高效、快速液相色谱系统的构建及评价

论文摘要

论文总结了Flash色谱法、整体柱色谱法、超高压色谱法和高温色谱法的特征，系统探讨了与高压和高温相关的问题及解决方法。研究了流量和温度对色谱保留参数的影响规律。提高压力(流量)可以极大加快分离速度。而升高柱温，在改善最佳流速范围的同时，不仅使色谱柱背压降低，也可能对分离选择性起到一定的调节作用。采用亚2μm色谱柱构建了一套超高压液相色谱系统。所建立的系统最高耐压60MPa，系统稳定性良好，可以满足液相色谱定量和定性分析的需要。使用1.9μm填料色谱柱与常规5μm填料色谱柱比较，相同流速下的分析速度提高了8倍，而流动相消耗仅为1／14，节约了时间和溶剂。通过对常规仪器的改进，构建了一套高温液相色谱系统，在不同分离模式下通过对六味地黄丸的分析评价系统。系统具有分离速度快、柱效高的特点。四支串联色谱柱的绝对柱效达到7.6万，分离六味地黄丸时色谱峰数可增加一倍以上。以正相色谱柱和反相色谱柱串联构建的连续二维色谱系统，结合了正相色谱与反相色谱的特点；将紫外检测器和ELSD串联使用，可以得到更加详尽的检测信息。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 图表目录
• 注释表
• 1 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 FLASH色谱
• 1.3 整体柱色谱
• 1.4 超高压液相色谱
• 1.4.1. 理论基础
• 1.4.1.1. Knox曲线
• 1.4.1.2. 柱效
• 1.4.1.3 分离时间
• 1.4.2. 研究进展
• 1.4.3. 与超高压相关的问题
• 1.4.3.1. 溶剂的压缩性
• 1.4.3.2. 梯度混合器
• 1.4.3.3. 进样技术
• 1.4.3.4. 摩擦热效应
• 1.4.3.5. 检测器
• 1.4.3.6. 安全因素
• 1.4.4. 商品化的超高效液相色谱仪器
• 1.4.5. 填料的发展及商品化的亚2μm色谱柱
• 1.4.5.1. 填料发展历史
• 1.4.5.2. 商品化的亚2μm填料色谱柱
• 1.4.5.3. 多孔填料与无孔填料比较
• 1.5 高温液相色谱的现状与存在的问题
• 1.5.1. 研究进展
• 1.5.2. 与高温相关的问题
• 1.5.2.1. 溶质的热稳定性
• 1.5.2.2. 热差
• 1.5.3. 高温下使用的色谱柱
• 1.5.3.1. 硅胶基质固定相
• 1.5.3.2. 金属氧化物基质固定相
• 1.5.3.3. 聚合物基质固定相
• 1.5.3.4. 石墨化炭固定相
• 1.6 论文的主要工作
• 2 压力和温度对液相色谱行为的规律探索
• 2.1 引言
• 2.2 实验设备及样品
• 2.2.1. 实验设备
• 2.2.2. 样品与试剂
• 2.2.3. 样品制备
• 2.2.3.1. 1号标样的配制
• 2.2.3.2. 依利特公司反相标样
• 2.2.3.3. 芳烃样品
• 2.3 流量对色谱参数的影响
• 2.3.1. 流量对柱效的影响
• 2.3.2. 流量对保留时间的影响
• 2.3.3. 体积流速下色谱峰型比较
• 2.3.4. 流量与压力关系
• 2.3.5. 不同柱长分离速度比较
• 2.4 温度对色谱参数的影响
• 2.4.1. 温度对保留时间影响
• 2.4.2. 温度对柱效的影响
• 2.4.3. 温度对选择性的影响
• 2.4.4. 温度对不对称度的影响
• 2.4.5. 预热方式的选择
• 2.4.6. 温度对压力的影响
• 2.4.7. 高温下系统的稳定性
• 2.5 检测器色谱参数的影响
• 2.6 进样阀及连接管路对色谱参数的影响
• 2.7 小结
• 3 超高压液相色谱系统的构建及评价
• 3.1 引言
• 3.2 实验设备及样品
• 3.2.1. 实验设备
• 3.2.2. 样品与试剂
• 3.2.3. 系统流程图
• 3.3 系统评价
• 3.3.1. 耐压测试
• 3.3.2. 流量测试
• 3.3.3. 重现性实验
• 3.4 应用
• 3.4.1. 方法转移
• 3.4.1.1. 进样量
• 3.4.1.2. 流速
• 3.4.2. 标准样品的分析
• 3.4.2.1. 相同线速度下分析
• 3.4.2.2. 相同压力下分析
• 3.4.2.3. 柱效比较
• 3.4.3. 不同官能团芳烃的分析
• 3.5 与WATERS公司UPLC比较
• 3.5.1. 最大压力下比较
• 3.5.2. 相同流量比较
• 3.5.3. 相同压力下比较
• 3.6 小结
• 4 高温液相色谱的构建与评价
• 4.1 实验设备及样品
• 4.1.1. 实验设备
• 4.1.2. 样品及制备
• 4.1.3. 系统流程图
• 4.2 系统测试
• 4.2.1. 台阶梯度重复性
• 4.2.2. 线性梯度
• 4.3 高温液相色谱法分析六味地黄丸
• 4.3.1. DAD图
• 4.3.2. 常温下六味地黄丸UV色谱图
• 4.3.3. 高温下六味地黄丸色谱图
• 4.4 多柱串联
• 4.4.1. 色谱柱评价
• 4.4.2. 六味地黄丸分析
• 4.4.3. 多柱串联中使用高温
• 4.5 高温连续二维实验
• 4.5.1. 常温连续二维实验
• 4.5.2. 120℃下连续二维色谱实验
• 4.6 双检测器串联
• 4.6.1. 死时间标记
• 4.6.2. 常温检测六味地黄丸
• 4.6.3. 高温下分析六味地黄丸
• 4.7 小结
• 5 结论与创新点
• 5.1 结论
• 5.2 创新点
• 5.3 发表的文章
• 致谢
• 参考文献