肝癌相关分子的蛋白质组学研究及HSP27的功能验证

论文题目: 肝癌相关分子的蛋白质组学研究及HSP27的功能验证

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 宋海燕

导师: 刘银坤

关键词: 肝细胞性肝癌,肿瘤发生,肿瘤转移,双向凝胶电泳,热休克蛋白,干扰

文献来源: 复旦大学

发表年度: 2005

论文摘要: 肝癌是诊治困难、预后极差的一种恶性肿瘤,全球肝癌发病率、病死率均位居各肿瘤前列,转移复发是影响肝细胞性肝癌(human hepatocellular carcinoma,HCC)术后生存的最大障碍。肝癌的发生发展以及转移复发均是多因素参与的多环节的病理过程,传统的单基因研究模式限制了肝癌相关因素的研究发展。近年来迅速发展的蛋白质组学研究,能动态、整体、定量地考察疾病发生发展过程中全部蛋白质种类和数量的变化,对于探讨疾病机理、寻找疾病诊断的特异性标志物和药物治疗的靶标来说,是一种有效的高通量的研究模式,可获得一些传统手段无法得到的新蛋白标志物、新关键分子,极大地丰富诊断标志物的选择组合及复杂致病机理的全面阐明。运用该研究策略,本研究通过对转移和非转移人肝细胞性肝癌组织、肝癌与癌旁组织的全蛋白质组表达谱差异分析,筛选出一些有潜在应用价值的差异蛋白质,并对其中的差异分子HSP27在肝癌组织和肝癌细胞系中进行验证,同时采用RNA干扰技术以及与癌发生、侵袭等生物学特性有关的鉴定方法对HSP27进行了功能分析。第一部分人肝细胞性肝癌组织转移相关的蛋白质组学研究本部分的研究目的是应用双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合基质辅助的激光解吸离子化—飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)等蛋白质组学技术,对临床和病理上均发现有转移的HCC组织和未发生转移的HCC组织的全蛋白质差异表达谱进行分析,筛查在转移过程中发挥重要作用的差异蛋白分子。选择在临床和病理上提示有转移和未发生转移的肝细胞癌组织各6例,提取肝癌组织总蛋白,应用非线性pH3～10,长24cm的固定pH梯度的IPG胶条和12.5%的SDS-PAG进行双向凝胶电泳分离总蛋白,每一例样本均分别进行2次双向电泳以保证重复性,用Image Master软件对两组的全蛋白质组表达谱进行差异分析。结果在相同条件下,转移组(M组)平均检测到1102±56(n=12)个

论文目录:

中文摘要

英文摘要

引言

第一部分人肝细胞性肝癌组织转移相关的蛋白质组学研究

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分人肝细胞性肝癌、癌旁组织比较蛋白质组学分析

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分差异蛋白HSP27的验证及功能分析

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

文献综述

附件

致谢

论文声明

发布时间: 2005-09-19

参考文献

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肝癌相关分子的蛋白质组学研究及HSP27的功能验证

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