论文摘要
目的:①制备由α-亚麻酸和亚油酸按不同比例混合而成的标准配伍红花籽油;②建立H2O2诱导的脑细胞（PC12细胞株）损伤（凋亡）模型及研究配伍红花籽油增强脑细胞抵抗自由氧基介导的细胞损伤的机制;③利用H2O2/Fe2+诱导的线粒体损伤体系研究配伍红花籽油抑制脂质过氧化的能力。方法:①制备配伍红花籽油并利用GC（气相色谱法）法测定α-亚麻酸和亚油酸含量;②建立H2O2诱导的PC12细胞凋亡模型,利用MTT法、流式细胞技术及荧光成像技术等方法对不同浓度的配伍红花籽油（0.5%DMSO溶液）药物干预进行分析,确定PC12细胞的活力和量效关系;③用改良的Clark技术提取大鼠脑线粒体,建立H2O2/Fe2+氧化损伤体系,检测配伍红花籽油药物干预前后的线粒体褐脂质、膜的流动性、ATPase活性、膨胀度等指标变化。结果:①利用本实验方法提取的混合十八碳二、三烯酸中α-亚麻酸（ALA）、亚油酸（LA）的含量分别达62.49%和22.91%,满足配伍红花籽油的要求;②H2O2诱导细胞损伤（凋亡）的最低浓度为200μM,配伍红花籽油对脑细胞（PC12细胞）抵抗自由氧基损伤产生作用的最低浓度为0.3mg/ml;③配伍红花籽油浓度在0.3-0.5mg/ml时,可以明显提高线粒体抑制脂质过氧化的能力,从而改善线粒体膜流动性、膨胀度和ATP酶（ATPase）活性。结论:①提取与制备配伍红花籽油的方法具有可重复性和可行性;②H2O2诱导的细胞损伤模型可以用于配伍红花籽油的细胞药物干预试验,而且具有可重复性和稳定性等特点;③配伍红花籽油脑细胞自由氧基介导的细胞损伤抵抗能力可能是通过间接增强脑细胞内在的防护能力而实现的,而不是药物与自由氧基的直接接触所致;配伍红花籽油可能通过亚细胞器—线粒体途径起增强细胞抗氧化能力的作用。
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