麦系作物中尿囊素的提取与分析

论文摘要

本文首次对麦系作物中尿囊素进行了研究,探索尿囊素提取、提纯条件,确定测定尿囊素的方法,研究其羟基自由基的清除能力,并进行手性对映体和同分异构体的分离。采用回流法与超声法进行单因素试验与正交试验,最佳提取条件为回流法提取试剂为60%的乙醇,料液比1:15,超声温度40℃,超声时间20 min,提取两次。用HPLC测定其含量、对羟基自由基清除率及手性对映体的拆分,含量与羟基自由基清除率以Kromasil C18为固定相柱,流动相甲醇:水（5:95,V:V ）;流速0.5 mL/min;柱温35℃;手性拆分以卵类粘蛋白手性固定相,流动相甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L）=15:85（V:V）,pH4.00;流速0.5 mL/min;柱温25℃。用自制柱层析装置纯化尿囊素提取液,洗脱剂为氯仿:甲醇（V:V）=1:3、流速2.0 mL/min、进样时间30 s。用紫外分光光度法对尿囊素同分异构体进行转化。HPLC测定尿囊素含量变异系数小于1.1% ;回收率95.80%～105.4%;最低检出限0.5μg/mL;尿囊素含量范围是77.95395.05μg/g,含量由高到低依次是辽宁麦麸、辽宁小麦、青稞麸、青稞、山东麦麸、山东小麦、大麦麸、大麦、燕麦麸、燕麦、苦荞麸、苦荞、四川麦麸、四川小麦、河套面粉香雪面粉,尿囊素清除羟基自由基清除能力与其含量高低成正比关系,经提纯尿囊素的纯度80%以上,经手性拆分尿囊素对映体完全实现拆分,分离度为2.750。UV检测pH1.929.0尿囊素为酮式结构;pH10.0012.87尿囊素全部转化为烯醇式。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1. 绪论
• 1.1 麦系作物简介
• 1.1.1 小麦
• 1.1.2 大麦
• 1.1.3 燕麦
• 1.1.4 青稞
• 1.1.5 荞麦
• 1.2 尿囊素
• 1.3 柱层析
• 1.4 手性分离
• 1.5 同分异构体
• 2 尿囊素的提取及含量测定
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 主要仪器、试剂与样品
• 2.2.2 样品
• 2.2.3 样品前处理
• 2.2.4 尿囊素的粗提
• 2.2.5 尿囊素提取条件的选择
• 2.2.6 样品提取条件的确定
• 2.2.7 样品中尿囊素的提取
• 2.2.8 色谱条件的选择
• 2.2.9 色谱条件的确定
• 2.2.10 尿囊素对照品溶液的制备
• 2.2.11 标准曲线的绘制
• 2.2.12 精密度实验
• 2.2.13 回收率实验
• 2.2.14 最低检出限
• 2.3 结果
• 2.3.1 尿囊素对照品与样品尿囊素色谱图
• 2.3.2 样品中尿囊素含量的测定
• 2.4 结论
• 3 麦系作物中尿囊素的清除羟基自由基能力的测定
• 3.1 引言
• 3.2 方法原理
• 3.3 实验部分
• 3.3.1 仪器与试剂
• 3.3.2 样品
• 3.3.3 色谱条件
• 3.3.4 催化离子的选择
• 2+用量的影响'>3.3.5 CO²⁺用量的影响
• 3.3.6 缓冲溶液pH 值的选择
• 3.3.7 过氧化氢用量的影响
• 3.4 样品对羟基自由基清除率的测定
• 3.5 结果与讨论
• 4 麦系作物中的尿囊素的提纯
• 4.1 引言
• 4.2 仪器与试剂
• 4.3 样品
• 4.4 尿囊素的提纯试验
• 4.4.1 检测方法的选择
• 4.4.2 洗脱剂的选择
• 4.4.3 洗脱剂流速的选择
• 4.4.4 进样时间的选择
• 4.5 尿囊素提纯实验
• 4.6 尿囊素对照品与样品纯化后的尿囊素液相色谱
• 4.7 尿囊素对照品与样品纯化后的尿囊素的红外光谱
• 4.7 尿囊素对照品与样品纯化后的尿囊素液相色谱-串联质谱分析
• 4.8 结果与讨论
• 5 尿囊素异构体的分离
• 5.1 尿囊素手性对映体拆分
• 5.1.1 引言
• 5.1.2 实验部分
• 5.1.3 结果与讨论
• 5.2 尿囊素同分异构体分离
• 5.2.1 引言
• 5.2.2 实验部分
• 5.2.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表学术论文情况
• 致谢