾丸、胸腺与脾脏的脏器系数降低,器官的正常生长发育受到破坏。对精子活力、密度及畸形率的检测结果显示,小鼠精子活力与密度明显降低,畸形率明显升高,表明亚急性硒中毒能够损伤精子的活力,影响精子的生成与发育,并且能够导致精子发生畸变.通过对睾丸组织学结构的观察,发现亚急性硒中毒能够破坏睾丸的解剖结构,使生精小管退化变性,曲细精管管壁变薄甚至破裂,睾丸间质组织细胞变性坏死,进而影响睾丸的正常生精能力与内分泌功能。应用试剂盒分别检测睾丸乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,结果表明睾丸能量代谢与抗氧化能力受损,诱发氧化应激,并且能量供应不足,导致睾丸生精能力下降。对脾脏谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）的活性以及丙二醛（MDA）和硒含量的检测,结果表明脾脏抗氧化能力下降,已发生氧化损伤；GSH-Px活性与脾脏硒含量升高,说明硒对脾脏产生蓄积毒性。通过对腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾脏抗体形成细胞水平以及外周血液中T淋巴细胞水平的检测,表明亚急性硒中毒能够分别抑制非特异性免疫、体液免疫与细胞免疫,降低机体的免疫水平。综上所述,亚急性硒中毒可以抑制小鼠生殖与免疫器官生长发育并破坏其正常结构,破坏机体抗氧化系统,抑制巨噬细胞吞噬功能,降低脾脏抗体形成细胞水平与外周血中T淋巴细胞水平。本试验从器官、细胞、亚细胞水平较系统地研究了亚急性硒中毒对小鼠生殖与免疫系统的毒性作用,证实了硒对小鼠生殖与免疫功能的双向调节作用,丰富了毒理学知识,为临床上指导适量补硒提供科学依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 硒的理化性质与分布
• 1.2 硒的生理功能
• 1.2.1 抗氧化作用
• 1.2.2 增强免疫
• 1.2.3 拮抗多种微量元素的毒性
• 1.2.4 参与雄性激素的代谢
• 1.2.5 抗肿瘤
• 1.2.6 硒的其他功能
• 1.2.7 硒的生化功能的研究进展
• 1.3 硒的代谢动力学
• 1.4 硒毒理学的研究进展
• 1.4.1 硒对抗氧化系统的毒性作用
• 1.4.2 硒对能量代谢的毒性作用
• 1.4.3 硒对生殖系统的毒性作用
• 1.4.4 硒对免疫系统的毒性作用
• 1.5 硒中毒
• 1.5.1 硒中毒的机制
• 1.5.2 硒中毒的临床表现
• 1.5.3 硒中毒的病理变化
• 1.5.4 硒中毒的防控
• 1.6 本试验的研究目的与意义
• 2 试验材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 试验动物
• 2.1.2 试验仪器
• 2.1.3 试验试剂
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 半数致死量的测定
• 2.2.2 亚急性硒中毒模型的制造
• 2.2.3 小鼠处死及器官组织的采取
• 2.3 检测项目
• 2.3.1 小鼠生殖与免疫器官脏器系数的测定
• 2.3.2 小鼠组织显微结构观察
• 2.3.3 小鼠组织超微结构的观察
• 2.3.4 小鼠精子活力与密度的检测
• 2.3.5 小鼠精子畸形率的检测
• 2.3.6 小鼠精子顶体异常的检测
• 2.3.7 小鼠睾丸能量代谢及抗氧化能力的检测
• 2.3.8 小鼠脾脏抗氧化能力的检测
• 2.3.9 小鼠脾脏一氧化氮含量的检测
• 2.3.10 小鼠脾脏硒含量的检测
• 2.3.11 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的检测
• 2.3.12 小鼠脾脏抗体形成细胞的检测
• 2.3.13 小鼠外周血液中T淋巴细胞的检测
• 2.4 数据处理
• 3 结果
• 3.1 半数致死量
• 3.2 生殖与免疫器官脏器系数
• 3.3 小鼠睾丸和脾脏显微结构
• 3.3.1 小鼠睾丸显微结构
• 3.3.2 小鼠脾脏显微结构
• 3.4 小鼠睾丸超微结构
• 3.5 小鼠精子相对密度与活力
• 3.6 小鼠精子畸形率与顶体异常
• 3.7 小鼠睾丸能量代谢及抗氧化能力
• 3.8 小鼠脾脏抗氧化能力
• 3.9 小鼠脾脏NO含量
• 3.10 小鼠脾脏硒含量
• 3.11 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能
• 3.12 小鼠脾脏抗体形成细胞
• 3.13 小鼠外周血液中T淋巴细胞水平
• 4 讨论
• 4.1 硒对小鼠脏器系数的影响
• 4.2 硒对小鼠睾丸超微和显微结构的影响
• 4.3 硒对小鼠脾脏显微结构的影响
• 4.4 亚硒酸钠对小鼠精子生成发育的影响
• 4.4.1 亚硒酸钠对小鼠精子密度的影响
• 4.4.2 硒对小鼠精子活力的影响
• 4.4.3 硒对小鼠精子畸形率与精子顶体的影响
• 4.5 硒对小鼠睾丸能量代谢的影响
• 4.6 硒对小鼠睾丸和脾脏抗氧化能力的影响
• 4.6.1 硒对小鼠睾丸抗氧化能力的影响
• 4.6.2 硒对小鼠脾脏抗氧化能力的影响
• 4.7 硒对小鼠脾脏NO含量的影响
• 4.8 硒对小鼠脾脏硒含量的影响
• 4.9 硒对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
• 4.10 硒对小鼠脾脏抗体形成细胞的影响
• 4.11 硒对小鼠外周血液中T淋巴细胞的影响
• 4.12 硒对小鼠生殖毒性与免疫毒性的比较
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士期间发表的学术论文