延边地区特殊梨品种分类地位的研究

论文摘要

苹果梨、身不知、朝鲜洋梨、延边谢花甜产于吉林省延边地区,品质优良,是我国北方珍贵的梨树地方良种资源。然而,这些品种的起源及亲缘关系,迄今尚不十分清楚。为此,我们应用RAPD分子标记技术,并结合孢粉学、同工酶等常规分类鉴定技术,对延边地区梨品种资源进行系统分类研究,并对苹果梨、身不知、朝鲜洋梨、延边谢花甜等特殊品种资源的分类地位问题进行探讨,主要研究结果如下: 1、摸索出一种新的DNA提取方法—CTAB改良法,从梨成熟叶片中提取到高质量、高纯度DNA。 2、采用经优化的反应体系,用筛选的12个引物对30个供试梨品种进行了RAPD分析,通过聚类分析和相似系数比较,认为将身不知和朝鲜洋梨归为砂梨系统、苹果梨归为白梨系统比较适宜,延边谢花甜应归为秋子梨系统。 3、从花粉粒大小及纹饰特征来看,身不知、朝鲜洋梨、苹果梨花粉粒性状独特,有些性状与东方梨系统相似,有些性状与西洋梨相近;延边谢花甜与秋子梨花粉粒表面纹饰相似。通过对18个供试品种7个性状聚类,身不知、朝鲜洋梨带有更多的砂梨系统血缘,苹果梨更倾向于白梨系统,延边谢花甜属于秋子梨系统。 4、通过过氧化物酶同工酶酶谱分析,苹果梨的酶带比较特殊,同时具有4个栽培种的特征酶带,身不知、朝鲜洋梨、延边谢花甜的酶带中含有西洋梨系统的1-2条特征酶带,通过相似系数比较和聚类分析,苹果梨与白梨系统亲缘关系较近,身不知归为砂梨系统比较适宜,延边谢花甜归为秋子梨系统,朝鲜洋梨与白梨和砂梨亲缘关系较近。 5、通过对三种鉴定结果的比较,认为RAPD分析实验结果更可靠。苹果梨在现有栽培种中与白梨系统亲缘关系更近一些,是否应上升种一级阶元有待进一步研究;身不知和朝鲜洋梨的确具有洋梨系统血缘,但是与砂梨系统的亲缘关系更近;延边谢花甜归属于秋子梨系统。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 我国梨的地位及发展趋势
• 2 延边地区梨栽培及研究现状
• 3 与本研究有关的果树分类鉴定方法及其应用
• 3.1 同工酶鉴定及其应用
• 3.2 孢粉学鉴定及其应用
• 3.3 RAPD分子标记鉴定及其应用
• 4 本研究的目的意义
• 一 延边地区特殊梨品种RAPD分类研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 供试品种
• 1.1.2 酶及主要试剂
• 1.1.3 主要仪器
• 1.1.4 溶液配制
• 1.2 方法
• 1.2.1 基因组总DNA提取
• 1.2.2 DNA模板质量检测
• 1.2.2.1 紫外分光光度计检测
• 1.2.2.2 电泳检测
• 1.3 RAPD反应体系的优化与扩增
• 1.4 电泳分析
• 1.5 数据处理及分析
• 2 结果与分析
• 2.1 基因组DNA提取方法的确立
• 2.2 RAPD分析优化反应体系的建立
• 2.2.1 DNA浓度对RAPD扩增结果的影响
• 2.2.2 引物浓度对RAPD扩增结果的影响
• 2+浓度对RAPD扩增结果的影响'>2.2.3 Mg²⁺浓度对RAPD扩增结果的影响
• 2.2.4 dNTP浓度对RAPD扩增结果的影响
• 2.2.5 Taq DNA聚合酶浓度对RAPD扩增结果的影响
• 2.3 引物筛选
• 2.4 供试类型的RAPD分析
• 2.4.1 供试类型的RAPD扩增结果
• 2.4.2 供试类型的聚类结果
• 2.4.3 苹果梨的聚类结果分析
• 2.4.4 身不知的聚类结果分析
• 2.4.5 朝鲜洋梨的聚类结果分析
• 2.4.6 延边谢花甜的聚类结果分析
• 3 讨论
• 3.1 梨属植物基因组DNA的提取
• 3.2 影响RAPD标记重复性和稳定性的几个因素
• 3.3 关于苹果梨的分类地位研究
• 3.4 关于身不知的分类地位研究
• 3.5 关于朝鲜洋梨的分类地位研究
• 3.6 关于延边谢花甜的分类地位研究
• 二 延边地区特殊梨品种孢粉学分类研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 边地区梨品种的花粉形态观察
• 2.1.1 身不知
• 2.1.2 朝鲜洋梨
• 2.1.3 延边谢花甜
• 2.1.4 苹果梨
• 2.1.5 尖把梨
• 2.1.6 南果梨
• 2.1.7 早酥梨
• 2.2 梨属主要栽培种的花粉形态观察
• 2.2.1 西洋梨的花粉形态观察
• 2.2.2 东方梨的花粉形态观察
• 2.3 延边特殊梨品种与梨属主要栽培种的花粉比较观察
• 2.4 延边特殊梨品种的孢粉学分类地位
• 3 讨论
• 三 延边地区特殊梨品种的过氧化物酶同工酶研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 主要仪器及主要试剂
• 1.3 方法
• 1.3.1 酶液提取
• 1.3.2 电泳与染色
• 1.3.3 酶谱记录和凝胶保存
• 1.3.4 谱带解析
• 2 结果与分析
• 2.1 过氧化物酶同工酶谱型及其分析
• 2.1.1 梨属4个主要栽培种的过氧化物酶同工酶谱型及其分析
• 2.1.2 延边地区特殊梨品种过氧化物酶同工酶谱型及其分析
• 2.1.2.1 苹果梨
• 2.1.2.2 身不知
• 2.1.2.3 朝鲜洋梨
• 2.1.2.4 延边谢花甜
• 2.2 相似系数
• 2.3 聚类分析
• 2.4 延边特殊梨品种的分类地位研究
• 2.4.1 苹果梨的分类地位
• 2.4.2 身不知的分类地位
• 2.4.3 朝鲜洋梨的分类地位
• 2.4.4 延边谢花甜的分类地位
• 3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢