郁征宇:菠菜草酸积累规律及相关基因功能分析论文

郁征宇:菠菜草酸积累规律及相关基因功能分析论文

本文主要研究内容

作者郁征宇(2019)在《菠菜草酸积累规律及相关基因功能分析》一文中研究指出:草酸是一种简单的二元羧酸,在植物体内广泛存在,约占植物干重的3%10%,有着调节植物pH值、缓解重金属毒害、诱导抗病性以及调节Ca2+浓度等作用,然而草酸对人类健康而言是一个十分严重的问题,会引起肾结石、高草酸血症等疾病,而菠菜是一种高草酸含量的蔬菜。本文以菠菜为实验材料,通过测定不同供氮形态、环境胁迫处理和植物激素喷施后草酸含量的变化对菠菜草酸的积累规律进行了研究;同时在菠菜基因组数据库中筛选得到了草酸合成和降解途径中关键酶的基因13个,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究了在这些基因在不同胁迫或激素处理下的表达模式;通过构建植物表达载体,将菠菜草酸代谢相关基因在拟南芥中过量表达从而验证这些基因在草酸积累中的功能;对转基因拟南芥进行了外源草酸处理、铝胁迫和盐胁迫处理,研究了这些基因在非生物逆境胁迫中的作用。本文对菠菜草酸积累规律的研究为低草酸菠菜育种及种植过程的管控提供了一定的指导;对相关基因的表达分析及转基因拟南芥的研究为探寻菠菜草酸积累的分子机理和关键基因的生物学功能奠定了理论基础,主要研究结果如下:1、铵态氮的供给降低了两种菠菜材料的草酸含量,在24 h完全的铵态氮供给下明显低于完全硝态氮供给,为对照的81.5%和65.7%,完全的硝态氮供给仅在短时间内提高了菠菜草酸的含量;高温胁迫、氧化胁迫、盐胁迫和干旱胁迫均增加了菠菜中的草酸含量,其中高温胁迫影响最大,在12 h时达到了对照的1.48倍;植物激素脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、乙烯利(ETH)、吲哚乙酸(IAA)、水杨酸(SA)和6-苄基胺基嘌呤(6-BA)可在短时间内增加菠菜体内草酸的累积,抗坏血酸(AA)和茉莉酸甲酯(JA)对菠菜草酸含量的增加有持续的影响。2、qRT-PCR进行的表达分析结果表明,硝态氮能短期诱导SoGLOs和SoOXACs的表达,并抑制SoOXS表达,而铵态氮则与之相反;高温胁迫下SoGLO2,SoGLO4,SoGLO5的表达明显上调,而大部分草酸降解酶相关基因的表达都受到抑制;植物激素6-BA、GA和IAA的喷施使SoGLO1,SoGLO2,SoGLO3上调表达,SoOXACs则是受到了ABA和GA的短暂诱导,AA和IAA可以促使SoOXS的表达持续上调。3、成功构建了12个植物过表达载体,使用花序侵染法遗传转化拟南芥,通过除草剂筛选、PCR和RT-PCR鉴定得到了稳定表达菠菜草酸代谢相关共计11个基因的T3代拟南芥株系。SoOXAC1和SoOXAC2的过表达提高了拟南芥的草酸含量,而SoOXDC3的过表达将拟南芥的草酸含量降至野生型的69.9%,过表达SoOXO1也明显降低了拟南芥的草酸含量。过表达SoOXDC2、SoOXO1和SoOXS的拟南芥叶片对外源草酸的抗性也有明显增强。

Abstract

cao suan shi yi chong jian chan de er yuan suo suan ,zai zhi wu ti nei an fan cun zai ,yao zhan zhi wu gan chong de 3%10%,you zhao diao jie zhi wu pHzhi 、huan jie chong jin shu du hai 、you dao kang bing xing yi ji diao jie Ca2+nong du deng zuo yong ,ran er cao suan dui ren lei jian kang er yan shi yi ge shi fen yan chong de wen ti ,hui yin qi shen jie dan 、gao cao suan xie zheng deng ji bing ,er bo cai shi yi chong gao cao suan han liang de shu cai 。ben wen yi bo cai wei shi yan cai liao ,tong guo ce ding bu tong gong dan xing tai 、huan jing xie pai chu li he zhi wu ji su pen shi hou cao suan han liang de bian hua dui bo cai cao suan de ji lei gui lv jin hang le yan jiu ;tong shi zai bo cai ji yin zu shu ju ku zhong shai shua de dao le cao suan ge cheng he jiang jie tu jing zhong guan jian mei de ji yin 13ge ,li yong shi shi ying guang ding liang PCR(qRT-PCR)yan jiu le zai zhe xie ji yin zai bu tong xie pai huo ji su chu li xia de biao da mo shi ;tong guo gou jian zhi wu biao da zai ti ,jiang bo cai cao suan dai xie xiang guan ji yin zai ni na gai zhong guo liang biao da cong er yan zheng zhe xie ji yin zai cao suan ji lei zhong de gong neng ;dui zhuai ji yin ni na gai jin hang le wai yuan cao suan chu li 、lv xie pai he yan xie pai chu li ,yan jiu le zhe xie ji yin zai fei sheng wu ni jing xie pai zhong de zuo yong 。ben wen dui bo cai cao suan ji lei gui lv de yan jiu wei di cao suan bo cai yo chong ji chong zhi guo cheng de guan kong di gong le yi ding de zhi dao ;dui xiang guan ji yin de biao da fen xi ji zhuai ji yin ni na gai de yan jiu wei tan xun bo cai cao suan ji lei de fen zi ji li he guan jian ji yin de sheng wu xue gong neng dian ding le li lun ji chu ,zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1、an tai dan de gong gei jiang di le liang chong bo cai cai liao de cao suan han liang ,zai 24 hwan quan de an tai dan gong gei xia ming xian di yu wan quan xiao tai dan gong gei ,wei dui zhao de 81.5%he 65.7%,wan quan de xiao tai dan gong gei jin zai duan shi jian nei di gao le bo cai cao suan de han liang ;gao wen xie pai 、yang hua xie pai 、yan xie pai he gan han xie pai jun zeng jia le bo cai zhong de cao suan han liang ,ji zhong gao wen xie pai ying xiang zui da ,zai 12 hshi da dao le dui zhao de 1.48bei ;zhi wu ji su tuo la suan (ABA)、chi mei su (GA)、yi xi li (ETH)、yin duo yi suan (IAA)、shui yang suan (SA)he 6-bian ji an ji piao ling (6-BA)ke zai duan shi jian nei zeng jia bo cai ti nei cao suan de lei ji ,kang huai xie suan (AA)he mo li suan jia zhi (JA)dui bo cai cao suan han liang de zeng jia you chi xu de ying xiang 。2、qRT-PCRjin hang de biao da fen xi jie guo biao ming ,xiao tai dan neng duan ji you dao SoGLOshe SoOXACsde biao da ,bing yi zhi SoOXSbiao da ,er an tai dan ze yu zhi xiang fan ;gao wen xie pai xia SoGLO2,SoGLO4,SoGLO5de biao da ming xian shang diao ,er da bu fen cao suan jiang jie mei xiang guan ji yin de biao da dou shou dao yi zhi ;zhi wu ji su 6-BA、GAhe IAAde pen shi shi SoGLO1,SoGLO2,SoGLO3shang diao biao da ,SoOXACsze shi shou dao le ABAhe GAde duan zan you dao ,AAhe IAAke yi cu shi SoOXSde biao da chi xu shang diao 。3、cheng gong gou jian le 12ge zhi wu guo biao da zai ti ,shi yong hua xu qin ran fa wei chuan zhuai hua ni na gai ,tong guo chu cao ji shai shua 、PCRhe RT-PCRjian ding de dao le wen ding biao da bo cai cao suan dai xie xiang guan gong ji 11ge ji yin de T3dai ni na gai zhu ji 。SoOXAC1he SoOXAC2de guo biao da di gao le ni na gai de cao suan han liang ,er SoOXDC3de guo biao da jiang ni na gai de cao suan han liang jiang zhi ye sheng xing de 69.9%,guo biao da SoOXO1ye ming xian jiang di le ni na gai de cao suan han liang 。guo biao da SoOXDC2、SoOXO1he SoOXSde ni na gai xie pian dui wai yuan cao suan de kang xing ye you ming xian zeng jiang 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自上海师范大学的郁征宇,发表于刊物上海师范大学2019-06-17论文,是一篇关于菠菜论文,草酸论文,积累规律论文,表达调控论文,过表达论文,上海师范大学2019-06-17论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自上海师范大学2019-06-17论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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