论文摘要
目的观察2型糖尿病大鼠心肌组织中GLUT4、PKB蛋白的表达,GLUT4mRNA的表达,Na+-K+-ATP酶、Ca++-Mg++-ATP酶活性的变化及普罗布考的干预作用,探讨普罗布考对2型糖尿病大鼠心肌病变的保护机制。方法健康的SD雄性大鼠36只,随机分为二组:E组(正常对照组,10只),A+C组(高糖高脂饮食组,26只)。高糖高脂饮食喂养8周后利用STZ造模,2型糖尿病造模成功后重新分组,此时各组大鼠数目分别为:E组(正常对照组,10只,普通饲料)、A组(高糖高脂饮食8周后加小剂量STZ诱导2型糖尿病模型成功后加普罗布考500mg/kg/d干预8周组,11只)、C组(高糖高脂饮食8周后加小剂量STZ诱导2型糖尿病模型成功后8周组,12只)。造模后继续高糖高脂饮食饲养8周后处死,处死前一日行OGTT试验,处死时取血测定胰岛素、血糖及血脂、糖化血红蛋白等,比色法测定血清氧化还原指标,比色法测定大鼠心肌Na+-K+-ATP酶、Ca++-Mg++-ATP酶活性,取大鼠心肌组织病理切片HE染色,免疫组化方法测定大鼠心肌组织GLUT4、PKB蛋白表达,RT-PCR检测GLUT4mRNA表达水平。所得数据用SPSS13.0统计软件分析。结果OGTT:血清胰岛素水平:在0min、30min、60min、120min时间点上,各组大鼠之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),血糖:0min A、C、E组两两比较,各组之间差异均无统计学意义(P>0.05),30 min、60 min、120 minA、C组的血糖明显高于E组,差异有统计学意义(P<0.05),A组的血糖明显低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。血脂:A、C组的TG、TC、LDL-C水平明显高于E组,差异有统计学意义(P<0.05),A组的TC、LDL-C水平明显低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清的氧化还原指标:C组大鼠MDA含量较E组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),A组MDA含量较C组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);C组大鼠SOD、GSH-Px活性较E组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),A组大鼠SOD、GSH-Px活性较C组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。Na+-K+-ATP酶、Ca++-Mg++-ATP酶活性:C组大鼠两酶活性较E组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),A组两酶活性较C组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化:C组大鼠心肌组织GLUT4蛋白的表达较E组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),A组大鼠GLUT4蛋白表达较C组增多,差异有统计学意义(P<0.05),C组大鼠心肌组织PKB的蛋白表达较E组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),A组大鼠PKB蛋白表达同C组大鼠比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测GLUT4mRNA表达水平:C组GLUT4mRNA表达较E组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),A组GLUT4mRNA表达较C组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.2型糖尿病大鼠心肌组织GLUT4、PKB蛋白表达减少,GLUT4mRNA表达减少,Na+-K+-ATP酶、Ca++-Mg++-ATP酶活性降低,和机体脂质过氧化增强,抗氧化能力下降有关系。2.普罗布考可增加糖尿病大鼠心肌组织GLUT4蛋白的表达,增加GLUT4mRNA表达,增加糖尿病大鼠心肌组织Na+-K+-ATP酶、Ca++-Mg++-ATP酶活性,其机制可能与普罗布考降低血糖,降低TC、LDL,降低氧化应激水平有关系。3.普罗布考可以通过增加糖尿病大鼠心肌Na+-K+-ATP酶、Ca++-Mg++-ATP酶活性,增加GLUT4mRNA、GLUT4蛋白的表达影响糖尿病心肌病的发生。
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