论文摘要
目的与背景胆囊癌是常见的消化道恶性肿瘤之一，预后差。近年来，中国胆囊癌的发病率呈明显上升趋势。胆囊癌的发生发展过程受到多种因素的影响，其中细胞凋亡和增殖失衡、肿瘤诱导的血管生成反应与其生物学行为关系最为密切，survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins，IAP）家族的新成员，选择性地表达于恶性肿瘤，正常组织中常不表达，survivin作为连接凋亡和细胞周期的因子，选择性地表达于G2／M期，定位于有丝分裂纺锤体的微管上，调节细胞的有丝分裂；通过直接抑制凋亡终末效应蛋白酶caspase-3和caspase-7的活性而抑制细胞凋亡。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是一种作用很强的促血管生成因子，可刺激内皮细胞上survivin的表达。研究发现，VEGF通过旁分泌或自分泌的方式与其受体结合，刺激细胞增殖，促进新生血管的形成和肿瘤生长。微血管的形成与肿瘤的生长、侵袭和转移密切相关。血管内皮细胞标记物中以CD34的特异性最高，应用CD34标记胆囊癌血管内皮细胞测定微血管密度（microvessel density，MVD）并联合检测survivin和VEGF表达的研究，国内外未见报道。本文旨在探讨survivin.VEGF和MVD三项指标与胆囊癌各临床病理因素之间的关系及三者相互的联系，从而为评估胆囊癌的发生发展、预后及治疗提供理论依据。探讨凋亡抑制基因survivin在胆囊癌组织中的表达，及其与血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤内微血管密度（IMVD）的相关性。方法（1）选取1997年2月～2005年4月山东大学齐鲁医院及日照市人民医院病理科常规病理学检查证实的42例胆囊癌切除标本为实验组，全部病例均经手术和病理证实。胆囊息肉40例为对照组。所有标本经10％甲醛固定，常规脱水后石蜡包埋。（2）免疫组织化学SP（streptavidin-peroxidase）法检测survivin.VEGF和CD34在胆囊癌组织中的表达情况，用CD34单抗标记的血管计数MVD。（3）统计工具采用SPSS10.0软件包分析，P＜0.05为有统计学意义。结果1．survivin在40例胆囊息肉组织中无1例表达阳性（0％），胆囊癌组织中的阳性表达率为73.8％，两两组间相比差异均具有显著性（P＜0.01），VEGF在胆囊癌组织中的阳性表达率为69.1％，明显高于胆囊息肉37.5％（P＜0.01），CD34表达于血管内皮细胞胞膜，胆囊癌组织中MVD为26.71±4.53，明显高于胆囊息肉组织的MVD22.86±3.94（P＜0.05）。2．胆囊癌组织中，在肿瘤不同临床分期中，Ⅲ+Ⅳ期胆囊癌组织中survivin的阳性表达率为90.0％，明显高于Ⅰ+Ⅱ期的59.1％（P＜0.05）。survivin在高分化组中的阳性表达率为50.0％，与中、低分化组的83.3％相比，两组间差有统计学意义（P＜0.05）。survivin在有淋巴结转移组中的阳性表达率为84.9％，与无淋巴结转移组的33.3％相比，两组间差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。survivin在腺癌中的阳性表达率为75.0％，而在其他组织类型中为66.7％，两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。3．在胆囊癌组织中，在肿瘤不同临床分期中，Ⅲ+Ⅳ期胆囊癌组织中VEGF的阳性表达率为85.0％，明显高于Ⅰ+Ⅱ期的54.6％（P＜0.05）。VEGF在高分化组中的阳性表达率为58.3％，与中、低分化组的73.3％相比，两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。VEGF在有淋巴结转移组中的阳性表达率为78.8％，无淋巴结转移组的33.3％，两组间差异具有显著统计学意义（P＜0.05）。VEGF在腺癌中的阳性表达率为69.4％，而在其他组织类型中为66.7％，两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。4．在胆囊癌组织标本中，VEGF与survivin的阳性表达呈正相关，survivin，VEGF阳性表达癌组织的IMVD分别为26.12±4.48、26.60±4.93高于对照组23.35±4.20、24.32±3.65（P＜0.05），survivin和VEGF共阳性表达的IMVD为27.86±4.12，显著高于共阴性表达22.75±3.96（P＜0.01）。结论1．survivin在胆囊癌组织中的阳性表达率明显增加，且与淋巴结转移和病理分级有关，提示survivin的过表达可能在胆囊癌的发生及疾病进展过程中起重要作用。2．VEGF在胆囊癌组织中表达，并与肿瘤的临床分期密切相关，提示VEGF的过表达与胆囊癌的发生发展关系密切。3．胆囊癌的血管生成与肿瘤转移及疾病进展密切相关，提示MVD可作为评价胆囊癌生物学行为和预后的一项指标用于临床。4．VEGF和survivin在胆囊癌组织中的表达成正相关提示VEGF可能是上调survivin的重要因素之一。5．survivin在胆囊癌中选择性的高表达，且与肿瘤血管形成密切相关，提示survivin作为抑制细胞凋亡、促进血管形成的重要因子，可能成为胆囊癌基因治疗的新靶点。