论文摘要
本试验将猪Ghrelin基因真核表达质粒PCI-Ghrelin-28aa免疫断奶仔猪,目的是研究其促生长效果及血液激素水平的变化,为其在养殖业中的应用奠定基础。本试验采用单因子试验设计,提取并纯化大量的PCI-Ghrelin-28aa质粒,选用军牧1号断奶仔猪8头,平均体重为(16.33±1.77)kg,随机分成实验组和对照组,每个组4个重复,每个重复1头猪。试验组第0d于仔猪半腱肌部位注射质粒PCI-Ghrelin-28aa质粒1.5mg,对照组注射等体积Elution Buffer,试验期63d。试验期间记录增重和采食情况,于试验的第32、33、34、46、47、48d收集粪样,采用内源指示剂酸不溶灰分(AIA)法测定饲料及粪样中粗蛋白质消化率。试验第0(注射质粒前)、7、21、35、49、63d早上9:00,试猪逐头前腔静脉采血20毫升,血样分两份,分别用于测定血清中的生化指标:血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(T-CHO)和血浆中的生长激素(GH)、类胰岛素生长因子(IGF-I)、生长抑素(SS)、胃泌素(GAS)的浓度。PCI-Ghrelin-28aa基因质粒对仔猪生产性能及日粮粗蛋白(CP)表观消化率的影响试验结果表明:16~60kg阶段试验组终体重比对照组增加3.5%,从全期来看,两个实验组平均日采食量几乎相等,日增重和饲料转化率呈显著差异(P<0.05)。第21-35d处理组日增重比对照组提高了10.76%,差异显著(P<0.05),饲料转化率降低了8.78%。第49-63d处理组日采食量、日增重较对照组均有不同幅度下降,分别降低了7.35%、4.73%,差异不显著(P>0.05)。处理组第一阶段粗蛋白质表观消化率较第二阶段提高了7.99%(P<0.01),对照组无明显变化,且组间差异不显著。血液中激素浓度及生化指标测定结果:注射Ghrelin基因质粒使第35d试验组血液中生长激素(GH)浓度比对照组提高了11.20%(P<0.05),类胰岛素生长因子(IGF-I)浓度有明显升高趋势。试验组胃泌素(GAS)水平第35d极显著高于第0、7、21、63d,比对照组提高26.46%(P<0.05)。血浆生长抑素(SS)浓度试验组在第7、21、63d比对照组分别提高29.26%(P<0.05)、29.17%(P<0.05)和38.17%(P<0.01)。血液中血清总蛋白、白蛋白水平在第35d试验组比对照组分别提高20.35%、29.29%(P<0.05)。总胆固醇水平两组均呈上升趋势,试验组第35d极显著高于第0、7、21d,第49、63d显著高于第0、7d,且第35d较对照组提高9.23%(P>0.05),组间差异不显著。综上所述,(1) PCI-Ghrelin-28aa质粒对猪具有明显的促生长作用,作用时间至少可达一个月,可阶段性提高猪对粗蛋白质的消化率、降低料重比,并具有增强猪机体免疫力的趋势。(2) PCI-Ghrelin-28aa质粒可明显的提高猪血液中GH、IGF-I水平,GH的高水平分泌促进了试验第35d胃酸及GAS的高水平分泌,同时也使SS水平相应的提高,后期SS水平提高又抑制了GH、IGF-I的分泌。初步证明了Ghrelin基因质粒在实际中具有应用的可能性。
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