论文摘要
由Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo)引起的白叶枯病是世界范围内危害最为严重的植物细菌病害之一。不同的白叶枯病抗病基因对不同的Xoo生理小种具有特异的抗性。水稻中已经鉴定大约30个主效抗白叶枯病基因,其中9个为隐性抗病基因。本研究分析了水稻品种DV86、DV85和AUS295对白叶枯病所具有的抗性。研究证实DV86、DV85和AUS295在苗期和孕穗期都可以对白叶枯菌PX099产生抗性。除此之外,研究证实了在DV86中含有的是一个完全隐性基因,也即xa24,还发现xa24同样影响该品种在苗期和孕穗期对菲律宾小种1、2、4和6以及中国生理小种JL691产生抗性,同时使稻蔸再生苗对菲律宾小种10和中国生理小种Zhe173和KS-1-21产生抗性。本实验从612个SSR分子标记中分别筛选出121个、118个和122个在AUS295和IR24之间、DV85和IR24、DV86和IR24之间有较好多态性的SSR分子标记,构建了两个DV86/IR24 F2群体对xa24进行定位。本研究采用图位克隆法为技术路线,首先利用210个单株的DV86/IR24 F2随机群体和那122个分子标记将该基因定位在水稻第2染色体长臂上,在遗传距离大约8.9 cM的范围之内。它位于SSR标记RM482和RM138之间,在距标记RM482一端8cM,而距另一端离第二染色体末尾较近的RM138标记0.9cM的位置。利用SSR标记RM482和RM138来筛选第二个群体中选取的400个极端抗病单株和300个极端感病单株中的重组单株。在RM482和RM138之间又选取了6个在两亲本之间有多态性的SSR标记RM14201、RM14206、RM14212、RM14213、RM14222和RM14226来检测这20个重组单株。最后将该基因定位在RM14222和RM14226之间水稻第2染色体末端大约71kb的区段内。对相应含有xa24等位基因的DNA区段进行序列分析发现该基因可能编码一个不同于任何已知抗病基因产物的新型蛋白。这些结果将非常有利于分离和克隆xa24工作的展开。而这些在定位中发掘的分子标记将会是针对抗病基因xa24的分子标记辅助选择育种进程中起到一定的作用。