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菝葜组织培养及植株再生体系的建立

2020-12-02阅读(873)

菝葜组织培养及植株再生体系的建立

论文摘要

本研究对菝葜组织培养快速繁殖技术进行了探索。以菝葜的带芽茎段、茎段及叶片为材料,系统地研究了菝葜组织培养直接和间接器官发生途径的各个培养阶段中基本培养基、生长调节剂和活性炭等因素的影响,筛选出了各阶段的适宜培养基,成功地获得了菝葜再生植株,建立了系统的菝葜植株再生体系。试验结果如下:①菝葜外植体最佳取材时间是4月初,启动率高,污染率和褐化率相对其他月份较低。带芽茎段、茎段和叶片的启动率分别是:93.33%、75.00%、53.33%;污染率分别是:13.33%、16.67%、21.67%;褐化率分别是:35.00%、43.33%、51.67%。②菝葜带芽茎段和茎段的最佳灭菌时间是0.1%HgCl2处理5min,叶片最佳灭菌时间是0.1%HgCl2处理3min。③防褐化处理:叶片切割成1.0×1.0cm2大小有利于减轻褐化,褐化率为35.00%;外植体进行暗培养10天后,带芽茎段、茎段和叶片三种外植体的褐化率都降到最低,分别为20.00%、26.67%、30.00%。④带芽茎段腋芽的诱导:以当年生枝条上的带芽茎段为外植体,最适合带芽茎段腋芽诱导的培养基配方是:MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.01mg/L+IBA 0.05mg/L,诱导率为75.00%,褐化率为16.67%。⑤愈伤组织的诱导:当年生枝条上的茎段和叶片诱导愈伤组织失败,而以无菌苗的茎段和叶片作外植体成功地诱导出了愈伤组织。适合无菌苗茎段和叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方分别是:MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.05mg/L+2,4-D2.00mg/L和MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L+2,4-D2.00mg/L,出愈率分别为36.67%和43.33%。⑥腋芽的增殖培养:适合腋芽增殖的最佳培养基配方是:MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L,增殖倍数4.30,有效苗数2.40。⑦愈伤组织的增殖与分化:适合愈伤组织增殖培养的最佳培养基配方是:MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L+2,4-D3.00mg/L,增殖率是60.00%;适合愈伤组织分化的最佳培养基配方是:MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L,分化率是48.89%。⑧壮苗与生根培养:适宜菝葜生根的最佳培养基配方是:1/4MS+NAA3.00mg/L+AC1.00g/L,生根率为80.00%,平均生根数为4.00。添加活性碳的培养基对生根诱导的效果更好。⑨炼苗与移栽:适合菝葜炼苗的最佳基质为珍珠岩、蛭石、河沙=3:2:1的方案,移栽苗成活率达到最高,为86.67%。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 2 文献综述
  • 2.1 菝葜的研究概况
  • 2.1.1 菝葜的生物学特性
  • 2.1.2 菝葜的开发利用价值
  • 2.1.3 菝葜的常规繁殖
  • 2.2 植物组织培养研究进展
  • 2.2.1 植物组织培养的起源及发展
  • 2.2.2 植物组织培养的应用
  • 2.3 百合科植物组织培养研究进展
  • 2.3.1 菝葜属植物组织培养研究进展
  • 2.3.2 百合科其他植物组织培养研究进展
  • 3 目的与意义
  • 4 试验材料与方法
  • 4.1 试验材料
  • 4.2 技术路线
  • 4.3 试验方法
  • 4.3.1 初代培养
  • 4.3.2 继代增殖与分化培养
  • 4.3.3 壮苗与生根培养
  • 4.3.4 炼苗与移栽
  • 4.3.5 培养条件
  • 5 试验数据统计与分析方法
  • 5.1 初代培养
  • 5.2 继代增殖与分化培养
  • 5.3 状苗与生根培养
  • 5.4 炼苗移栽
  • 5.5 数据统计分析方法
  • 6 结果与分析
  • 6.1 初代培养
  • 6.1.1 外植体取材季节试验结果
  • 6.1.2 外植体表面灭菌方式试验结果
  • 6.1.3 防褐化处理试验结果
  • 6.1.4 带芽茎段腋芽诱导试验结果
  • 6.1.5 愈伤组织诱导试验结果
  • 6.2 继代增殖与分化培养
  • 6.2.1 腋芽增殖试验结果
  • 6.2.2 愈伤组织增殖试验结果
  • 6.2.3 愈伤组织分化试验结果
  • 6.3 壮苗与生根培养
  • 6.4 炼苗与移栽
  • 7 小结
  • 7.1 初代培养
  • 7.1.1 外植体取材季节的选择
  • 7.1.2 外植体表面灭菌时间的选择
  • 7.1.3 防褐化处理
  • 7.1.4 带芽茎段腋芽的诱导
  • 7.1.5 愈伤组织的诱导
  • 7.2 继代培养与分化培养
  • 7.2.1 腋芽增殖
  • 7.2.2 愈伤组织增殖
  • 7.2.3 愈伤组织分化
  • 7.3 壮苗与生根培养
  • 7.4 炼苗与移栽
  • 8 结论与讨论
  • 8.1 外植体的选择对菝葜组织培养的影响
  • 8.2 外植体的褐变及相关处理措施
  • 8.3 植物激素对菝葜愈伤组织诱导和分化的影响
  • 8.4 活性碳对生根影响
  • 9 对下一步工作的建议
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 硕士期间发表的文章

    • 相关论文文献

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