中药对骨髓间充质干细胞免疫调节作用干预的实验研究

论文摘要

研究背景 自身免疫病（Autoimmunity disease,AID）属于难治性疾病,严重危害着人类健康,目前尚无满意的治疗药物。长期以来,现代医学实施的标准治疗是激素非特异性免疫抑制疗法,疗效虽已被证实,但只能改善症状,不能有效地从根本上控制疾病的发生和发展,且毒性、副作用大,不能长期持续应用。故急需寻找开发高效、低毒乃至无毒的免疫调节药物。中医药学的临床实践表明,大量天然药物及其植物来源的单体或有效部位对自身免疫病具有一定的预防、治疗作用,中药免疫调节剂应用具有毒副作用小、疗效好等特点,日益广泛地应用于临床,因而成为自身免疫病药物开发的一个新领域。 骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs）是一种存在于骨髓中的非造血干细胞,具有自我更新、高度增殖及多向分化的能力。研究发现MSCs除具有支持造血,促进体内造血功能重建外,在骨髓移植中还具有抑制移植物抗宿主病（graft-versus-host disease,GVHD）的作用,表明MSCs具有免疫调节功能。有关MSCs免疫调节作用的机理,目前认为主要与其抑制T淋巴细胞对刺激的反应性有关。因MSCs具有免疫调节的功能,故在治疗自身免疫病和诱导移植耐受中有着广泛的应用前景。自体或异体骨髓移植已经证实在治疗自身免疫病中有确切的疗效,骨髓干细胞移植已成为治疗风湿性关节炎等自身免疫病的一种新的思路。 中医疗法强调通过调动或调整机体的内在机制（自稳调节机制）以恢复机体自我调节能力。因此研究中药对MSCs免疫调节作用的影响,维护机体内源性正常的免疫调节行为,可能是中医药免疫调节作用研究的一个理想的模型。本文通过观察中药对MSCs免疫调节作用的干预的实验研究,探索中药免疫调节作用的机理,合理评价中药的免疫调节作用。 研究方法及结果 本实验以PHA、PMA、ConA、LPS刺激大鼠淋巴细胞作为反应体系,观察SD大鼠MSCs（rat MSCs,rMSCs）对淋巴细胞体外活化增殖的影响。进一步明确rMSCs是否具有抑制淋巴细胞对刺激反应性的作用,通过RT-PCR、ELISA方法,初步探讨其作用的可能机理。在此基础上,观察中药有效部位或单体对rMSCs抑制淋巴细胞增殖作用的影响,借此研究中药免疫调节作用的可能机理。 1、rMSCs的体外分离、培养和鉴定

论文目录

• 引言
• 第一部分 文献研究
• 自身免疫病及其治疗研究概况
• 中药免疫调节作用研究概况
• 骨髓间充质干细胞免疫调节作用及其临床应用研究概况
• T细胞与自身免疫病及骨髓间充质干细胞诱导T细胞耐受
• 第二部分 研究方法与研究结果
• 第一章 大鼠骨髓MSCs的分离、纯化、培养与鉴定
• 一、材料和方法
• 二、实验步骤
• 三、指标观测
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 六、结论
• 第二章 大鼠淋巴细胞活化增殖反应体系的建立
• 一、材料、仪器和试剂
• 二、试剂配制
• 三、实验方法
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 六、结论
• 第三章 rMSCs对淋巴细胞活化增殖的抑制作用
• 一、材料、仪器和试剂
• 二、实验方法
• 三、统计学处理
• 四、实验结果
• 五、讨论
• 六、结论
• 第四章 中药对rMSCs抑制淋巴细胞增殖作用的干预作用
• 一、材料、仪器和试剂
• 二、中药单体、有效部位配制
• 三、实验方法
• 四、统计学处理
• 五、实验结果
• 六、讨论
• 七、结论
• 第五章 rMSCs免疫调节作用及中药对其干预机理初步研究
• 一、RT-PCR法检测细胞因子的mRNA的表达
• 二、ELISA法检测培养上清液细胞因子含量
• 三、讨论
• 四、结论
• 第三部分 讨论与展望
• 一、结论
• 二、创新性
• 三、展望
• 参考文献
• 附录Ⅰ 附图
• 附录Ⅱ 本论文中使用的主要英文缩略词
• 附录Ⅲ 博士在读期间发表的论文
• 致谢