论文摘要
南瓜系葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物,是世界性主要食用蔬菜种类之一。目前,世界上可食用蔬菜作物种类有129种,南瓜的综合营养作用在这些蔬菜中排在前列。它富含多种氨基酸、多糖、类胡萝卜素、维生素和矿物质,具有降血糖、降血压、抗癌、抗氧化等生物活性。因此,南瓜更应该说是富有多种营养成分和保健功效的功能性蔬菜,具有巨大的开发应用潜力。目前研究较多的是南瓜的降血糖作用,而抗氧化作用研究很少,且仅限于南瓜多糖体外抗氧化研究上,南瓜的其它活性物质的体外抗氧化活性,尤其在保护DNA和线粒体免受氧化损伤等方面的研究未见报道。为了探讨南瓜活性成分的体外抗氧化活性,为南瓜的食用价值、药用价值以及作为天然抗氧化剂提取原料的开发利用提供实验依据,本课题选取金皮南瓜为材料,采用回流萃取技术对其有效成分进行了提取、纯化、浓缩,并对提取物进行了有效成分含量测定,采用体外化学模拟法对提取物的体外抗氧化活性、对DNA和线粒体的保护进行了研究,实验主要分三部分进行:第一部分:南瓜有效成分提取和活性成分含量测定,包括多酚、还原糖、总黄酮和类胡萝卜素四种成分的含量测定。第二部分:南瓜提取物（Cucurbita moschata Duch.Extract,CE）的化学模拟法体外抗氧化实验,包括清除自由基实验、还原力测定、总抗氧化力测定和抑制脂质过氧化实验。第三部分:CE保护pUC18质粒DNA和肝线粒体抗氧化损伤的实验,实验构建自由基诱导损伤体系,检测CE的抗DNA氧化损伤能力、抗线粒体脂质过氧化能力、抑制线粒体肿胀能力、清除线粒体中·O2-能力、抑制羰基生成能力以及保持ATPase活性作用。主要的实验结果如下:1.与前期所做的南瓜醇提物（pumpkin ethanol extract,PEE）体外抗氧化实验的结果进行比较发现,在用乙醇回流提取的基础上,增加石油醚萃取和乙酸乙酯萃取后,可除去大量的油脂、蛋白质以及水溶性杂质。CE中有效成分主要是多酚、还原糖,其次是总黄酮,另外还含少量类胡萝卜素,其中多酚含量22.46%,还原糖含量20.72%,总黄酮含量10.24%,类胡萝卜素2.50%,活性成分总含量超过50%,可以预期,比PEE有更好的抗氧化活性。2.CE清除自由基能力较强,并呈良好的剂量效应关系,可有效清除DPPH·、·O2-和·OH,IC50分别为1.47mg/mL,4.51mg/mL和0.14mg/mL。羟自由基是已知的最强的氧化剂,几乎能和所有的细胞成分发生反应,对机体危害巨大,而CE能显著清除·OH,因此它在抗氧化方面有良好的开发前景。3.CE具有较强的还原能力,且有较好的剂量依赖性。总抗氧化力显著,1mg/mL的CE总抗氧化能力好于Vc,接近于BHT。对脂质过氧化有抑制作用,但作用不明显,最大抑制率为45.81%。4.CE（0.85mg/mL）对pUC18质粒DNA的氧化损伤有显著的保护作用。5.CE能显著抑制线粒体肿胀和蛋白质羰基化,保证了线粒体的膜内外渗透压;通过有效清除线粒体·O2-、抑制脂质过氧化以及维持ATPase酶活性,保护线粒体膜。研究表明,CE具有显著的抗氧化活性,能有效抗DNA和肝线粒体的氧化损伤。本文的研究结果为南瓜在抗氧化方面的开发利用提供实验依据。