CyPA在重症急性胰腺炎中的作用及机制研究

CyPA在重症急性胰腺炎中的作用及机制研究

论文摘要

研究背景急性胰腺炎(AP)是一种潜在致死性疾病,临床上多为自限性轻型急性胰腺炎(MAP),但仍有20%的患者可发展为重症急性胰腺炎(SAP),死亡率可高达10~30%,是普通外科比较常见的凶险急腹症。近年来SAP的发病率有所上升,易早期并发器官功能衰竭(MOF)。目前认为,SAP发病过程中,白细胞尤其是中性粒细胞(PMN)的过度激活发挥十分关键的作用。运用抗PMN抗体或抗PMN血清消耗外周血PMN后,能明显减轻SAP组织损伤。研究认为SAP中,PMN致病过程多由有趋化功能的细胞因子所介导。细胞外亲环素A(CyPA)正是一种新近发现的极其重要的PMN趋化因子,CD147为其传递信号途径的膜受体。脓毒症及一些炎症疾病中,血清CyPA表达水半明显增加,与疾病的严重程度或疾病的活动性呈正相关。文献报道,CyPA与效应细胞表面的CD147相瓦作用,调控炎症反应的发生和发展。但是,国内外尚尢研究阐明CyPA在SAP发生发展中的作用。目的本研究旨在探讨SAP中血清CyPA表达的意义,分析其与组织损伤及PMN浸润的关系,血清CyPA的测定在评估AP严重程度及预后中的意义,并进一步研究SAP中CyPA调控PMN凋亡延迟的可能机制,为临床上更有效地治疗SAP提供新的理论依据。全文分三部分:第一部分,主要探讨人鼠SAP中血清CyPA的表达,分析血清CyPA表达与疾病严重程度及PMN浸润的相关性;第二部分,从临床着手,探讨血清CyPA的测定在AP严重程度及预后评估中的意义;第三部分,探讨SAP中,CyPA调控PMN凋亡延迟的可能机制。方法第一部分健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠54只,体重200~250g,随机分成三组:正常对照组(NC组):开腹后轻轻翻动十二指肠和胰腺,关腹;MAP组:以0.5%牛磺胆酸钠(1.0mL/kg)逆行胰胆管注射,诱导MAP模型;SAP组:以5%牛磺胆酸钠(1.0mL/kg)逆行胰胆管注射,诱导SAP模型。各组分别于术后3h、6h、12h处死大鼠,收集血清、胰腺和肺组织标本。测定血清淀粉酶(AMS)活性;EHSA法测定血清CVPA水平;制作胰腺和肺组织标本,HE染色用于胰腺和肺组织损伤的病理学评估;分光光度计测定胰腺和肺组织中髓过氧化酶(MPO)活性,分析CyPA与疾病严重程度及PMN浸润的相关性。第二部分2006年12月至2008年4月住院诊断为AP的69例患者(MAP 41名,SAP 28名)及健康志愿者30名被列入此次研究。发病48h内抽取患者静脉血,ELISA法检测血清CyPA水平,发病72h抽取患者静脉血测定C反应蛋白(CRP-72h),收集病人的病历资料(CT、APACHⅡ评分、有无器官衰竭等)。按照AP的严重程度、是否并发器官功能衰竭、是否发生胰腺坏死将患者分组,检验组间的血清CyPA水平差异,分析血清CyPA水平在评估AP疾病严重程度及预后的意义。第三部分2006年12月至2008年4月住院诊断为AP的30例患者(MAP及SAP组各15例)及15名健康志愿者被列入此次研究。发病48h内抽取患者静脉血,流式技术检测外周血PMN表面CD147表达;分离外周血PMN,流式技术测定其凋亡情况,RT-PCR及Western Blot法检测XIAP表达;原代培养PMN 6h,用人源重组CyPA、CD147抗体(CD147mAb)及环孢素A(CsA)干预PMN,RT-PCR及Western Blot法检测XIAP表达变化,探讨CyPA调控PMN凋亡延迟的可能机制。结果第一部分1.与NC组比较,MAP、SAP组各时间点(3h、6h、12h)血清AMS活性均显著升高,胰腺损伤(水肿、出血、坏死和炎症)病理学评分均显著增加(P<0.001);与MAP组比较,SAP组各时间点(3h、6h、12h)血清AMS活性、胰腺损伤(水肿、出血、坏死和炎症)病理学评分均增加更显著(P<0.001)。因此,我们采用不同浓度的牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射成功地建立了SAP及MAP大鼠模型。2.与NC、MAP组比较,SAP组各时间点(3h、6h、12h)血清CyPA表达水平均显著升高(P<0.001);各时间点血清CyPA水平与胰腺损伤的严重程度正相关(3h:r=0.793,P<0.001;6h:r=0.845,P<0.001;12h:r=0.856.P<0.001)。3.SAP组胰腺及肺组织中大量PMN浸润,MPO活性明显升高,与NC组、MAP组比较,SAP组各时间点(3h、6h、12h)胰腺及肺组织MPO活性显著增加(P<0.001)。血清CyPA水平胰腺及分组织MPO活性呈正相关(胰腺:3h r=0.860,P<0.001,6h r=0.899,P<0.001,12h r=0.919,P<0.001;肺:3h r=0.554,P=0.017,6h r=0.711,P<0.001,12h r=0.878,P<0.001)。第二部分1.与NC、MAP组比较,SAP组血清CyPA及CRP-72h水平均升高(P<0.001),SAP组较MAP组升高史显著(P<0.001)。血清CyPA与CRP-72h变化一致,两者之间有相关性(r=0.754,P<0.001)。2.与无器官功能衰竭组比较,器官衰竭组血清CyPA水半更高,两者之间有显著差异(P<0.001)。与无胰腺坏死组比较,胰腺坏死组血清CyPA水平高,两者之间有显著差异(P<0.001)。3.与血清CRP-72h比较,血清CyPA能更好的评估AP的严重程度及预后。第三部分1.SAP组外周血PMN凋亡延迟,与NC、MAP组比较,有显著差异(P<0.001)。SAP组外周血PMN XIAP mRNA及蛋白表达水平增加,与NC组、MAP组比较,有显著差异(P<0.001)。2.NC、MAP及SAP组外周血PMN均有CD147表达,SAP组较NC、MAP组外周血PMN CD147表达显著增强(P<0.001),SAP组较MAP组升高更显著(P<0.001),说明SAP组外周血PMN的炎性活性更高。3.不同浓度CyPA作用正常人外周血PMN 6h,其凋亡随CyPA浓度增加呈双相变化。当CyPA浓度≤200ng/mL时,CyPA抑制PMN凋亡,CyPA对PMN凋亡的抑制作用随浓度增加而增加,当浓度>200ng/mL时,CyPA对PMN凋亡的抑制作用随浓度增加而减弱。PMN表达XIAP mRNA及蛋白水平变化同凋亡变化一致。5.以200ng/mL CyPA作用NC、MAP及SAP组外周血PMN 6h,各组外周血PMN XIAP mRNA及蛋白水平均增加,SAP组较NC、MAP组增加更显著(P<0.001)。SAP组外周血PMN炎性活性更高。6.CsA及抗CD147mAb,能够阻断CyPA(200ng/mL)上调外周血PMN XIAP mRNA及蛋白的表达,推测CyPA与PMN表面CD147相互作用,通过增加PMN XIAP表达,抑制其凋亡。结论我们的研究显示SAP中血清CyPA表达增加,可作为评估AP严重程度及预后的早期指标;同时发现SAP中,CyPA-CD147相互作用介导PMN组织浸润,增加PMN XIAP表达,抑制PMN凋亡,调控炎症的发生发展。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 目录
  • 缩略词
  • 第一部分 大鼠重症急性胰腺炎血清CyPA表达的意义
  • 1.前言
  • 2.技术路线
  • 3.材料与方法
  • 4.结果
  • 5.讨论
  • 6.结论
  • 第二部分 血清CyPA测定在评估急性胰腺炎严重程度及预后中的意义
  • 1.前言
  • 2.技术路线
  • 3.材料与方法
  • 4.结果
  • 5.讨论
  • 6.结论
  • 第三部分 CyPA调控中性粒细胞凋亡延迟在重症急性胰腺炎中的机制研究
  • 1.前言
  • 2.技术路线
  • 3.材料与方法
  • 4.结果
  • 5.讨论
  • 6.结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 攻读学位期间的研究成果
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    • [1].肥胖对急性胰腺炎作用的研究进展[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2019(07)
    • [2].腹腔穿刺置管引流联合奥曲肽治疗重症急性胰腺炎的临床效果[J]. 临床医学研究与实践 2019(35)
    • [3].生物标志物对急性胰腺炎严重程度的早期预测[J]. 中华重症医学电子杂志(网络版) 2019(04)
    • [4].连续性肾脏替代治疗不同治疗时机对重症胰腺炎疗效的影响[J]. 中国民康医学 2019(20)
    • [5].生长抑制素治疗急性胰腺炎的临床研究[J]. 首都食品与医药 2019(24)
    • [6].重症胰腺炎应用半剂量生长抑素配合奥曲肽的治疗效果观察[J]. 智慧健康 2019(33)
    • [7].超声引导鼻肠管置放在胰腺炎早期肠内营养支持中的应用[J]. 中国医疗器械信息 2019(22)
    • [8].对重症急性胰腺炎患者实施循证护理的效果观察[J]. 当代医药论丛 2019(20)
    • [9].肠内营养联合厚朴排气合剂辅助治疗重症急性胰腺炎的效果观察[J]. 临床合理用药杂志 2019(34)
    • [10].生长抑素应用于急性胰腺炎患者临床治疗的有效性分析[J]. 系统医学 2019(23)
    • [11].急性胰腺炎采用奥曲肽及加贝酯的整体治疗效果分析[J]. 智慧健康 2019(36)
    • [12].比较微创手术与传统常规治疗对早期重症急性胰腺炎的治疗效果[J]. 中国医药指南 2019(34)
    • [13].个性化健康教育对急性胰腺炎的护理效果探讨[J]. 中外女性健康研究 2020(01)
    • [14].头孢曲松联合雷尼替丁治疗急性胰腺炎的临床效果[J]. 临床医学研究与实践 2020(02)
    • [15].生长抑素与质子泵抑制剂治疗急性胰腺炎的临床效果分析[J]. 临床医药文献电子杂志 2019(85)
    • [16].循证护理对重症急性胰腺炎的护理效果分析[J]. 实用临床护理学电子杂志 2019(48)
    • [17].综合护理对急性胰腺炎患者的应用效果探析[J]. 中国社区医师 2019(35)
    • [18].用生长抑素联合硫酸镁对接受内镜下逆行胰胆管造影术后发生急性胰腺炎的患者进行治疗的效果[J]. 当代医药论丛 2019(22)
    • [19].奥曲肽不同给药方法治疗急性胰腺炎的临床效果[J]. 世界最新医学信息文摘 2019(A5)
    • [20].生长抑素联合泮托拉唑治疗急性胰腺炎的临床观察[J]. 临床合理用药杂志 2020(02)
    • [21].急性胰腺炎:影像结构化报告的构建[J]. 磁共振成像 2020(02)
    • [22].轻度急性胰腺炎患者不同进食时间对转归的影响[J]. 北京医学 2020(01)
    • [23].胆囊结石合并急性胰腺炎早期行腹腔镜胆囊切除术的疗效研究[J]. 中外医疗 2019(36)
    • [24].急性胰腺炎的危险因素和早期治疗研究进展[J]. 吉林医学 2020(02)
    • [25].一例白虎急性胰腺炎病例分析[J]. 科技风 2020(06)
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    • [27].急性胰腺炎临床研究进展与展望[J]. 中国实用外科杂志 2020(02)
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    • [29].生长抑素与泮托拉唑钠治疗重症急性胰腺炎的临床效果对比分析[J]. 心理月刊 2020(04)
    • [30].中性粒细胞与淋巴细胞比值及红细胞分布宽度在评估急性胰腺炎严重程度中的研究进展[J]. 中国当代医药 2020(04)

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