论文摘要
目的克隆表达肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC）0157:H7志贺样毒素2B亚单位（Shiga-like toxin,Stx2B）,并对其初步纯化。方法设计寡核苷酸引物,利用PCR法自EHEC 0157:H7基因组扩增Stx2B的编码基因stx2b,TA克隆后连接到表达载体pET-28a以构建重组质粒,经测序鉴定后转入表达宿主菌E.coli BL-21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达,以SDS-PAGE和Western-blot分析重组表达产物,固相亲和层析纯化重组蛋白。结果PCR扩增stx2b基因约210bp,成功构建重组质粒pET28a-stx2b,并在E.coli BL21（DE3）中得到高效表达,目的蛋白的相对分子质量约为7.5kD,约占总蛋白量的40%;免疫印迹显示目的蛋白可与特异性抗体发生为特异性阳性反应。结论成功克隆EHEC 0157:H7 Stx2b基因,在原核系统获得目的蛋白的高效表达,为0157:H7感染机制以及疾病的诊断和疫苗研究奠定基础。
论文目录
相关论文文献
- [1].乘龙H7载货车上市,老司机怎么看?[J]. 汽车纵横 2016(11)
- [2].H7亚型禽流感病毒感染人的组织嗜性分析[J]. 科学通报 2013(18)
- [3].不同荧光RT-PCR试剂盒检测H7亚型禽流感病毒的比较[J]. 中国动物检疫 2014(09)
- [4].H7亚型流感病毒通用及区分强弱毒RT-PCR方法的建立[J]. 中国动物检疫 2017(06)
- [5].H7亚型禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立[J]. 生物工程学报 2009(11)
- [6].胶体金试纸条及血凝抑制试验检测禽流感病毒H7亚型抗体比较分析[J]. 畜牧兽医科学(电子版) 2019(18)
- [7].红旗H7汽车广告的符号分析[J]. 科技传播 2014(15)
- [8].2017年红旗H7空调偶发风量无法控制[J]. 汽车维修技师 2018(10)
- [9].H7亚型禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 动物医学进展 2012(03)
- [10].2015年红旗H7座椅线束故障[J]. 汽车维修技师 2018(08)
- [11].广昌县鸡群禽流感H7亚型血清抗体初步调查报告[J]. 广东畜牧兽医科技 2017(03)
- [12].H7型禽流感病毒在鸟类和人类中的流行与控制[J]. 中国畜牧兽医 2014(05)
- [13].安徽省2005～2018年肠出血性大肠杆菌O157∶H7监测结果分析[J]. 安徽预防医学杂志 2020(01)
- [14].2017—2019年惠水县高致病性禽流感H5和H7亚型免疫抗体检测分析[J]. 贵州畜牧兽医 2020(01)
- [15].H5和H7亚型禽流感流行情况[J]. 吉林畜牧兽医 2020(06)
- [16].大气压冷等离子体处理对果蔬表面E.coli O157∶H7生物膜的清除作用[J]. 食品工业科技 2020(21)
- [17].2003-2012年中国肠出血性大肠杆菌O157∶H7病原微生物学文献计量学分析[J]. 医学理论与实践 2014(04)
- [18].肠出血性大肠杆菌O157∶H7变种Q蛋白对志贺毒素表达的影响[J]. 食品科学 2014(15)
- [19].温州市食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7污染状况调查[J]. 中国食品卫生杂志 2012(04)
- [20].中国四地区凉拌菜中E.coli O157∶H7调查分析[J]. 医药论坛杂志 2010(11)
- [21].肠出血性大肠埃希菌O157∶H7外膜蛋白A的表达、鉴定和纯化[J]. 中国病原生物学杂志 2008(07)
- [22].中国部分地区人群和动物中肠出血性大肠埃希菌O157∶H7分布特征[J]. 疾病监测 2008(07)
- [23].乳胶凝集试验快速检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7的研究[J]. 中国家禽 2017(06)
- [24].刘秀梵院士:H5和H7亚型禽流感的防控[J]. 中国家禽 2013(22)
- [25].禽流感病毒H5亚型及H7亚型基因的引物设计与多重RT-PCR扩增[J]. 安徽农业科学 2008(16)
- [26].三相无变压器型H7光伏逆变器漏电流分析抑制[J]. 电源学报 2018(04)
- [27].冷等离子体技术对黄瓜表面大肠杆菌O157∶H7生物膜的清除作用研究[J]. 食品工业科技 2017(02)
- [28].H7亚型禽流感病毒核酸标准品制备及双探针荧光RT-PCR检测研究[J]. 中国兽医杂志 2014(11)
- [29].2012年东台市肠出血性大肠埃希菌O157︰H7监测分析[J]. 中国病原生物学杂志 2013(11)
- [30].江苏省建湖地区肠出血性大肠杆菌O157∶H7监测分析[J]. 徐州医学院学报 2009(06)
标签：肠出血性大肠杆菌论文; 志贺毒素亚基论文;