论文摘要
目的:用Tunnel法检测结肠黑变患者结肠粘膜的凋亡,通过Bcl-2、CDX2的检测分析其与结肠腺瘤的关系,评估其癌变风险,以及为结肠黑变病的防治提供一定的理论基础。方法:1:选取肠镜镜下诊断结肠无器质性病变者为正常对照组,数目:30例;选取经肠镜,病理及特殊染色证实为结肠黑变患者作为结肠黑变组,数目为:30例;选取经肠镜,病理的证实为结肠腺瘤的患者作为结肠腺瘤组,数目为:30例。各组年轮、性别具有可比性。2:用特殊染色法确定结肠黑变病切片。3:①普通电镜下观察;②t未端标记法检测结肠粘膜细胞的凋亡情况;③透射电子光镜观察凋亡情况。4:免疫组化检测Bcl-2的表达。5:免疫组化检测CDX2的表达。结果:1:特殊染色结果:①普鲁士蓝染色排除含铁血黄素所致;②尼氏(Ziehl-Neelsen)及PAS呈阳性,色素为深紫色,证实为脂褐素类物质;③嗜银染色(Masson-Fontana法)见该色素变灰黑,证明其有嗜银性;由以上几点明确是为结肠黑变病切片。2:电子光镜结果:黑变组结肠粘膜细胞之间的连接稍显疏松,凋亡数目增加,细胞内褐色颗粒成分明显增加。3:凋亡检测结果:正常对照的凋亡率是1.3±1.1%,结肠黑变组的凋亡率是4.9±2.0%.结肠腺瘤组的凋亡率是10.9±3.6%,结肠腺瘤组凋亡率稍高于结肠黑变组,而结肠黑变组凋亡率显著高于正常组,各组之间p<0.01.差异有统计学意义。4: Bcl-2的免疫组化结果:正常对照组的Bcl-2的阳性率10.0%,结肠黑变组是66.7%,结肠腺瘤组76.7%,X2=23.7,df=2,p<0.01,可认为正常对照组、结肠黑变组及结肠腺瘤组的Bcl-2表达的阳性率有显著性差异。5:正常对照组的CDX2的阳性率是93.3%,结肠黑变组的CDX2的阳性率为70.0%,结肠腺瘤组的CDX2的阳性率为66.7%。故X2=7.081,P<0.01,正常对照组与结肠黑变组之间差别有统计学意义,正常对照组与结肠腺瘤组之间差别有统计学意义,而结肠黑变组与结肠腺瘤组之间阳性率比较,X2=0.077,p>0.05,差别无统计学意义。结论:1.结肠黑变病患者结肠粘膜的凋亡增加。2.结肠黑变病结肠粘膜的Bcl-2阳性表达率较正常结肠粘膜明显增高,与结肠腺瘤相近。3.结肠黑变病结肠粘膜的CDX2的阳性率显著低于正常结肠粘膜,与结肠腺瘤相近。