论文题目: 拉坦前列素酸对人Tenon囊成纤维细胞CTGF和胶原合成的影响
论文类型: 博士论文
论文专业: 眼科学
作者: 王嘉健
导师: 孙兴怀,任惠民,钱韶红,宋月莲
关键词: 青光眼滤过性手术,拉坦前列素酸,人囊成纤维细胞,结缔组织生长因子,型胶原,增殖
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 抗青光眼滴眼液术前长期应用可造成结膜下细胞外基质堆积和炎症细胞增多,促进青光眼手术滤过道的瘢痕化,降低抗青光眼手术的成功率。拟前列腺素类局部降眼压药正越来越多地应用于临床,拉坦前列素是同类药物中应用最广泛的一种,局部长期滴用对滤过道瘢痕化的作用倍受眼科学者的关注。 有研究认为,拟前列腺素药可促进体外培养的睫状体平滑肌细胞结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）mRNA的表达,但此药对Tenon囊成纤维细胞CTGF的影响迄今未见报导。CTGF具有促进成纤维细胞有丝分裂、合成分泌胶原和新生血管形成的作用,是近年新发现的重要的致纤维化因子。因此研究拟前列腺素类药物对Tenon囊成纤维细胞CTGF表达的影响具有临床现实意义,有利于进一步了解药物对手术滤过道瘢痕形成的作用。 实验证明拉坦前列素可上调Tenon囊成纤维细胞基质金属蛋白酶的表达,促进胶原和其它细胞外基质的分解过程。胶原可以促进细胞移行、分化、粘附、增殖及分泌细胞外基质,参与器官纤维化的过程。胶原沉积的数量由胶原的分解和合成两个过程决定,目前该药对胶原合成的影响尚无报导。 本实验选用无防腐剂的拉坦前列素酸作用于体外培养的人Tenon囊成纤维细胞（human Tenon fibroblast,HTF）,研究拟前列腺素类药物对结缔组织生长因子的影响及其在胶原合成中的作用。 第一部分 人Tenon囊成纤维细胞的体外培养及鉴定 于白内障手术中取患者的Tenon囊组织,采用组织块贴壁培养法行原代培养。5%CO2、37℃条件下用含10%胎牛血清的低糖DMEM传代培养。采用波形蛋白抗体、成纤维细胞抗体、角蛋白抗体,应用免疫细胞化学染色和免疫细胞荧光染色方法对培养的细胞进行鉴定。 结果: 培养的绌胞生长活跃、性状表现稳定,角蛋白抗体染色阴性、波形蛋白抗体染色阳性、成纤维细胞抗体染色阳性,确认是成纤维细胞。 第二部分 拉坦前列素酸对Tenon囊成纤维细胞CTGF mRNA和蛋白表达的影响 1.于六孔培养板培养HTF细胞至完全融合后进行实验。①观察不同浓度拉坦
论文目录:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人Tenon囊成纤维细胞的体外培养及鉴定
一、人Tenon囊成纤维细胞的体外培养
材料和方法
结果
二、体外培养的人Tenon囊成纤维细胞的鉴定
材料和方法
结果
讨论
第二部分 拉坦前列素酸对HTF细胞CTGF mRNA和蛋白表达的影响
一、拉坦前列素酸对HTF细胞CTGF mRNA表达的影响
材料和方法
结果
二、拉坦前列素酸对HTF细胞CTGF蛋白表达的影响
材料和方法
结果
三、FP受体在拉坦前列素酸刺激HTF细胞CTGF表达中的作用
材料和方法
结果
讨论
第三部分 拉坦前列素酸对HTF细胞胶原合成的影响
材料和方法
结果
讨论
第四部分 拉坦前列素酸对HTF细胞增殖的影响
材料和方法
结果
讨论
全文总结
参考文献
综述
发表论文
致谢
论文独创性声明
发布时间: 2005-09-19
参考文献
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