论文摘要
救必应（Ilex rotunda Thunb.）是冬青科植物,又名铁冬青,在我国南方是常用的中草药,以树皮或叶入药,具有清热凉血,消炎、止痛的功效,早期主要被做为治疗各种感染性疾病和肠胃疾病的常用中药。因其对急性病症疗效显著而确切,公认为急救良药。近些年相关文献报道,救必应提取物对高血压、冠心病等都具有治疗作用,但关于其有效部位的研究却十分少见。救必应药材中含有许多药用成分,其中具栖冬青苷是它的三萜皂苷的代表化合物,但目前对去具栖冬青苷质量标准的研究尚不完善,对于生产中并无统一可靠的规范可循,因此本实验制定了具栖冬青苷的质量标准,同时为了控制原料质量,本实验建立了救必应药材的指纹图谱。本实验利用高效液相色谱法建立了具栖冬青苷的含量测定方法,通过方法学考察验证仪器的精密度良好,方法的重现性以及回收率均符合要求,此外根据药典中质量标准制定的有关项,对具栖冬青苷进行了性状检查、薄层鉴别、有关物质以及杂志检查。性状检查中以具栖冬青苷原料药的状态进行色、味、毒性的描述。对于薄层鉴别则是依照药典进行原料药的样品制备,通过相关的显色剂和适宜的温度对其做出定性鉴别,有关物质检查主要考察原料样品的纯度是否符合要求,以此来证明应用本原料样品所得到的实验结果可靠,具有说服力。杂志检查中参照药典对原料样品进行干燥失重、炽灼残渣、内部的重金属、砷盐等指标的检查,暂定各项指标的允许范围,从而暂定了具栖冬青苷的质量标准。实验还筛选出来自不同产地的10批救必应药材,采用高效液相色谱法建立指纹图谱。首先通过查阅大量相关文献,对救必应药材选用不同提取方式、不同溶剂以及不同提取时间等进行考察,经过HPLC法测定各个条件下救必应中有效成分的分离效果,筛选出最佳提取方法；然后进行色谱条件的选择,选取不同型号或不同厂家的色谱柱、设定不同的柱温、不同检测波长等条件分别考察,最终确定最优色谱条件。经过实验得到最佳色谱条件为：色谱柱确定为Apollo C8 （4.6mm X 250mm,5μm）;以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱；柱温：30℃；检测波长：210nm；进样量5μl；流速为1.0ml/min。经过提取条件以及色谱条件的筛选,对10批不同产地的救必应药材进行指纹图谱研究。方法学考察结果中共有峰的相对保留时间和相对峰面积均符合规定,说明该方法可用于指纹图谱的研究。建立救必应药材的指纹图谱,得到9个共有峰,经中药色谱指纹图谱相似度评价软件2004 A版计算相似度,10批救必应药材相似度大于0.9。则说明不同产地的药材相似度良好。色谱图上峰的数目基本相同,但是色谱图的峰面积不同,说明了十批药材的成分大致相同,但是药材含量却有很大差异,这说明了不同产地、不同年限由于光照水分等差异,药材含量也会有很大不同。通过建立救必应药材的指纹图谱能够有效控制救必应药材的质量,筛选优质的道地药材作为药物研究中原材料,为相关后续的药物研发提供了科学依据。