论文摘要
目的:光动力学疗法（Photodynamic therapy, PDT）是光动力反应应用于临床的一种特殊类型治疗方法,是一种新的两步法治疗手段。即首先给予一种主要定位于肿瘤的光敏药物,或通过应用前体药物如5-氨基酮戊酸（5-aminolevulinic acid, 5-ALA）及其衍生物产生内源性光敏剂,再利用特定波长的光源激活光敏剂使其由基态变成激发态,通过一系列的光化学反应产生大量的活性氧（主要是单线态氧）,导致肿瘤组织的不可逆损伤。目前,国内外学者将光动力学疗法应用于肿瘤的治疗做了大量的工作。但是,用光动力学疗法来治疗恶性黑素瘤国外只有少量报道。本研究使用光敏剂二氢卟吩e6（chlorin e6, Ce6）和5-氨基酮戊酸在体外和活体内的作用于恶性黑素瘤A-375细胞株观察二者对恶性黑素瘤光动力学作用和效果。为进一步光动力学治疗应用于临床提供实验依据。 方法:（1）体外实验 将体外培养的人黑素瘤A-375细胞分别加入不同浓度的光敏剂Ce6（0、2、4、7.5、15、30、60μmol/L）或光敏剂前体物5-ALA（0、0.5、1、1.5、2mmol/L）后,加入Ce6的细胞组避光孵育12h,加入5-ALA的细胞组避光孵育6h,予波长652nm半导体激光照射,照射的功率密度为15.6mW/cm2,照射剂量分别为（0、2、5、10、20J/cm2）,继续孵育12h后,MTT法测定细胞存活率。（2）活体内实验 用培养好的恶性黑素瘤细胞株,皮下接种至裸鼠右侧后肢腹股沟,接种的细胞数按照2×106个/只进行接种,接种成功后荷瘤裸鼠随机分为4组（对照组,5-ALA-PDT组,Ce6-PDT组,联合治疗组）,每组6只。实验过程中,对照组不进行PDT,只进行激光照射;5-ALA-PDT组用10%的5-ALA的二甲基亚砜溶液（含60%DMSO）外敷肿瘤部位2h后进行激光照射;Ce6-PDT组按7.5mg/Kg体重,腹腔内给予Ce6的PBS溶液1h后进行激光照射;联合治疗组给予10%的5-ALA的二甲基亚砜溶液外敷肿瘤部位1h后,按7.5mg/Kg体重,腹腔内给予Ce6的PBS溶液在经过1h后进行激光照射。均予波长652nm,光照剂量为100 J/cm2的半导体激光照射。2周后处死裸鼠取肿瘤组织称重,进行比较分析,观察各器官系统的转移情况,并把各裸鼠的瘤体、肝、脾、肺、肾送普通病理检查。 结果:①在黑素瘤细胞株A-375中加入二氢卟吩e6并且在不受光照的条件下和浓度小于15μmol/L时各浓度组间细胞的存活率无明显差异（p>0.05）,在较高的浓度(大于
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