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5-HT对日本新糠虾（Neomysis japonica）和中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）生长和发育影响的研究

2020-12-14阅读(648)

5-HT对日本新糠虾（Neomysis japonica）和中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）生长和发育影响的研究

论文摘要

日本新糠虾（Neomysis japonica）为糠虾科（Mysidae）新糠虾属（Neomysis Czerniavsky）,是我国广为分布的糠虾类型。目前将糠虾作为环境监测的一种很好的模式动物,已被国内外广泛接受。中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）隶属于十足目（Decapoda）、爬行亚目（Reptantia）、方蟹科（Grapsidae）、绒螯蟹属（Eriocheir）,俗称河蟹、大闸蟹。是我国甲壳类动物养殖业的支柱产业之一。近年来,有关中华绒螯蟹的高效健康养殖一直受到人们的重视。生物胺作为一类重要的生物活性物质,广泛分布于甲壳动物的神经系统和外周器官。5-HT（5-hydroxytryptamine）是一种胺类衍生的神经递质,对动物生理和行为的调节起到广泛的作用,如葡萄糖代谢,昼夜节律,行为,摄食和繁殖等。本研究通过观察5-HT对日本新糠虾和中华绒螯蟹生长发育、繁殖、蜕壳的影响,以及体内5-HT含量测定和5-HT免疫组织化学定位。旨在为糠虾性腺发育,中华绒螯蟹生长蜕壳及甲壳动物繁殖生理方面的研究提供基础理论依据和形态学资料。本实验采用不同方式将5-HT作用于日本新糠虾和中华绒螯蟹,探究5-HT对日本新糠虾生长、繁殖的影响和对中华绒螯蟹生长、蜕壳的影响,同时用酶联免疫法（Elisa）和高效液相色谱法（HPLC）测定日本新糠虾和中华绒螯蟹体内5-HT含量。还采用免疫组化方法定位5-HT在日本新糠虾体内的分布。现有研究结果如下:1. 5-HT对日本新糠虾生长、繁殖和抗菌力影响的研究1)糠虾经5-HT短期浸泡后,其存活率降低,体长、体重没有显著变化,性成熟时间明显缩短,以低剂量作用更为明显。2)5-HT会延长育卵内糠虾的发育时间,但这种延长有随剂量升高渐减少的趋势。而对孵出幼体个数、体长,及孵出后母体的体长无影响。3)5-HT短期浸泡后,并未在糠虾体内引起积累,对糠虾抗菌力无影响。2. 5-HT对中华绒螯蟹的仔蟹和幼蟹生长蜕壳的影响1)5-HT对中华绒螯蟹仔蟹的生长、蜕壳时间和存活率没有显著影响。2)5-HT对中华绒螯蟹幼蟹生长没有显著影响。不同处理组的蜕壳时间存在显著差异,其中眼柄切除组的蜕壳时间最短,低剂量5-HT注射组次之,高剂量5-HT注射组时间最长。存活率和蜕壳率在各组间存在差别,最高的是正常养殖组。各处理组中华绒螯蟹蜕壳后的体内5-HT含量存在显著差异。3.日本新糠虾卵巢和肝胰腺内5-HT的免疫组织化学定位1)结果表明:各期卵巢卵细胞和滤泡细胞及肝胰腺细胞中均存在大量5-HT阳性细胞,阳性物质呈深棕色;各期卵巢中5-HT在滤泡细胞内均呈阳性;在I、II和III期卵巢中卵细胞胞质和胞核均呈阳性,且阳性强度呈递减;Ⅳ期卵巢中5-HT在卵细胞中呈阴性,而在V期卵巢中5-HT在卵细胞中又呈现弱阳性。2)5-HT在发育各期的肝胰腺细胞中均呈阳性。同一期卵巢中,不同类型肝胰腺细胞间5-HT的分布没有差别。除IV期卵巢外,在其余各期卵巢中5-HT阳性强度在卵细胞胞质和肝胰腺细胞胞质中表现一致。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 引言
  • 第一章 5-HT 对甲壳动物生长发育的研究进展
  • 1.1 5-HT 的理化特性
  • 1.2 5-HT 的功能及作用机制
  • 1.3 5-HT 对水产动物生长繁殖、免疫、蜕壳和卵巢发育等方面的影响
  • 1.4 其它生物胺对水产动物生长和生理的研究进展
  • 第二章 5-HT 对日本新糠虾生长、繁殖和抗菌力的影响
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 实验分组与处理
  • 2.1.2 养殖条件
  • 2.1.3 5-HT 含量测定
  • 2.2 结果
  • 2.2.1 5-HT 对存活率、体长、体重和性成熟时间的影响
  • 2.2.2 5-HT 对胚胎发育时间，孵出个体数量，孵出幼体体长和母体体长的影响
  • 2.2.3 溶藻弧菌（V.alginolyticus）对经5-HT 短期处理后成熟糠虾存活的影响
  • 2.2.4 组织中5-HT 含量
  • 2.3 讨论
  • 第三章5-HT 对中华绒螯蟹的仔蟹和幼蟹生长的影响
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 实验材料
  • 3.1.2 实验方法
  • 3.1.3 数据采集
  • 3.2 实验结果
  • 3.2.1 仔蟹的实验结果
  • 3.2.2 幼蟹的实验结果
  • 3.3 讨论
  • 第四章 日本新糠虾卵巢和肝胰腺主要细胞内5-HT 的免疫组织化学定位
  • 4.1 材料与方法
  • 4.1.1 糠虾培养与样品制备
  • 4.1.2 免疫组织化学染色
  • 4.2 结果
  • 4.2.1 卵巢各期卵细胞和滤泡细胞关系及肝胰腺细胞组成
  • 4.2.2 卵细胞和滤泡细胞及肝胰腺中5-HT 阳性定位
  • 4.2.3 卵细胞和滤泡细胞及肝胰腺中的5-HT 阳性强度
  • 4.3 讨论
  • 4.3.1 5-HT 在卵巢中的分布
  • 4.3.2 5-HT 对卵巢发育的调节作用
  • 第五章 结论
  • 本文创新点
  • 展望
  • 参考文献
  • 附录一 评估两种饵料（冰鲜野杂鱼和配合饲料）对中华绒螯蟹（Eriocheir sinesis）生长、消化酶活力及血细胞影响的初步研究
  • 附录二 免疫组织化学的实验步骤
  • 附录三 溶藻弧菌的人工感染模型的建立
  • 致谢

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