公鸡慢性氟中毒生殖毒性研究

公鸡慢性氟中毒生殖毒性研究

论文摘要

为探讨高氟对鸡生殖毒性的影响,本实验将30只公鸡随机分为试验组和对照组,每组15只,两组均饲喂相同全价饲料,对照组饮用自来水,试验组饮用添加了3250mg/LNaF的自来水,均行自由采食和自由饮水,以此复制慢性氟中毒模型,测定不同实验时间公鸡精子密度、精子活力、精子畸形率、血浆和睾丸组织丙二醛(MDA)、唾液酸(SA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力、血浆睾丸酮(Tst)和黄体生成素(LH)的含量、血浆氟含量、睾丸/体重比、睾丸生精细胞凋亡率和不同周期生精细胞的比例,并对氟中毒鸡睾丸组织进行了光镜和电镜观察,从生物化学和细胞遗传学的角度探讨了慢性氟中毒对公鸡生殖性能的影响及其机理。研究结果如下: 1.染氟组公鸡精子数量减少,活力降低,精子畸形率升高,与对照组比较差异极显著(P<0.01),且呈显著的时间—效应关系。精子畸形率和精子活力的变化率明显大于精子密度变化率。 2.染氟组公鸡血浆和睾丸组织MDA含量较对照组明显升高(P<0.01),SOD、GSH-Px的活性和S A的含量较对照组明显降低(P<0.01),并且血浆中MDA、SOD和GSH-Px都呈一定的时间-效应关系,但SA未呈明显的时间—效应关系。SOD和GSH-Px活性的下降率在睾丸中明显大于在血浆中。 3.染氟组公鸡血浆睾丸酮和黄体生成素的含量较对照组明显降低(P<0.01)。 4.染氟组公鸡血浆氟含量较对照组明显升高(P<0.01),并呈一定的时间-效应关系。 5.染氟组鸡睾丸重和体重均显著低于对照组,睾丸/体重比也明显低于对照组(P<0.01)。 6.染氟组生精细胞凋亡率从均数上看较对照组有增高的趋势。 7.从均数上看,染氟组G0/G1期细胞比例有高于对照组的趋势,S期细胞有低于对照组的趋势。 8.睾丸组织形态学观测结果,光镜下:染氟鸡睾丸曲细精管破裂,细胞脱落于生精小管管腔,各级生精细胞变性、坏死、核浓缩、碎裂、溶解,精子畸变,间质细胞肿胀、变性、坏死。电镜下:生精细胞、间质细胞和支持细胞细胞内线粒体肥大、断裂、消失;内质网肿胀、扩张及液泡化;胞膜、核膜缺损,核固缩、异形。 结论及意义: 1.本实验采取饮水加氟3250mg/L的方法成功复制出公鸡慢性氟中毒模型,说明此剂量可以导致鸡慢性氟中毒。 2.本实验证实高氟显著降低鸡精子质量且呈明显的时间—效应关系,首次提出高氟具有蓄积性的精子毒性;本实验首次证实精子畸形率和精子活力的变化率比精子密度变化率大,说明高氟抑制精子质量核心在抑制精子畸形率和精子活力。 3.本研究首次证明高氟可显著的降低实验组鸡的睾丸重、体重和睾丸重与体重的比值,说明高氟能显著抑制鸡的生长和及睾丸发育,而且高氟抑制鸡睾丸发育的作用更大。 4.本研究证实高氟显著降低鸡血浆和睾丸匀浆中部分酶的活性且具显著的时间—效应关系,并且本实验首次发现SOD和GSH-Px活性的下降率在睾丸中明显大于在血浆中,证明氟可影响机体此几种酶的活性,但对睾丸酶活性具有更大的影响。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 第一章 文献综述
  • 1 氟的研究简史
  • 2 氟的生理作用
  • 3 不同动物对氟的易感性
  • 4 氟的毒性作用
  • 4.1 氟致骨骼和牙齿的损害
  • 4.2 氟致循环系统的损害
  • 4.3 氟致神经系统的损害
  • 4.4 氟致呼吸系统的损害
  • 4.5 氟致消化系统的损害
  • 4.6 氟致泌尿系统的损害
  • 4.7 氟致生殖系统的损害
  • 4.8 氟中毒的作用机理
  • 5 氟中毒的诊断
  • 6 氟的检测方法
  • 7 氟中毒的综合防制
  • 第二章 研究的目的与意义
  • 第三章 材料与方法
  • 1 实验动物
  • 2 染毒方法
  • 3 主要试剂与仪器
  • 4 观测指标
  • 5 观测方法
  • 5.1 精子密度检测
  • 5.2 精子活力检测
  • 5.3 精子畸形率检测
  • 5.4 血浆氟测定
  • 5.5 血浆睾丸酮和LH测定
  • 5.6 血浆和睾丸组织匀浆部分酶指标测定
  • 5.7 睾丸/体重比测定
  • 5.8 睾丸细胞凋亡率及不同周期生精细胞比例测定
  • 5.9 睾丸组织的光镜和电镜病理学观察
  • 6 数据的处理
  • 第四章 实验结果
  • 1 精子质量测定结果
  • 1.1 精子密度检测结果
  • 1.2 精子活力检测结果
  • 1.3 精子畸形率检测结果
  • 2 血浆和睾丸组织部分酶指标的测定结果
  • 2.1 血浆MDA含量的测定结果
  • 2.2 血浆SOD活性的测定结果
  • 2.3 血浆GSH-Px活性的测定结果
  • 2.4 血浆SA含量的测定结果
  • 2.5 睾丸组织部分酶指标的测定结果
  • 3 血浆Tst和LH的测定结果
  • 4 血浆氟含量的测定结果
  • 5 睾丸/体重比测定结果
  • 6 睾丸组织生精细胞凋亡率测定结果
  • 7 睾丸组织不同周期细胞比例测定结果
  • 8 睾丸组织光镜和电镜观察结果
  • 第五章 分析与讨论
  • 1 选择饮水染氟的理由和染氟剂量的确定
  • 2 慢性氟中毒对公鸡精子质量的影响
  • 3 慢性氟中毒对公鸡血浆和睾丸组织部分酶活性的影响
  • 4 慢性氟中毒对公鸡血浆睾丸酮和黄体生成素含量的影响
  • 5 慢性氟中毒对公鸡血浆氟含量的影响
  • 6 慢性氟中毒对公鸡睾丸/体重比的影响
  • 7 慢性氟中毒对公鸡睾丸生精细胞凋亡率的影响
  • 8 慢性氟中毒公鸡对睾丸组织不同分裂周期细胞比例的影响
  • 9 慢性氟中毒对公鸡睾丸组织形态学的影响
  • 第六章 结论
  • 第七章 本论文的创新点
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
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