糖尿病大鼠胃黏膜免疫异常与胃动力障碍关系及中药作用

论文摘要

目的 通过研究血流干预药物止血敏的凝血和蚓激酶的活血作用以及健脾活血中药“糖胃康”对糖尿病运动障碍大鼠胃黏膜和黏膜免疫相关的神经、胃肠激素之间相互调节的影响,明确血流因素在糖尿病胃动力障碍发病机制中的作用以及神经内分泌免疫网络在糖尿病胃动力障碍发病中的作用,阐明健脾活血代表方“糖胃康”对糖尿病胃动力障碍大鼠神经内分泌免疫网络的影响。以揭示糖尿病胃动力障碍发病的内在机制,并部分明确中药“糖胃康”治疗糖尿病胃动力障碍的作用部位、环节及分子机制,为中药防治糖尿病胃动力障碍开辟新方法和理论依据,为临床治疗糖尿病胃动力障碍提供一个有效的中药制剂。 材料方法 取SPF级131只SD雄性大鼠,体重160±20g,随机分为两组,其中正常组10只,造模组121只,所有动物禁食12h后,于次日清晨空腹状态下测血糖,剔除血糖过高或偏离正常值较大的动物,称重,一次性腹腔注射0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液链脲佐菌素（STZ）给造模组,注射剂量60mg/kg,正常对照组大鼠单次腹腔注射等容量的0.1mol/L（pH4.5）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,至造模后第7天起,所有实验大鼠检测血糖值,以血糖≥16.7 mmol/L为造模成功。 将造模成功的大鼠按计算机随机数字表随机分为模型组、止血敏组（20只左右）、蚓激酶组（30只左右）和中药（30只左右）组。造模成功后第3天起,中药组大鼠予中药,以1g/1ml的水煎剂灌胃;止血敏组大鼠予止血敏灌胃;蚓激酶组大鼠予蚓激酶腹腔注射;模型组和正常组大鼠予等量蒸馏水灌胃,以上三组均每周组药6次,周日不给药。所给药物剂量相当于成人临床常用剂量2倍。 每天观察并记录动物一般状态（包括饮食、排泄、分泌物、毛发、精神状态、自主运动、眼白内障等、死亡等的变化）。每三周称体重一次,按新体重重新计算给三药的给药药量。于造模成功的第17周和第30周空腹测血糖一次,然后做胃排空实验确定糖尿病胃轻瘫大鼠模型成功建立。 第30周,从大鼠心脏采血,取血清测量胰岛素、C肽,测定血脂四项和超过氧化物歧化酶（SOD）以及丙二醛（MDA）,取血浆做血液流变学的检测;处死大鼠取其胰岛尾部进行中性甲醛固定后包埋、切片做苏木素—伊红染色（HE染色）及特殊染色—醛品红-橙黄G染色,观察胰岛破坏情况;用幽门螺杆菌试纸（Hp）对胃窦黏膜进行检测后,取胃窦分别进行中性甲醛固定、包埋、切片,做HE染色进行胃窦部黏膜、肌肉层、微血管病变和淋巴细胞的观察,然后用甲苯胺蓝染肥大细胞、Masson法观察神经纤维,用免疫组化法检测胃窦黏膜凋亡基因Bcl-2、Fas、炎性肿瘤坏死因子—α（TNF—α）和白细胞介素1（IL-1β）以及神经递质5—羟色胺（5—HT）、一氧化

论文目录

• 引言
• 第一部分：文献研究
• 1.链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病模型的研究进展
• 2.糖尿病胃动力障碍的认识
• 2.1 糖尿病胃轻瘫的发现
• 2.2 糖尿病胃肠并发症及临床表现
• 2.3 糖尿病胃瘫的研究进展
• 2.4 糖尿病胃轻瘫实验中药组的组方依据
• 3.神经内分泌免疫网络学说对糖尿病胃轻瘫发生机制的新认识
• 3.1 糖代谢是糖尿病胃动力障碍与神经内分泌免疫调节网络学说之间关系的纽带
• 3.2 神经内分泌免疫调节网络学说与胃肠道结构密切相关
• 4.糖尿病胃并发症在神经内分泌免疫方面的分子机制研究进展
• 4.1 P物质等脑肠肽与糖尿病胃肠并发症
• 4.2 糖尿病胃黏膜损伤
• 4.3 胃黏膜细胞凋亡与炎性因子、NO、肥大细胞等的研究进展
• 第二部分：实验研究
• 实验一：链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病大鼠模型及血流药物的干预
• 1.材料
• 2.方法
• 3.结果
• 实验二：糖尿病胃轻瘫大鼠胃血流的检测及胃窦黏膜细胞凋亡的病理学观察
• 1.材料
• 2.方法
• 3.结果
• 实验三：糖尿病胃动力障碍大鼠胃免疫及相关因素神经激素检测与健脾活血中药“糖胃康”的作用
• 1.材料
• 2.方法
• 3.结果
• 附录：照片
• 第三部分：讨论
• 1.糖尿病胃动力障碍大鼠血液流变学及血脂改变对胃黏膜影响
• 2.超过氧化物歧化酶（SOD）在糖尿病胃动力障碍及胃黏膜损伤方面的作用
• 3.幽门螺杆菌（Hp）感染与糖尿病胃动力障碍
• 4.胃黏膜肥大细胞、5—羟色胺（5—HT）与神经调节
• 5.糖尿病胃动力障碍的神经病变
• 6.肿瘤坏死因子（TNF-α）和IL-1β
• 7.Bcl-2和Fas的表达及免疫学意义
• 8.胃肠激素P物质（SP）和血管活性肽（VIP）免疫作用与ICC
• 9.血管内皮细胞与慢性炎症
• 10.胸腺与脾脏的病理变化
• 11.中药“糖胃康”对胃黏膜的作用
• 第四部分：小结
• 1.实验分析与小结
• 2.结论和推论
• 3.工作中的不足和今后工作的设想
• 参考文献
• 附录一：缩略表
• 附录二：在学期间发表与课题相关的文章
• 致谢