银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型治疗作用及其抗炎机制研究

论文摘要

支气管哮喘（bronchial asthma）,是呼吸系统常见病、多发病之一,目前认为哮喘是由多种细胞（包括嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等）和细胞组份参与的气道慢性炎症性疾病。这些细胞和细胞组份相互作用形成恶性循环,使气道炎症持续存在,成为哮喘的基本病理改变和反复发作的主要病理生理机制。银杏为银杏科银杏属植物（Ginkgo biloba）,其叶和果都具有重要药用价值,在我国宋朝就有使用银杏叶治疗哮喘和支气管炎的记载。国内外学者对银杏的化学成分、药用作用等进行了大量研究,证实了银杏叶及提取物在治疗心脑血管疾病、高血脂症均有良好的作用,同时在呼吸系统、神经系统疾病等方面也有很好的疗效。本实验建立小鼠哮喘模型,观察银杏叶主要有效成分银杏叶总黄酮（total flavonoid in leaves of Ginkgo biloba,FG）对哮喘小鼠炎症治疗的作用机制,主要内容如下:1银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型抗氧化能力的影响采用卵白蛋白致敏方法建立小鼠的哮喘模型,以地塞米松为阳性对照药,分别灌胃给予25和50mg/mL的银杏叶总黄酮水溶液,连续10天,末次给药24h后处死小鼠,眼球取血分离得血清,按试剂盒操作测定小鼠血清中SOD、MDA、羟自由基、GSH-Px和NO的含量。结果表明,银杏叶总黄酮能提高哮喘小鼠的抗氧化能力,低剂量给药组小鼠血清中SOD、MDA、和NO的含量（ 116.78±11.57U/mL;3.25±0.41nmol/mL;17.71±0.76nmol/mL）明显低于哮喘模型组（130.88±3.60U/mL;5.31±0.78nmol/mL;23.03±2.15nmol/mL）,羟自由基和GSH-Px的含量（706.90±10.49U/mL;1396.58±85.14U/mL）明显高于哮喘模型组（679.10±5.55U/mL;896.12±64.22U/mL）,差别有显著意义（P<0.05）;高剂量给药组小鼠血清中SOD、MDA、羟自由基、GSH-Px和NO的含量（81.02±4.66U/mL;1.55±0.39nmol/mL;719.16±16.71U/mL;1788.55±75.96U/mL;13.30±0.51nmol/mL）接近于正常组含量（81.18±7.75U/mL;1.80±0.47nmol/mL;740.24±16.59U/mL;1847.50±84.72U/mL;13.59±1.94nmol/mL）,差别有显著意义（P<0.05）。2银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型炎症细胞的影响嗜酸性粒细胞是引起过敏性哮喘支气管粘膜炎症的一种重要的效应细胞,被视为诱发气道黏膜损伤及气道阻塞的元凶。Eos在气道聚集,并通过脱颗粒释放介质是引起哮喘气道高反应性的重要原因。本实验分类计数了小鼠BALF中白细胞数目,HE染色观察了小鼠肺组织和气管组织的病理变化,结果显示FG给药组能减少BALF中Eos的数目,与模型组相比,差异具有显著性（P<0.01）;病理切片显示模型组支气管周围和气管粘膜、粘膜下层炎症细胞浸润显著;支气管管壁显著增厚,上皮细胞增生,基底膜增生,平滑肌增生,管腔内分泌物积聚。气管粘膜固有层血管明显增多并充血,血管内可见较多红细胞。治疗组较模型组有明显改善。3银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型炎症因子的影响嗜酸性粒细胞活化、迁徙、脱颗粒、释放毒性蛋白与细胞因子等,在哮喘的气道炎症、粘膜水肿、组织损伤、气道狭窄、可逆性气流受限及气道重塑的形成过程中,起了至关重要的作用。本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测哮喘小鼠BALF中PGE2、LTC4和ECP含量,并考察其与Eos数目的相关性。结果显示,FG给药组能能显著降低LTC4和ECP的含量,与模型组之间的差异具有统计学意义（P<0.01）,能显著增加PGE2的含量,与模型组之间的差异具有统计学意义（P<0.01）;BALF中Eos数目与PGE2、LTC4和ECP的含量存在明显相关性（R1=0.7113;R2=0.6869;R3=0.6923;P<0.01）

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 第一部分 银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型抗氧化能力的影响
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型炎症细胞的影响
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论
• 参考文献
• 第三部分 银杏叶总黄酮对小鼠哮喘模型炎症因子的影响
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论
• 参考文献
• 综合讨论
• 结论
• 致谢
• 附录:攻读硕士学位期间完成的主要论文
• 综述 哮喘治疗的潜在新靶点:T 细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3
• 参考文献