眼针治疗脑缺血再灌注大鼠损伤对bFGF、MMP-9表达影响的实验观察

论文摘要

目的：研究眼针治疗脑缺血再灌注损伤的病因病理机制，及观察眼针对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、基质金属蛋白酶（MMP-9）的影响，根据试验结果尝试找到有效方法减少脑缺血再灌注损伤，对治疗脑缺血病具有临床指导意义。MMP-9的T等位基因被认为与脑缺血与脑出血的发病有关。当脑缺血和脑出血发病时T等位基因增高，则会导致基因转录增强，蛋白质表达量增加，从而MMP-9在脑缺血和脑出血时明显增加，引起血清水平增高，造成脑部毛细血管通透性增加，可引起血脑屏障的破坏及外渗，从而导致髓鞘脱失，造成脑损伤。当缺血脑损伤发生的同时，机体变会应激启动内源性保护机制，诱导神经营养因子保护修复受损神经。bFGF是神经营养因子之一，作用是：1.能够对抗神经元的凋亡；2.抑制兴奋性氨基酸的毒性；3.稳定海马神经元细胞内的Ca2+平衡而增强其对缺血的抵抗性，而且bFGF还能提高海马神经元对兴奋性毒性氨基酸的耐受性。中华眼针，是本院国家级名老中医彭静山教授依据中医经络理论学说创立出来的。应用于临床30余年来，治疗中风病疗效显著，明显降低中风患者的致残率，提高生活量，减轻社会负担。本实验通过观察MMP-9与bFGF在大鼠脑缺血再灌注组织中的表达情况，旨在为眼针的科学研究应用推广提供科学实验依据。对象与方法：将SD大鼠40只根据随机原则平均分成4组，对照类分别为空白对照组和模型组，治疗类分别为眼针组、体针组。采用大脑中动脉线栓法制作局灶脑缺血再灌注大鼠模型。保持大鼠局灶性脑缺血2h后进行再灌注，于再灌注24h后进行治疗观察，采用Longa评分标准，合格者进入下一步操作，注意随时补充因不合格或死亡淘汰的大鼠，确保每组10只。空白对照组：健康SD大鼠不予处理，正常喂养，不给予任何治疗措施。模型组：造模成功后，正常喂养，不给予任何治疗措施。眼针组：造模制作成功后，在灌注24h后给予眼针治疗1次。选取28号0.5寸毫针，针刺眼区的双侧上、下焦区、肝区和肾区穴，下焦区和肝区采用平补平泄法，下焦针刺方向向内，留针25min。体针组：造模制作成功后，再灌注24小时后给予体针治疗一次，取百会、水沟、足三里。对符合要求的大鼠迅速断头取脑，然后采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测MMP-9及bFGF的阳性表达水平。结果：实验结果显示从运用酶联免疫吸附法（ELISA）处理过的脑组织超薄切片观察MMP-9和bFGF的阳性表达水平：MMP-9在模型组表达最多，眼针组和体针组均有所减少，以眼针组表达下调最明显。在模型组中bFGF表达不明显，在眼针、体针治疗组bFGF表达均增强，其中以眼针治疗组上调最明显。结论：眼针治疗脑缺血再灌注时脑组织损伤的机制是通过抑制MMP-9的表达，来减轻血脑屏障的破坏，抑制受损神经元的凋亡；通过增强bFGF的表达，来加快缺血损伤组织的修复和新血管的再生，从而对脑缺血再灌注时的脑组织起到保护作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 中英文对照表
• 前言
• 文献综述
• 1 神经营养因子 bFGF 与 MMP-9 的研究进展
• 2 眼针的研究进展
• 3 问题与展望
• 1.实验动物与材料
• 2.方法
• 3.统计学处理
• 结果
• 分析讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历