急性热应激对番鸭和蛋鸭NPY、NPY5R及CCK基因表达的影响

论文摘要

我国大部分地区,尤其是长江以南地区,夏季持续高温天气,蛋鸭发生明显的热应激反应,引起产蛋率及其他生产性能下降,造成巨大的经济损失,已成为我国养鸭业发展的瓶颈。蛋鸭耐寒不耐热,适宜的生产温度为15-25℃,在夏季气温高于32℃时,呼吸频率开始上升,代谢产热增加,蛋鸭即处于热应激状态,此时蛋鸭的呼吸、消化、代谢、血液循环、血液生化指标、内分泌、免疫等均受到一定程度的影响。相对于蛋鸭而言,原产于热带地区的番鸭则喜暖怕寒,而且对应激的反应也不那么敏感。热应激对家禽最重要的影响是降低其采食量,而下丘脑在调节动物摄食与能量平衡中起重要作用。神经肽Y（NPY）是较早被发现且促食欲功能最强的下丘脑神经肽之一,涉及采食的短期调控和能量的长期调控,是下丘脑食欲调节网中最重要的功能因子之一,其调控作用主要是通过与Y1、Y2和Y5受体结合而发挥的。胆囊收缩素（CCK）则是食欲外周调节系统中一种重要的脑肠肽,同时分布于中枢及胃肠道,具有抑制食欲的功能。中枢NPY和CCK在应激反应中均发挥作用,尤其是NPY。本试验选取这两个在采食调节中具有代表性的基因,研究热应激前后不同鸭种中两者的表达变化。将热应激试验组与对照组番鸭和蛋鸭置于相同的饲养环境中适应两个小时,对照组保持室温不变,热应激组迅速升温至40℃,维持三小时。应激结束后断颈处死并迅速取出组织置于液氮内。提取组织总RNA后进行反转录,然后用荧光定量PCR法检测各组织NPY、NPY5R及CCK mRNA的表达水平。结果显示,热应激组番鸭下丘脑、肾上腺、腺胃、肺、小肠和腿肌等组织的NPY表达水平增加,而垂体、卵巢、肌胃和心等NPY表达水平降低；热应激组蛋鸭心、垂体、肺等组织NPY表达增加,而下丘脑、肾上腺、肌胃、腿肌等表达降低。对照组蛋鸭下丘脑NPY表达比番鸭高,而热应激组蛋鸭表达比番鸭低；对照组和热应激组蛋鸭肾上腺NPY表达都比番鸭低；对照组和热应激组蛋鸭垂体、肌胃、心、肺、腿肌NPY表达都比番鸭高。热应激组番鸭下丘脑NPY5R和CCK与对照组相比表达增加,而热应激组蛋鸭下丘脑NPY5R和CCK表达比对照组少。对照组蛋鸭下丘脑NPY5R和CCK表达比番鸭高,而热应激组蛋鸭比番鸭表达低。热应激导致番鸭中枢NPY、NPY5R及CCK表达增加,这与早前其他文献报道的结果吻合,可能与HPA轴、HPT轴及交感神经活性的变化有关；而在蛋鸭下丘脑的结果与番鸭完全相反,可能与三种蛋白在番鸭和蛋鸭表达的品种差异性以及对热应激的不同适应性有关。

论文目录

• 目录
• 摘要
• ABSTRACT
• 縮略符号
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 热应激对家禽生产的影响概述
• 1.1.1 热应激对生产性能的影响
• 1.1.2 热应激对生理机能的影响
• 1.2 动物采食调节机制
• 1.2.1 中枢调节系统
• 1.2.2 外周调节系统
• 1.3 NPY研究进展
• 1.3.1 NPY结构与分布
• 1.3.2 NPY序列的同源性
• 1.3.3 NPY受体
• 1.3.4 NPY的作用
• 1.3.5 NPY与其受体在动物采食调节中的作用
• 1.4 实验动物生产性能简介
• 1.4.1 余姚番鸭
• 1.4.2 绍兴鸭
• 1.5 实时荧光定量PCR技术
• 1.5.1 实时荧光定量PCR的原理
• 1.5.2 实时荧光定量PCR的数据分析方法
• 1.6 本研究目的与意义
• 第二章 急性热应激对番鸭和蛋鸭各组织NPY、NPY5R和CCK表达的影响
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 试验结果
• 2.2.1 RNA琼脂糖凝胶电泳检验
• 2.2.2 PCR产物琼脂糖凝胶电泳检验
• 2.2.3 荧光定量RCR条件
• 2.2.4 番鸭荧光定量RCR结果
• 2.2.5 蛋鸭荧光定量RCR结果
• 2.2.6 番鸭和蛋鸭和基因表达的对比
• 2.3 讨论
• 2.3.1 番鸭与蛋鸭抗应激能力的差别
• 2.3.2 应激的不同阶段
• 2.3.3 番鸭NPY及其受体表达水平变化原因及机理探讨
• 2.3.4 番鸭下丘脑CCK表达水平变化原因及机理探讨
• 2.3.5 蛋鸭下丘脑NPY、NPY5R及CCK表达水平降低原因及机理探讨
• 2.3.6 热应激前后番鸭与蛋鸭各基因表达差异的可能原因
• 全文结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢