王以欣:基于DPO引物检测猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用论文

王以欣:基于DPO引物检测猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用论文

本文主要研究内容

作者王以欣,王紫薇,汉武娇,王丽,姜艳平,崔文,周晗,乔薪瑗,唐丽杰,李一经,徐义刚(2019)在《基于DPO引物检测猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用》一文中研究指出:为建立快速、准确检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法,本研究以PEDV的N基因为靶基因,基于双启动寡核苷酸引物(DPO),经过条件优化,建立了检测PEDV的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,DPO引物的有效退火温度范围较宽(45℃~65℃);在测试的10种病毒中仅PEDV为阳性扩增结果,其余病毒为阴性结果,特异性较强;对PEDV质粒标准品的检测限可达1.64×10~1拷贝/μL,敏感性较高;组内、组间重复性结果的变异系数均小于1%,重复性较好。利用该方法对采集的272份临床仔猪腹泻样品(粪便、小肠组织)进行检测,结果显示,共检出PEDV阳性样品39份,阳性率为14.34%,与常规RT-PCR方法检测结果的阳性符合率为92.31%;本研究建立方法检测的阳性样品经PEDV N基因测序鉴定,确实均为PEDV阳性样品。本研究建立的基于DPO引物检测PEDV的荧光定量RT-PCR方法为PEDV的准确检测和流行病学调查提供技术支持。

Abstract

wei jian li kuai su 、zhun que jian ce zhu liu hang xing fu xie bing du (PEDV)de fang fa ,ben yan jiu yi PEDVde Nji yin wei ba ji yin ,ji yu shuang qi dong gua he gan suan yin wu (DPO),jing guo tiao jian you hua ,jian li le jian ce PEDVde ying guang ding liang RT-PCRfang fa 。jie guo xian shi ,DPOyin wu de you xiao tui huo wen du fan wei jiao kuan (45℃~65℃);zai ce shi de 10chong bing du zhong jin PEDVwei yang xing kuo zeng jie guo ,ji yu bing du wei yin xing jie guo ,te yi xing jiao jiang ;dui PEDVzhi li biao zhun pin de jian ce xian ke da 1.64×10~1kao bei /μL,min gan xing jiao gao ;zu nei 、zu jian chong fu xing jie guo de bian yi ji shu jun xiao yu 1%,chong fu xing jiao hao 。li yong gai fang fa dui cai ji de 272fen lin chuang zai zhu fu xie yang pin (fen bian 、xiao chang zu zhi )jin hang jian ce ,jie guo xian shi ,gong jian chu PEDVyang xing yang pin 39fen ,yang xing lv wei 14.34%,yu chang gui RT-PCRfang fa jian ce jie guo de yang xing fu ge lv wei 92.31%;ben yan jiu jian li fang fa jian ce de yang xing yang pin jing PEDV Nji yin ce xu jian ding ,que shi jun wei PEDVyang xing yang pin 。ben yan jiu jian li de ji yu DPOyin wu jian ce PEDVde ying guang ding liang RT-PCRfang fa wei PEDVde zhun que jian ce he liu hang bing xue diao cha di gong ji shu zhi chi 。

论文参考文献

  • [1].猪流行性腹泻病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 邓祖丽颖,陈陆.  中国畜牧兽医.2014(01)
  • [2].猪流行性腹泻病毒套式RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 贾赟,胡传伟,刘文斌,陈阳,简中友,袁文泽,陈溥言.  检验检疫科学.2005(03)
  • [3].猪流行性腹泻病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用[J]. 罗亚坤,梁琳,王静,刘存,刘琪,刘畅,蔺文成,崔尚金.  中国畜牧兽医.2017(02)
  • [4].Next-generation sequencing and single-cell RT-PCR reveal a distinct variable gene usage of porcine antibody repertoire following PEDV vaccination[J]. Ren Li,Fang Fu,Li Feng,PingHuang Liu.  Science China Life Sciences.
  • [5].猪流行性腹泻病毒入侵细胞的研究进展[J]. 吕晓倩,田知鑫,周铁忠,王辉暖.  现代畜牧兽医.2019(10)
  • [6].基于PEDV N蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J]. 王睿,李雪晴,霍琳琳,李曦.  黑龙江畜牧兽医.2019(11)
  • [7].广西部分地区猪群PEDV N基因克隆及序列分析[J]. 许瑞胜,何奇松,李春英,冯淑萍,易春华,韦达有,胡丽萍,黄胜斌,胡巧云,熊毅,马琳.  西南农业学报.2018(02)
  • [8].贵州省PEDV与PoRV分子流行病学调查[J]. 丁尊俄,冯旭芳,张双翔,何贤海,胡兴义,张海,王开功,文明,程振涛,李晨,蒲翠敏,罗引幸,刘丽娟,周碧君.  基因组学与应用生物学.2018(06)
  • [9].Screening of Host Proteins Interacting with Porcine Epidemic Diarrhea Virus (PEDV) N Protein by Yeast Two-hybrid System[J]. Wang Zhongze,Qin Cuili,Kong Ning,Zuo Yewen,Wang Meng,Zheng Hao,Tong Wu,Li Liwei,Yu Hai,Li Zhili,Shan Tongling,Tong Guangzhi,Li Xue.  Animal Husbandry and Feed Science.2018(04)
  • [10].Development and Application of an RT-PCR Method for Differentiation of PEDV Variant Strains and Classical Strains[J]. Qin Yibin,Lu Bingxia,Zhao Wu,He Ying,Li Yingying,Li Bin,Liang Jiaxing,Liang Baozhong,Su Qianlian,Jiang Dongfu,Zhou Yingning.  Animal Husbandry and Feed Science.2015(01)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国预防兽医学报的王以欣,王紫薇,汉武娇,王丽,姜艳平,崔文,周晗,乔薪瑗,唐丽杰,李一经,徐义刚,发表于刊物中国预防兽医学报2019年07期论文,是一篇关于猪流行性腹泻病毒论文,引物论文,荧光定量论文,中国预防兽医学报2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国预防兽医学报2019年07期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

    标签:;  ;  ;  ;  

    王以欣:基于DPO引物检测猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用论文
    下载Doc文档

    猜你喜欢