维吾尔族妇女宫颈癌细胞株的建立与生物学特性的研究

论文摘要

目的：建立维吾尔族妇女宫颈癌细胞株并观察其生物学特性，为维吾尔族妇女宫颈癌的病因学研究及临床治疗途径提供实验材料。方法：无菌切除维吾尔族妇女子宫颈低分化鳞状细胞癌的手术标本，用酶消化法体外培养，连续传代稳定生长后，测定细胞活力绘制细胞生长曲线。采用光镜、电镜观察细胞形态并进行细胞周期和染色体分析。检测裸鼠接种后的成瘤率。用免疫荧光和免疫组化法测定细胞株肿瘤标记物（CK17、CD44）、（CK14、Ki-67、Vimentin）的表达情况。结果：酶消化法体外培养获得维吾尔族妇女宫颈癌原代细胞，持续培养12个月，传代70代，细胞呈多边形，上皮样细胞排列贴壁生长，无接触抑制，生长稳定，群体倍增时间为51.91小时，集落形成率为32.5%/15.6%。超微结构显示，细胞表面有较多突起或微绒毛，胞浆内有大量的杆状、棒状体和较典型的桥粒结构，核异型性明显。染色体数目在32-97条之间，大多数在54-86条之间（60.33%），结构为人类染色体。裸鼠接种可形成移植瘤，组织病理形态学和患者原始肿瘤一致。细胞株肿瘤标记物（CK17、CD44、Ki-67、Vimentin）呈阳性表达，CK14呈阴性表达。结论：通过酶消化法体外培养建立的维吾尔族妇女宫颈癌细胞株具有人宫颈鳞状上皮细胞癌的特点，与原发癌保持相同的生物学特性，体外连续传代培养12个月，细胞形态及生长周期恒定，可望成为一个稳定的细胞系。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 宫颈癌的概况和研究现状
• 2 原代培养技术
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 建立细胞株的组织来源
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要材料和仪器
• 1.4 主要液体的配制
• 1.5 实验动物
• 2 方法
• 2.1 细胞培养
• 2.2 细胞生长曲线的绘制和形态学观察
• 2.3 细胞周期和染色体分析及集落形成的观察
• 2.4 细胞分子标志物检测
• 2.5 异种移植及病理学分析
• 2.6 细胞支原体污染检测及减血清培养
• 3 技术路线
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表