论文摘要
目的:研究M-CSF对RAW264.7细胞MMP-9表达的影响及相关机制。 方法:用不同浓度的M-CSF(0 ng/ml,100ng/ml,250ng/ml,500ng/ml的M-CSF)处理RAW264.7细胞和无血清细胞上清液24小时。明胶酶图分析方法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性。250ng/mlM-CSF诱导RAW264.7细胞8小时后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-9 mRNA的表达。M-CSF处理RAW264.7细胞不同时间(0min,3min,5min,10min,20min),Western blotting法观察p-ERK1/2的表达。不同浓度的M-CSF处理RAW264.7细胞,Western blotting法观察p-ERK1/2的表达。ERK1/2阻断剂PD98059预处理RAW264.7细胞,然后给予250ng/ml M-CSF分别处理20min、24小时。Westernblotting法观察p-ERK1/2的表达,明胶酶图分析方法检测MMP-9的活性。实验数据以(?)±S表示,用SPSS11.0统计软件进行统计分析。 结果:M-CSF呈浓度依赖性促进MMP-9活性增强,而M-CSF对上清液中的MMP-9活性无明显影响。经250ng/ml M-CSF诱导RAW264.7细胞8小时后,M-CSF促进MMP-9 mRNA的表达。经250ng/mlM-CSF处理不同时间,M-CSF
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