B淋巴细胞增殖性疾病细胞遗传学异常及其预后意义研究

论文摘要

目的：探讨各B-LPD的遗传学异常,比较不同B-LPD间遗传学异常差异,为进一步探讨其发病机制及为各B-LPD临床诊断和鉴别诊断提供依据。结合临床资料,探讨遗传学异常与CLL MCL临床特点的关系及其对预后的影响。方法：应用荧光原位杂交（FISH）技术对在我院确诊的B-LPD患者骨髓或外周学标本进行遗传学异常检测,主要检测位点（探针）为：13q14(D13S25、Rbl、llq22-23 （ATM）、14q32（IGH）、17p13（p53）、12号染色体着丝粒（CSP12）、6q23（MYB）、8q24 （C-MYC）、lq21 t（11;14）（q13;q32）（CCND1/IGH）。应用统计学方法评价各B-LPD间遗传学异常差异。结合临床资料,探讨各位点异常对CLL、MCL预后的影响。结果：（一）各B-LPD遗传学异常率及其差异：CLL（n=161）:del（D13S25）:48.8%,del（Rbl）:27.3%,del（11q）:13.1%,del（17p）:12.5%, +12:23.4%,IGH易位：17.4%,总阳性率79.5%。MCL（n=26）:del（D13S25）:52.0%, del（Rbl）:38.5%,del（11q）:24.0%,del（17p）:44.0%,+12:13.0%,IGH易位：92.0%, C-MYC易位或扩增：52.0%,总阳性率：76.9%（除外IGH易位）。SMZL（n=11）:del（D13S25）: 18.2%,del（Rbl）:16.7%,del（11q）:0%, del（17p）:0%,+12:27.3%,IGH易位：45.5%,总阳性率：81.8%。LPL/WM（n=34）:del（D13S25）:5.9%, del（Rbl）:2.9%,del（11q）:0%, del（17p）:11.8%,+12:6.5%,IGH易位：2.9%, del（6q）:21.4%,,总阳性率：38.7%。HCL（n=13）:del（D13S25）:0%, del（Rbl）:0%, del（llq）:0%, del（17p）:8.3%,+12:O%,IGH异常：23.1%,总阳性率：27.3%。B-PLL（n=4）:del（D13S25）:50.0%, del（Rbl）:50.0%, del（11q）:0%,del（17p）:75.0%,+12:0%,IGH易位：0%,总阳性率：75.0%. MZL（n=5）: del（D13S25）:40%,del（Rbl）:33.3%, del（11q）:0%,del（17p）:0%,+12:20%,IGH易位：20%,总阳性率：80%。CD5+不能分类（n=18）:del（D13S25）:22.2%, del（Rbl）:11.1%, del（11q）:5.6%, del（17p）:16.7%,+12:25.0%,IGH易位：33.3%,总阳性率：64.7%。高度疑似SMZL（n=25）:del（D13S25）:16.0%,del（Rbl）:8.0%,del（11q）:0%, del（17p）: 16.0%,+12:4.2%, IGH易位：16.0%,总阳性率：41.7%。CD5-不能分类（n=12）：del（D13S25）:16.7%,del（Rb1）:0%,del（11q）:8.3%, del（17p）:7.7%,+12:0%,IGH易位：30.8%,总阳性率（41.7%）。CLL与MCL在del（17p）上存在显著差异（p<0.001）；CLL与SMZL在del（D13S25）上存在显著差异（p=0.049）;CLL与LPL/WM在del（D13S25） （p<0.001）, del（Rb1） （p=0.002）、del（11q） （p=0.028）、IGH易位率（p=0.031）和总的阳性率（p<0.001）方面均存在显著差异。SMZL与LPL/WM间在IGH易位率上存在显著差异（p=0.002）. CD5+不能分类的del（D13S25）显著低于CLL （p=0.032）; CD5+不能分类与MCL比较发现：两组在D13S25缺失率（p=0.049）、Rbl缺失率（p=0.045）、p53缺失率（p=0.031）均存在显著差异。将高度疑似SMZL与CD5-的不能分类B-LPD统归为一组（均为CD5-）,与确诊SMZL比较,两者在12三体（2.8%vs.27.3%；p=0.035）和总阳性率（41.7% vs.81.8%；p=0.036）上存在显著差异。（二）遗传学异常与B-LPD临床特征及预后的关系1.遗传学异常与CLL临床特征及预后关系del（D13S25）和单独del（D13S25）多见于CLL早期,Del（11q）在CD38阳性组为34.8%,显著高于阴性组的10.7%（p=0.003）。在IGVH未突变组,del（11q）和del（17p）分别为28%和32%,显著高于突变组的10.5%和7.0%（p值分别为0.046和0.003）；而IGVH突变组中,del（D13S25）和单独del（D13S25）分别为59.6%和35.1%,显著高于未突变组的36%和4.0%（p值分别为0.048和0.003）。单因素分析显示：伴del（11q）和del（17p）为至需要治疗时间（TTT）的不良预后因素,而单独del（D13S25）为TTT的预后良好因素。对于总生存（OS）,仅del（17p）为预后不良因素。结合其它临床因素对TTT和OS的影响进行多因素分析显示：del（11q）（RR 2.68,p=0.001）和del（17p）（RR 2.13,P=0.013）为TTT的不良影响因素,而del（17p）（RR 3.31,P=0.016）和B症状（RR 2.32,p=0.029）为OS的不良预后因素。2.遗传学异常与MCL临床特点和预后的关系del（D13S25）与MIPI中高危、年龄>60岁、LDH升高显著相关；伴有2个或以上附加遗传学异常多见于β2微球蛋白>6.0mg/1和LDH升高患者；del（17p）亦多见于LDH升高者。单因素分析显示del（11q）、del（17p）、C-MYC异常和2个或以上遗传学异常为OS的不良预后因素,而del（Rbl）、del（17p）、C-MYC异常和2个或以上遗传学异常为PFS不良预后因素。多因素分析显示del（17p）为PFS和OS的唯一独立影响因素。结论：l.del（D13S25）在B-LPD间普遍存在,提示各B-LPD可能存在共同的发病机制；2.遗传学异常可为各B-LPD间鉴别诊断提供线索,如+12可作为SMZL与其它CD5-B-LPD患者的鉴别标记,IGH易位可作为LPL/WM与其它B-LPD及MM的鉴别依据。3.遗传学异常与CLL分期、CD38表达及IGVH突变状态相关；del（11q）和del（17p）为TTT的独立不良影响因素,而del（17p）为OS的独立不良预后因素。4.del（17p）为MCL患者PFS和OS的唯一独立影响因素。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1. 研究对象
• 2. 研究方法
• 2.1 技术路线
• 2.2 实验主要仪器
• 2.3 主要试剂一探针
• 2.4 实验相关试剂配制
• 2.5 实验方法
• 2.6 正常参考值的建立
• 2.7 患者终点指标确定
• 2.8 统计学分析
• 第二章 实验结果
• 一、不同B-LPD的细胞遗传学异常及其比较
• 二、遗传学异常与CLL、MCL的临床表现及预后的关系
• 第三章 讨论
• 一、遗传学异常在各B-LPD间差异及其与发病机制的关系
• 二、遗传学异常对CLL、MCL预后的影响
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的文章
• 英文缩略词表
• 致谢