论文摘要
研究背景及目的:许多研究表明,银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract, GBE)通过清除自由基,抗氧化应激,影响大脑的血液流动,拮抗血小板激活因子,影响海马神经元上突触的转化、可塑性及兴奋性等对脑缺血发挥保护作用。炎性机制参与脑缺血的病理生理过程,如炎性因子上调,炎性细胞激活等。小胶质细胞作为中枢神经系统炎症和免疫反应的效应细胞之一,对脑组织内微小的病理变化可发生强烈反应,在脑缺血和脑损伤时尤为显著。但是,GBE是否参与抗炎症、抗免疫反应过程,尚需进一步探讨。本研究应用光化学诱导的小鼠脑缺血模型,采用运动捕捉分析系统(Movement Capture Analysis, MoCA)瞬时精确地记录小鼠躯干和四肢在脑缺血前后及各种干预下的不同运动轨迹,客观评价脑缺血损害后运动障碍及GBE预处理对脑缺血损害后运动障碍恢复情况;结合TTC、HE和Nissl染色观察GBE预处理对脑缺血的保护作用;同时探讨GBE预处理对脑缺血过程中CD11b阳性细胞反应性的影响。·2·实验材料与方法:将 150 只成年 Balb/c 小鼠随机分成六组:(1)空白对照组;(2)单纯照射 30min 组;(3)注射玫瑰红组;(4)缺血组;(5)GBE 预处理组;(6)地塞米松处理组,作为阳性对照。GBE(100mg/kg/day)腹腔注射预处理 7 天,在第 7 天,经尾静脉注射玫瑰红 B,用绿色冷光源紧贴颅骨照射,即建立局灶性小鼠脑缺血模型;运动捕捉系统分析小鼠行为学变化;在相应时间点处死动物,红四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死体积;苏木素-伊红(hematoxylin and eosin, HE )染色,尼氏(Nissl)染色观察组织学变化,CD11b 免疫组织化学染色检测小胶质细胞反应。结果: (一)行为学:左右侧肢体抬高高度的差值为小鼠运动能力指标,各组以均数±标准差来表示。与对照组相比,缺血组小鼠运动能力明显降低(P<0.001);与缺血组相比,GBE 预处理组和地塞米松处理组小鼠运动能力提高,而后两组之间小鼠的运动能力无显著性差异。(二)TTC 染色观察脑梗死体积,每组动物梗死体积用均数±标准差表示。GBE 预处理和地塞米松处理可以明显减小脑梗死体积(P<0.01);而后两者对脑梗死体积的减少无显著性差异。(三)病理形态学观察1. HE 染色:脑缺血中央区细胞缺失,出现一些深染的细胞。在缺血周边区,出现被伊红深染的细胞。2. Nissl 染色:与对照组相比,缺血组缺血周边皮层神经元数量明显减少(P<0.001);与缺血组相比,GBE 预处理组和地塞米松组小鼠缺血周边皮层神经元数量显著增多,而后两组之间无显著性差异。3. CD11b 免疫组织化学染色:与对照组相比,缺血组小鼠皮层CD11b 蛋白免疫反应( immunoreactivity, IR )阳性细胞数增多(P<0.001),平均灰度降低(P<0.001);GBE 预处理组与地塞米松处理组各时间点皮层缺血周边区 CD11b-IR 阳性细胞与缺血组相比,
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