论文摘要
白细胞粘附分子Mac-1（macrophage differentiation antigen associated with complement three receptor function）为位于白细胞表面的整合素家族β2亚族的成员之一,它是白细胞表面参与机体防御功能及免疫反应的极为重要的粘附分子。它由α（CD11b）和β（CD18）两个亚基以非共价键的方式形成异二聚体,编码CD11b和CD18的基因分别位于人的第16号和第21号染色体。Mac-1具有两种主要功能:一是与活化的内皮细胞表面的ICAM-1高亲和力的粘附,进而介导白细胞的游走与渗出;二是介导白细胞对iC3b调理的微生物或免疫复合物的细胞毒功能。 迄今为止,Mac-1粘附功能的研究已经相当深入,但由于方法学的限制,对于Mac-1的分布、贮存、转位和变构的过程,尚未见有活细胞内对其全过程动态实时的定位定量的研究。以往文献上研究Mac-1的分布、贮存、转位的方法,主要采用的是抗体标记Mac-1的流式细胞术测定或免疫组化技术显微镜下直接观察Mac-1的细胞内分布,其缺点是不可能在单细胞和/或活细胞连续地观察,如果要研究在细胞内的走向则还需要增大细胞表面通透性,这就难免干扰了细胞的生理状态。并且集团平均（ensemble averaging）研究所探测的是细胞内大量分子的综合平均效应,得到的是由大量对象组成的一个整体所表现出的平均响应和平均值,因此从这些实验所得出的结果只代表这一测量时间内细胞内大量分子的平均行为,这一平均效应掩盖了许多特殊的信息。GFP（绿色荧光蛋白）及其突变体BFP（蓝色荧光蛋白）、CFP（青色荧光蛋白）、YFP（黄色荧光蛋白）具有发光不需要底物、稳定、无毒性、分子量小、形成融合蛋白后不致影响自身和目的基因产物的空间构象和功能等优点,已成为研究蛋白质分子在活细胞内变化的主要标记物。近年来,结合荧光蛋白技术的荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer,FRET）技术已逐渐运用于活细胞内蛋白质之间相互作用的研究。FRET的发生取决于供体荧光和受体荧光的性
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