半胱胺对仔猪免疫机能的影响及其机理研究

半胱胺对仔猪免疫机能的影响及其机理研究

论文摘要

在仔猪日粮中添加不同剂量半胱胺,研究半胱胺对仔猪抗氧化酶活性、细胞免疫、体液免疫、肠黏膜免疫以及血清生长激素水平和胸腺和脾脏中生长激素受体(GHR)表达的影响,探索不同剂量半胱胺对仔猪免疫机能的作用及其机制。选用90头临床检查健康的新生“杜×长×大”三元杂交仔猪,随机分为3组,每组30头。在14日龄时,组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ仔猪分别饲喂基础日粮、基础日粮+120 mg·kg-1半胱胺、基础日粮+200 mg·kg-1半胱胺。每组随机选取20头仔猪,分别在14、24、32、45日龄进行前腔静脉采血,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和血清免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)、白细胞介素-2、生长激素(GH)水平及淋巴细胞转化率、白细胞吞噬率。在试验结束时(45日龄),每组随机选取6头仔猪进行屠宰,分别采集脾脏、胸腺、十二脂肠近端1/4、空肠近端1/4、空肠远端1/4和回肠中段,测定脾脏、胸腺内GHR的表达量以及小肠上皮间淋巴细胞和杯状细胞数量。试验结果表明:(1)半胱胺显著增强了仔猪血清中抗氧化酶的活性试验期间,3组仔猪血清SOD活性和GSH-Px活性均随日龄增加呈上升趋势。与组Ⅰ相比,24日龄时,组Ⅲ仔猪血清SOD活性提高11.1%(P<0.05);32日龄时,组Ⅱ和组Ⅲ分别提高13.6%(P<0.01)和15.42%(P<0.01);45日龄时,组Ⅲ提高19.34%(P<0.01)。在45日龄,组Ⅲ仔猪血清SOD活性显著高于组Ⅱ。与组Ⅰ相比,24日龄时,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清GSH-Px活性分别提高了19.22%(P<0.01)和26.09%(P<0.01);32日龄时,分别提高了42.72%(P<0.01)和52.65%(P<0.01);45日龄时,分别提高15.34%(P<0.01)和36.31%(P<0.01)。在45日龄,组Ⅲ仔猪血清GSH-PX活性极显著高于组Ⅱ。(2)半胱胺显著提高了仔猪血液淋巴细胞转化率与组Ⅰ相比,32日龄时,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血液淋巴细胞转化率分别提高15.03%(P<0.01)和19.08%(P<0.01);45日龄时,分别提高了17.93%(P<0.01)和24.70%(P<0.01)。在45日龄,组Ⅲ仔猪血液淋巴细胞转化率较组Ⅱ提高5.74%(P<0.05)。(3)半胱胺显著提高了仔猪白细胞吞噬率在14和24日龄,3组仔猪血液白细胞吞噬率无显著差异(P>0.05)。与组Ⅰ相比,32日龄时,组Ⅲ仔猪血液白细胞吞噬率提高9.68%(P<0.05);45日龄时,组Ⅱ和组Ⅲ分别提高了11.44%(P<0.01)和26.37%(P<0.01)。在45日龄,组Ⅲ仔猪血液白细胞吞噬率较组Ⅱ提高13.39%(P<0.01)。(4)半胱胺显著提高了仔猪血清免疫球蛋白水平仔猪随着日龄的增长,血清IgM、IgA、IgG的含量均呈上升趋势。与14日龄相比,45日龄时,3组仔猪血清IgM含量分别提高了15.08%、25.10%(p<0.01)和18.64%。但整个试验期,3组仔猪血清IgM水平无显著差异(P>0.05)。32日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ较组Ⅰ血清IgA水平分别提高10.52%(P<0.05)和15.69%(P<0.01);45日龄时,组Ⅲ较组Ⅰ提高19.14%(P<0.01),较组Ⅱ提高12.75%(P<0.01)。32日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ较组Ⅰ血清IgG水平分别提高43.54%(P<0.01)和50.01%(P<0.01);45日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ较组Ⅰ分别提高24.39%(P<0.05)和36.52%(P<0.01),组Ⅲ较组Ⅱ提高9.64%(P<0.05)。(5)半胱胺对仔猪小肠上皮间淋巴细胞数量有显著影响与组Ⅰ相比,45日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ仔猪小肠上皮间淋巴细胞数量均有显著增加。在十二指肠近端,与组Ⅰ相比,组Ⅱ、组Ⅲ分别增加了10.68%(P<0.05)和26.68%(P<0.01)。与组Ⅱ比较,组Ⅲ增加了14.46%(P<0.05);在空肠近端,组Ⅱ、组Ⅲ分别比组Ⅰ增加了21.43%(P<0.01)和37.16%(P<0.01);在空肠远端,组Ⅱ、组Ⅲ分别比组Ⅰ增加了19.35%(P<0.05)和29.03%(P<0.01),组Ⅲ比组Ⅱ增加8.11%(P<0.05);在回肠中段,与组Ⅰ相比,组Ⅱ、组Ⅲ分别增加了25.94%(P<0.05)和37.06%(P<0.01),组Ⅲ比组Ⅱ升高8.82%(P<0.05)。(6)半胱胺对仔猪小肠上皮间杯状细胞数量有显著影响与组Ⅰ相比,45日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ仔猪小肠上皮间杯状细胞数量均有显著或极显著增加。在十二指肠近端,与组Ⅰ相比,组Ⅱ、组Ⅲ分别增加了50.15%(P<0.05)和130.33%(P<0.01)。与组Ⅱ相比,组Ⅲ上升了53.40%(P<0.05);在空肠近端,组Ⅱ、组Ⅲ分别比组Ⅰ增加了69.28%(P<0.05)和138.57%(P<0.01)。与组Ⅱ相比,组Ⅲ上升了40.93%(P<0.05);在空肠远端,与组Ⅰ相比,组Ⅱ、组Ⅲ分别增加了46.38%(P<0.05)和94.00%(P<0.01)。组Ⅲ比组Ⅱ升高32.53%(P<0.05);在回肠处,与组Ⅰ相比,组Ⅱ、组Ⅲ分别增加了63.19%(P<0.01)和110.58%(P<0.01)。(7)半胱胺对仔猪血清中IL-2含量有显著影响14日龄时,3组仔猪间血清IL-2的水平差异均不显著(P>0.05)。与组Ⅰ相比,24日龄时,组Ⅲ提高了8.94%(P<0.05);32日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ分别提高了10.43%(P<0.01)和14.99%(P<0.01);45日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ分别提高了7.62%(P<0.05)和17.22(P<0.01)。与组Ⅱ相比,45日龄时组Ⅲ提高了8.92%(P<0.05)。(8)半胱胺对仔猪血清GH水平有显著影响与组Ⅰ相比,32日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ分别提高了62.89%(P<0.05)和61.01%(P<0.05);45日龄时,组Ⅱ、组Ⅲ分别提高了49.30%(P<0.01)和46.86%(P<0.01)。(9)半胱胺可显著提高仔猪胸腺和脾脏内生长激素受体(GHR)mRNA的表达量45日龄时,与组Ⅰ相比,组Ⅱ、组Ⅲ仔猪胸腺内GHR mRNA表达量分别提高4.26%(P<0.05)和6.83%(P<0.01);在脾脏,与组Ⅰ相比,组Ⅲ提高了4.67%(P<0.05)。组Ⅰ和组Ⅱ间差异不显著。上述试验结果证明:适量的半胱胺能显著提高仔猪的免疫机能。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 中英文对照表
  • 插图和附表清单
  • 1 文献综述
  • 1.1 仔猪免疫防御网络的建立
  • 1.1.1 仔猪非特异性免疫系统的发育
  • 1.1.2 仔猪的特异性免疫系统的建立
  • 1.2 神经内分泌-免疫网络
  • 1.2.1 神经内分泌对免疫系统的调节
  • 1.2.2 免疫系统对神经内泌系统的调节作用
  • 1.2.2.1 免疫细胞产生的内分泌激素
  • 1.2.2.2 免疫细胞产生的细胞因子对神经内分泌系统的作用
  • 1.3 半胱胺与仔猪免疫
  • 1.3.1 半胱胺和体内相关激素的关系
  • 1.3.1.1 生长抑素
  • 1.3.1.2 生长激素
  • 1.3.2 半胱胺对仔猪免疫机能的作用机理
  • 1.3.2.1 间接作用
  • 1.3.2.2 直接作用
  • 2 引言
  • 3 材料与方法
  • 3.1 试验材料
  • 3.1.1 饲养试验日粮组成
  • 3.1.2 试验动物及饲养管理
  • 3.1.3 主要试验仪器
  • 3.1.4 主要试验试剂
  • 3.2 试验方法
  • 3.2.1 样品采集及处理方法
  • 3.2.2 血清SOD和GSH-Px活性的测定
  • 3.2.3 血清IgG、IgA和IgM的水平的测定
  • 3.2.4 血清IL-2水平的测定
  • 3.2.5 细胞吞噬率的测定
  • 3.2.6 淋巴细胞转化试验
  • 3.2.7 仔猪肠黏膜免疫机能的测定
  • 3.2.8 仔猪血清生长激素(GH)水平的测定
  • 3.2.9 仔猪胸腺及脾脏中生长激素受体(GHR)表达量的检测
  • 3.2.9.1 总RNA的提取和RNA的电泳
  • 3.2.9.2 反转录合成第一链cDNA
  • 3.2.9.3 PCR扩增反应
  • 3.2.9.3.1 引物设计
  • 3.2.9.3.2 PCR反应条件
  • 3.2.9.4 电泳及灰度分析
  • 3.3 数据处理
  • 4 结果与分析
  • 4.1 血清SOD和GSH-Px活性的比较
  • 4.2 血清中免疫球蛋白水平的变化
  • 4.3 血清中IL-2含量的比较
  • 4.4 仔猪细胞免疫功能的比较
  • 4.5 肠上皮间淋巴细胞数量的变化
  • 4.6 肠上皮间杯状细胞数量的变化
  • 4.7 血清GH水平的变化
  • 4.8 胸腺和脾脏中GHR表达量的变化
  • 5 讨论
  • 5.1 半胱胺对仔猪血清SOD和GSH-Px活性的影响
  • 5.2 半胱胺对仔猪血清免疫球蛋白水平的影响
  • 5.3 半胱胺对仔猪血清IL-2水平的影响
  • 5.4 半胱胺对仔猪血液中淋巴细胞转化率和白细胞吞噬率的影响
  • 5.5 半胱胺对仔猪肠上皮间淋巴细胞及杯状细胞数量的影响
  • 5.6 半胱胺对仔猪胸腺及脾脏中生长激素受体表达的影响
  • 6 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 作者简介
  • 在读期间撰写的学术论文
  • 相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  

    半胱胺对仔猪免疫机能的影响及其机理研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢