论文题目: 食管癌和癌前病变组织、食管癌和永生化细胞系中NF-κB和Id-1的变化研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 内科学
作者: 李健
导师: 王立东
关键词: 食管癌,高发区,癌前病变,免疫组织化学,转染,质粒,食管上皮永生化细胞,食管癌细胞株
文献来源: 郑州大学
发表年度: 2005
论文摘要: 食管癌 (Esophageal Cancer,EC)是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一,具有显著的地域性分布差异,5年生存率仅为10%左右,预后极差。河南省林州市及其毗邻的辉县、安阳等地区是我国,也是世界上食管癌发病率和死亡率最高的地区;过去几十年,国内外科学家对该地区的长期研究提示:食管上皮癌变是一个多阶段演进和多基因变化(累积或叠加)综合作用的结果。食管癌高易感人群早期重要特征是食管基底细胞增生异常,形态学上表现为基底细胞过度增生(basal cell hyperplasia,BCH),间变(dysplasia,DYS)和原位癌(carcinoma in situ,CIS),这些病变被认为是食管癌前病变:食管癌前病变的显著生物学特征是其双向发展的不稳定性,即这些病变可维持多年不变,或向着癌的方向发展,或退回到较轻的病变,那么,决定食管癌前病变不稳定发展的关键因素是什么?特别是形态学相似的癌前病变出现不同方向发展变化的机制是什么?导致轻度癌前病变持续向着癌的方向发展的关键因素是什么?很显然,单纯从形态学的角度难以回答这些问题。我们的假设是:形态学相似的癌前病变可能具有不同的分子变化,这种分子变化可能是导致癌前病变不稳定性发展的关键因素。进一步阐明这种变化的特征和规律,不仅有助于了解食管癌变机制,而且具有重要的临床应用价值(早期诊断,高危人群筛选等)。 我们及其它实验室最近的研究提示:食管癌变演进是多种基因变化先后累积或叠加综合作用的结果。肿瘤抑制基因p53-Rb系统变化是河南食管癌高发区人
论文目录:
前言
第一部分 NF-κB与食管癌
引言
一、主要试剂和仪器
1．主要仪器
2．主要试剂和试剂盒
3．菌株、细胞株和质粒
4．培养基
5．工具酶
6．主要溶液
二、实验材料
三、实验方法
1．组织标本免疫组织化学辣根过氧化物酶ABC法
2．细胞准备
2．1 细胞复苏
2．2 细胞传代
2．3 细胞冻存
2．4 细胞转染
3．培养细胞免疫组织化学
4．细胞核蛋白提取
5．RNA提取
6．RT-PCR扩增目的基因
6．1 反转录
6．2 反转录效果检测
7．Westernblot检测
7．1 SDS-PAGE凝胶电泳
7．2 转膜
7．3 Western-blot
7．4 显色
四、食管癌组织和细胞系中NF-κB免疫组化研究
1．NF-κB免疫组织化学结果判断
2．统计分析
3．NF-κBp65蛋白的表达结果
4．NF-κBp50蛋白的表达结果
5．NF-κBp65和NF-κBp50之间的相关
6．食管癌细胞株、食管上皮永生化细胞系中NF-κBp65、NF-κBp50的免疫组化结果
五、pcDNA3.1/mlκBαS32A／S36A质粒转化食管癌细胞株
1．pcDNA3.0/mlκBαS32A／S36A质粒转化和转染
1．1pcDNA3.0/mlκBαS32A／S36A质粒转化JM109感受念细胞
1．2pcDNA3．0／mlκBαS32A／S36A质粒的提取
1．3pcDNA3．0／mlκBαS32A／S36A质粒的鉴定
1．4pcDNA3．0／mlκBαS32A／S36A在EC1细胞中瞬时表达
2 结果
2．1 EC1瞬时表达细胞株中NF-κB蛋白的检测
2．2 转染质粒后对EC1细胞增殖能力的影响
2．3 转染质粒后对EC1细胞NF-κBmRNA检测
六、Westernblot检测食管癌组织和细胞株中NF-κB蛋白
1 病理材料
2 结果
2．1 NF-κBp65蛋白
2．2 NF-κBp50蛋白
七、RT-PCR检测食管癌组织和细胞株中NF-κBmRNA
1 病理材料
2 引物设计
3 结果
3．1 NF-κBp65mRNA检测
3．2 NF-κBp50mRNA检测
八、讨论
第二部分 Id-1与食管癌
引言
一、主要试剂和仪器
1．主要仪器
2．主要试剂和试剂盒
3．细胞株和培养基
4．主要溶液
二、实验材料
三、实验方法
1．组织标本免疫组织化学辣根过氧化物酶ABC法
2．细胞准备
3．培养细胞的免疫组织化学
4．细胞核蛋白提取
5．RNA提取
6．RT-PCR扩增目的基因
7．Westernblot检测
四、食管癌组织和细胞系中Id-1蛋白的表达
1．Id-1免疫组织化学结果判断
2．统计分析
3．ID-1蛋白的表达结果
4．食管癌细胞株、食管上皮永生化细胞系Id-1的免疫组化结果48
五、Westernblot检测食管癌组织和细胞株中Id-1蛋白 ．48
1．病理材料
2．Westernblot结果
六、RT-PCR检测食箭癌组织和细胞株中ID-1mRNA
1．病理材料
2．引物设计
3．结果
七、讨论
参考文献
后记
综述一 食管上皮永生化细胞系研究进展
一、细胞永生化的概念
二、永生化细胞的分子学机制
三、食管上皮永生化细胞的建立
四、食管上皮永生化细胞的变化
五、食管上皮永生化细胞系的应用及意义
参考文献
综述二 Id、NF-κB与肿瘤
一、Id与肿瘤
二、NF-κB与肿瘤的关系
三、Id-1与NF-κB的关系
参考文献
英文缩写词表
附录
致谢
发布时间: 2005-10-25
参考文献
- [1].胸腹腔镜联合食管癌手术临床研究[D]. 郎保平.郑州大学2017
- [2].BRCA1结合蛋白BRAP促进食管癌侵袭转移[D]. 赵艳洁.北京协和医学院2017
- [3].COX-2、STAT信号转导通路在食管上皮癌变中的表达及尼美舒利抗食管癌作用机制研究[D]. 刘俊茹.河北医科大学2006
- [4].COX-2在食管上皮癌变中的作用及戊地昔布抗食管癌的机制研究[D]. 张玉军.河北医科大学2006
- [5].食管癌特异及相关肿瘤抗原的研究[D]. 彭良平.中国协和医科大学2001
- [6].食管癌血管形成及抗血管治疗的实验研究[D]. 郭文忠.中国协和医科大学2000
- [7].食管癌血清分泌蛋白的蛋白质组学研究及血清白蛋白结合蛋白的鉴定[D]. 何洪智.中国协和医科大学2004
- [8].食管癌血清蛋白标志物的研究[D]. 毛友生.中国协和医科大学2004
- [9].1. 食管癌表达上调基因NADH氧化还原酶MLRQ亚基的研究和临床意义 2. 食管癌表达上调SLP-2基因反义载体的构建和功能研究[D]. 王涛.中国协和医科大学2002
- [10].食管癌癌前血清分子标志物的研究及应用[D]. 李江伟.中国协和医科大学2005
相关论文
- [1].河南林州地区同一个体食管癌前病变和癌组织分子变化的特征[D]. 李吉学.郑州大学2003
- [2].食管上皮细胞的COX-2表达、调控与细胞永生化及丝裂霉素C抗性[D]. 庄则豪.郑州大学2003
- [3].食管癌前病变逆转和阻断治疗的动物实验及临床研究[D]. 吴明利.河北医科大学2005
- [4].河南高低发区食管/贲门癌及癌前病变患者血清蛋白质质谱变化研究[D]. 王道存.郑州大学2005
- [5].NF-κB p50、p65和IκBα与食管鳞癌发生和浸润转移的关系及其作用机制的研究[D]. 李道明.郑州大学2005
- [6].河南食管癌高发区食管鳞癌及癌旁组织比较蛋白质组研究[D]. 齐义军.郑州大学2006
- [7].同一个体食管癌变过程中p16甲基化、缺失和蛋白表达变化及其对细胞增殖的影响[D]. 余炜伟.郑州大学2006
- [8].食管癌和贲门癌及癌前病变患者血清多种自身抗体微阵列检测[D]. 杜芳.郑州大学2006
- [9].NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞增殖、抗凋亡中的作用机制及其阻断策略[D]. 田芳.郑州大学2006
- [10].河南食管癌高发区食管癌前病变和癌组织MGMT，XPC，POLβ和p53变化特征[D]. 王智卿.郑州大学2006
标签：食管癌论文; 高发区论文; 癌前病变论文; 免疫组织化学论文; 转染论文; 质粒论文; 食管上皮永生化细胞论文; 食管癌细胞株论文;