青紫薯色素对～（60）Coγ-射线辐射小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用及其机制研究

论文摘要

目的 探讨在60Co γ-射线单次辐射下,青紫薯色素对小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤的保护作用及机制。方法 建立60Co（辐射细胞的强度为3Gy）对体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤的病理模型。透射电镜观察细胞超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳观察DNA ladder;流式细胞仪PI染色测定细胞凋亡率;酶生化法测定胞浆超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量以及细胞抗超氧阴离子能力（A-SAC）和总抗氧化能力（T-AOC）;Rhodamine 123荧光染色测定线粒体膜电位（△ ψ M）;Fluo-3-AM荧光染色测定细胞内游离[Ca2+]i;原位杂交检测细胞p21WAF1 mRNA、p38mRNA的基因表达;免疫细胞化学检测细胞p53、Bcl-2、Bax基因蛋白的表达。用化学发光法和电子自旋共振（ESR）捕集技术检测青紫薯色素对超氧阴离子O2-、羟自由基OH·、过氧化亚硝基ONOO-和脂类自由基的清除作用。结果 在强度为3Gy60Co辐射情况下:0.625～2.500g/L浓度范围内青紫薯色素能抑制60Co辐射所致淋巴细胞早、中、晚期凋亡的形态学改变,维持细胞的正常超微结构;降低淋巴细胞凋亡率;显著提高细胞浆中SOD、GSH-px的活性,降低ROS、MDA含量,提高A-SAC及T-AOC;稳定线粒体的膜电位;降低淋巴细胞内游离[Ca2+]i;抑制60Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞P21WAF1 mRNA和P38 mRNA的表达;还可抑制60Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞p53基因蛋白和Bax蛋白在胞浆的表达,增强Bcl-2蛋白的表达。同时还可有效清除O2-、OH·、ONOO-和脂类自由基,其IC50分别为1.2×10-3g/L、4.48×10-4g/L、1.0×10-3g/L和4.4×10-2g/L。以上统计结果差异均有显著性（P<0.01,P<0.05）。结论 青紫薯色素能抑制60Co辐射诱导的淋巴细胞凋亡,其作用机制与青紫薯色素能清除氧自由基、提高抗氧化酶活性、降低细胞内游离[Ca2+]i、保护细胞膜相结构、减少DNA断裂有关;同

论文目录

• 引言
• 第一章 实验材料
• 1 试剂
• 2 实验用动物
• 3 仪器设备
• 第二章 实验方法
• 1 实验设计和动物处理
• 2 实验项目和指标检测
• 3 统计学处理
• 第三章 实验结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 第六章 参考文献
• 综述及参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 附录
• 致谢
• 学位论文独创性声明
• 学位论文知识产权权属声明