牡蛎糖胺聚糖抗病毒作用的实验研究

论文摘要

目的:观察牡蛎糖胺聚糖（O-GAG）对单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-Ⅰ）的抑制作用以及对免疫功能的影响,初步探讨牡蛎糖胺聚糖（0-GAG）的抗病毒作用机理。方法:1、以非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）为宿主细胞,采用体外细胞培养技术,通过细胞病变法（CPE）和MTT比色法,观察不同浓度O-GAG体外给药对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSM44株)的直接杀伤作用、对病毒复制的抑制作用以及对HSV-Ⅰ感染细胞的综合作用等。采用体外细胞培养技术,观察0-GAG体外给药在50-1600μg/ml浓度范围内对Vero细胞的毒性作用。2、利用小鼠建立HSV-Ⅰ病毒感染的动物模型,通过观察不同浓度0-GAG经注射给药后对病毒感染小鼠的体重变化、平均存活时间和生命延长率、死亡率的影响。采用病理组织学方法,观察0-GAG经注射给药后对病毒感染小鼠的心、脑、肝、脾、肾、肺等重要脏器形态学的影响。3、采用HSV-Ⅰ病毒感染的小鼠模型,观察不同浓度0-GAG注射给药后,病毒感染小鼠的胸腺指数和脾指数的变化;采用巨噬细胞吞噬中性红试验,观察不同浓度0-GAG对病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞（PMφ）吞噬能力的影响;采用MTT法,观察不同浓度0-GAG对病毒感染小鼠对脾淋巴细胞转化增殖的影响,以分析0-GAG对病毒感染动物免疫功能的作用。结果:1、在体外实验中显示,0-GAG在50-1600μg/ml浓度范围内对Vero细胞无明显毒性。与病毒对照组相比,0-GAG各浓度（100gg/ml、50gg/ml、25μg/ml）能保护HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞增值活性增强,减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制（P＜0.01）,但是0-GAG体外给药对HSV-Ⅰ没有直接杀伤作用（P＞0.05）。2、HSV-Ⅰ感染小鼠在注射不同剂量的0-GAG（10mg、20mg、40mg/kg）后,其体重增加,平均存活时间延长,死亡率降低,与病毒组差异有显著性意义（P＜0.05）;0-GAG（10mg、20mg、40mg/kg）对HSV-Ⅰ感染小鼠的内脏器官有一定的保护作用,能减轻组织的病理改变。3、与病毒对照组相比,0-GAG（10mg、20mg、40mg/kg）均能显著提高病毒感染小鼠的胸腺指数和脾指数（P＜0.05,P＜0.01）;与病毒组比较,0-GAG能够增强病毒感染小鼠巨噬细胞的吞噬能力;促进脾淋巴细胞转化增殖（P＜0.05,P＜0.01）。结论:0-GAG在体外具有一定的抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的作用,对HSV-Ⅰ感染的小鼠有治疗作用,其抗病毒作用机制与其提高机体的免疫功能有关。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一章:牡蛎糖胺聚糖的体外抗病毒实验
• 1.1 材料与试剂
• 1.2 实验方法
• 1.3 结果
• 第二章:牡蛎糖胺聚糖对病毒感染小鼠治疗作用的研究
• 2.1 牡蛎糖胺聚糖（O-GAG）对病毒感染小鼠体重、生命延长率和死亡 率的影响
• 2.2 O-GAG对病毒感染小鼠的内脏器官病理形态学的影响
• 附图
• 第三章:牡蛎糖胺聚糖对病毒感染小鼠免疫功能的影响
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.3 实验结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 综述的参考文献
• 攻读硕士学位期间的研究成果
• 致谢