氨碘肽滴眼液中抑菌剂的处方筛选及抑菌效力验证

论文摘要

氨碘肽滴眼液是采用猪全眼球和甲状腺经胰酶和霉菌蛋白酶水解提取而成的生化制剂,主要用于早期老年性白内障,玻璃体浑浊等眼病的治疗,使用周期和频率较高。硫酸庆大霉素是其目前使用的抑菌剂之一,属氨基糖苷类,有肾毒性、耳毒性、神经肌肉毒性和过敏反应等毒副作用,有些甚至是不可逆的。因此,需要筛选新的一种安全、有效的抑菌剂。首先,从常用抑菌剂的起效pH值范围、配伍禁忌及其与氨碘肽滴眼液、包材的相容性试验来筛选抑菌剂的种类。对所选的抑菌剂进行抑菌谱及抑菌活性研究,筛选出一组抑菌谱广、抑菌活性高的复合抑菌剂,再对复合抑菌剂的使用浓度进行筛选,确定抑菌剂的处方。一种含对羟基苯甲酸酯类的复合抑菌剂被证实完全符合中国药典的有关要求,可作为替换氨碘肽滴眼液原有抑菌剂的新复合抑菌剂。建立滴眼液中抑菌剂含量测定的HPLC法,并进行方法学验证。抑菌剂C在浓度10μg/ml～80μg/ml浓度范围内线性良好(R=0.9999),平均回收率为101.0％(RSD=0.93％),抑菌剂B在浓度0.25‰～0.2%(v/v)浓度范围内线性良好(R=0.9999),平均回收率为99.9%(RSD=1.22%)。本法用于氨碘肽滴眼液中复合抑菌剂的测定,简便、准确、重现性好。处方经高温、光照影响因素试验证明了其稳定性。最终,该处方经抑菌效力验证符合2010版中国药典抑菌剂效力检查法指导原则的相关要求。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 常见污染药剂的微生物
• 1.2 抑菌剂的作用机制、分类、要求
• 1.3 抑菌剂处方研究内容
• 1.3.1 抑菌剂选用应注意的问题
• 1.3.2 抑菌剂处方研究内容
• 1.4 抑菌剂抑菌活性研究的方法
• 1.4.1 最小抑菌浓度法
• 1.4.2 牛津杯法
• 1.4.3 比浊法
• 1.5 抑菌剂的眼表毒害
• 1.6 国内、外药典、相关指导原则对抑菌剂使用和质量控制方面的要求
• 1.7 本实验的研究内容
• 第二章 抑菌剂的处方相容性研究
• 2.1 根据抑菌剂的起效pH范围筛选抑菌剂的种类
• 2.1.1 常用抑菌剂的理化性质
• 2.1.2 实验方法
• 2.2 根据配伍禁忌筛选抑菌剂的种类
• 2.2.1 常用抑菌剂的理化性质
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 抑菌剂的处方相容性研究
• 2.3.1 常用抑菌剂的性质
• 2.3.2 实验材料
• 2.3.3 实验方法
• 2.4 实验结果与分析
• 2.4.1 根据抑菌剂的起效pH范围筛选抑菌剂种类的结果
• 2.4.2 根据配伍禁忌筛选抑菌剂种类的结果
• 2.4.3 处方相容性研究实验结果
• 2.5 本章小结
• 第三章 抑菌剂的种类及使用浓度筛选
• 3.1 对羟基苯甲酸酯类最低抑菌浓度测定
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验准备
• 3.1.3 实验方法
• 3.2 复合抑菌剂的处方筛选
• 3.2.1 筛选对羟基苯甲酸乙酯和丙酯（1：1）的复合抑菌剂
• 3.2.2 筛选复合抑菌剂处方
• 3.3 复合抑菌剂的抑菌效果比较
• 3.4 复合抑菌剂使用浓度的筛选
• 3.4.1 不同浓度复合抑菌剂的抑菌效果考察
• 3.4.2 复合抑菌剂的最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 3.5 实验结果及讨论
• 3.5.1 对羟基苯甲酸酯类最低抑菌浓度试验结果
• 3.5.2 对羟基苯甲酸乙酯、丙酯（1：1）复合抑菌剂的最低抑菌浓度（MIC）
• 3.5.3 复合抑菌剂的处方筛选结果
• 3.5.4 不同处方复合抑菌剂的抑菌效果比较结果
• 3.5.5 目标处方不同浓度复合抑菌剂的抑菌活性比较结果
• 3.5.6 复合抑菌剂的最低抑菌浓度
• 3.6 本章小结
• 第四章 处方的稳定性研究
• 4.1 实验材料
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 氨碘肽中复合抑菌剂含量测定方法的建立及方法学验证
• 4.2.2 稳定性影响因素试验
• 4.3 实验结果及讨论
• 4.3.1 HPLC法测定氨碘肽滴眼液中复合抑菌剂的结果
• 4.3.2 影响因素试验结果
• 4.4 本章小结
• 第五章 复合抑菌剂的抑菌效力验证
• 5.1 实验材料
• 5.1.1 菌种
• 5.1.2 试剂
• 5.1.3 仪器
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 实验准备
• 5.2.2 菌液制备
• 5.2.3 菌液的平板菌落计数
• 5.2.4 薄膜过滤法方法验证
• 5.2.5 供试品接种
• 5.2.6 存活菌数测定
• 5.3 实验结果及讨论
• 5.3.1 薄膜过滤法方法验证结果
• 5.3.2 抑菌效力试验结果
• 5.4 本章小结
• 第六章 结论与建议
• 6.1 结论
• 6.2 建议
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的论文和申请专利