论文摘要
目的:癌性恶病质是恶性肿瘤常见的并发症,是导致患者高病死率和生存期缩短的主要原因之一。本实验旨在通过构建癌性恶病质动物实验模型,研究鱼油对小鼠癌性恶病质状态的改善情况及生存时间的影响,并进一步探讨联合应用沙利度胺是否效果更佳。初步探讨鱼油在预防性用药中的价值及其可能机制。方法:将鼠结肠腺癌26（colon26）细胞株皮下接种于BALB/c小鼠,构建癌性恶病质动物实验模型。将73只BALB/c小鼠随机分成6组:健康对照组（HC）、恶病质组（CC）、鱼油组（EPA）、沙利度胺组（TLD）、鱼油+沙利度胺组（ET）、预防用药组（PR）。各治疗组用药一周,监测小鼠体重、摄食量及饮水量的变化,测量血清细胞因子IL-6,TNF-α的水平及各营养指标的浓度变化并记录小鼠的生存时间。预防用药组在小鼠进入癌性恶病质状态前给予两周的鱼油,观察对小鼠荷瘤率的影响及进入恶病质状态的时间。采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清IL-6、TNF-α的水平,应用全自动生化分析仪测定各营养代谢指标。用SPSS12.0统计学软件进行数据处理,各组数据均以x±s的形式表示。两个独立样本组间均数比较采用t检验,多组的组间均数比较采用方差分析及q检验。两样本率的比较采用Fisher确切概率法。结果:1动物模型癌性恶病质组、鱼油组、沙利度胺组、联合用药组,皮下接种colon-26细胞4-5天后,肿瘤开始可以触及,小鼠出现精神萎靡,活动减少,7-8天后肿瘤长至约1cm3大小,小鼠开始出现全身毛色发暗且杂乱无序,活动迟缓,消瘦等表现,摄食、饮水量相对减少,体重亦开始出现下降,至第9天,全部小鼠进入癌性恶病质状态。预防用药组接种细胞第6天,肿瘤方触及,生长亦相对缓慢,至第12天,小鼠才进入恶病质状态。2体重实验开始时,各组间体重差异无显著性（P>0.05）,至第16天,恶病质组小鼠去瘤体重较健康对照组出现明显下降（P<0.01）,摄食量和引水量亦出现了降低。鱼油组和联合用药组经过治疗后终末去瘤体重较恶病质组有改善（P<0.05）,但两组间比较无统计学意义（P>0.05）,而沙利度胺组体重升高较恶病质组无显著性（P>0.05）。各治疗组的瘤体重量与恶病质组比较有统计学意义（P<0.05）。3生化指标恶病质组小鼠较健康对照组血清各营养指标出现不同程度的代谢消耗状态（P<0.05）,给予相应的治疗后,鱼油组及联合用药组ALB、GLU、CHOL、TG、VLDL、LDH等指标较恶病质组出现明显改善（P<0.01）,但两组间比较无统计学意义（P>0.05）,而沙利度胺组各营养代谢指标未见改善（P>0.05）。各组小鼠之间的血TB比较无统计学意义（P>0.05）。4细胞因子健康对照组未检出IL-6、TNF-α活性,恶病质组小鼠血清IL-6、TNF-α水平明显升高,鱼油组IL-6的浓度,沙利度胺组TNF-α浓度较恶病质组明显降低（P<0.01）。联合用药组两种细胞因子均出现降低,且具有统计学意义（P<0.05）。5生存时间恶病质组小鼠平均生存时间明显缩短。EPA、TLD、ET、PR组,小鼠平均生存时间较恶病质组出现不同程度的延长（P<0.05）。6荷瘤率预防用药组小鼠荷瘤率（77.78%）低于未预防用药（98.25%）, P值为0.047,有统计学意义。结论:1本实验成功的构建了一个与人类极为相似的癌性恶病质动物实验模型,为进一步研究恶病质的治疗提供了良好的实验基础。2恶病质小鼠除了去瘤体重降低、营养耗竭外,细胞因子IL-6、TNF-α活性亦明显升高,提示恶病质小鼠出现明显的糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱,可能与促炎细胞因子活性升高有关,说明了细胞因子的参与可能是导致恶病质发生的重要机制之一。3鱼油能够明显改善恶病质小鼠的一般状态,增加体重,改善其营养指标并降低血脂;提示鱼油在抑制肌肉蛋白质、脂肪分解的同时也抑制了肿瘤的生长,亦明显降低重要细胞因子IL-6的活性,从而达到抗癌性恶病质效果并延长生存时间。4沙利度胺未显示出明显的抗癌性恶病质作用,其与鱼油联合用药未见疗效的进一步提高。是否与沙利度胺溶解度甚微,不利于吸收有关,还有待进一步实验证明。5预防性应用鱼油小鼠荷瘤率降低,延缓进入恶病质状态的时间,提示鱼油的早期干预对于预防肿瘤及恶病质的发生发展有重要意义。6综合分析本实验结果:鱼油在癌性恶病质的预防及治疗中均有显著作用,而联合应用沙利度胺未见疗效的进一步提高。虽然本实验鱼油对恶病质防治的结论是初步的,但结果令人鼓舞,并且为鱼油的临床应用提供了理论依据。由此推断,鱼油可能成为抗癌性恶病质治疗中的新选择。