论文摘要
目的:脉冲制剂是根据时辰药理学原理发展起来的新型控释系统,制剂在一定时间的时滞后,即在疾病即将发作时快速、完全的释放。病人在服药后,经过一定的时滞时间后,药物在发病前或者最佳治疗时间释放出来,从而有效地预防或治疗疾病,并且可以降低不良反应,减少药物用量。研究表明人体的心率存在着明显的时辰节律性,而导致了心绞痛的发作也存在着明显的时辰节律性,心绞痛一般在凌晨2点3点和6点7点最易发作。缓控释制剂在给药后就开始释放,在未发病阶段内药物维持了一定的浓度,但在需要药物预防和治疗时,体内的药物浓度却达不到需要的水平,而会延误有效的治疗时机。根据此特点,我们可以将治疗心绞痛的药物研制成口服的双脉冲制剂,既可以使心绞痛发作高峰的时候病情得到缓解,也不会影响非心绞痛时的心率。本试验以酒石酸美托洛尔为模型药,研制杯形双脉冲释放系统,通过筛选阻滞层的处方和用量达到不同的释药时滞,实现药物在心绞痛发病高峰期释药。方法:本系统组成部分包括水不溶性杯形体、三层片芯（两层含药速释层和中间阻滞层）、脉冲阻滞层。水不溶性杯形体的选择:为了确保杯形体不透水,保证两次脉冲,选定乙基纤维素作为杯形体的材料。首先,选择了不同型号的乙基纤维素（10厘泊、20厘泊、45厘泊和100厘泊）,然后,分别考察了不同型号在相同条件下的硬度、相同型号不同粒径的乙基纤维素压片的硬度和不同型号、相同硬度下的乙基纤维素压片的水通透性。三层片芯的制备:将主药和辅料过筛,混合均匀,由于混合后的粉末流动性比较好,所以采用的直接压片的工艺,压制直径7mm的三层片芯。片芯的外面两层为含药速释层,中间层为阻滞层。速释层由崩解剂、稀释剂、干粘合剂组成。分别考察了处方因素、不同溶出介质对脉冲效果的影响。阻滞层的处方选择:采用的直接压片的工艺制备整个脉冲片。考察了干粘合剂的用量与杯形体的粘合性质,溶蚀材料的种类对脉冲片的脉冲效果（释药时滞和时滞后的累积释放速率）,并且选定溶蚀材料的用量、阻滞层的用量、脉冲片的硬度作为考察因素,进行三因素三水平的正交设计,以释药速率为指标,优化处方。酒石酸美托洛尔双脉冲杯形片体外释放试验依照《中华人民共和国药典》2010年第二版附录XD溶出度测定法第三法装置,转速100rpm。为了模拟胃肠道释药的情况:前2 h选用0.1mol/L盐酸溶液250ml,2h后转入250ml,pH5.8磷酸盐缓冲液中继续试验。在规定的时间点取样,并且在波长274nm处测定吸收度值A,据标准曲线计算药物的浓度。稳定性考察:考察高温、高湿和强光照射对酒石酸美托洛尔双脉冲杯形片的稳定性影响。分别观察样品外观变化,并且计算含药量、释药时滞和释药速率有无变化。体内药代动力学试验:以Beagle犬为试验动物,采用随机分组法将Beagle犬分为两组,分别口服市售酒石酸美托洛尔片和自制的酒石酸美托洛尔双脉冲杯形片,与规定的时间点取血,然后对血浆处理后进行分析,两周的洗脱期以后进行交叉试验。用高效液相色谱法测定给药前后不同时间点的血药浓度,并且计算药代动力学参数和相对生物利用度。结果:通过单因素试验确定了片芯的最佳处方为:25mg酒石酸美托洛尔、14mg交联羧甲基纤维素钠、3mg喷雾干燥乳糖和3mg微晶纤维素,压片硬度为15kg/mm2,阻滞层为70mg。通过正交设计确定了阻滞层的最佳处方为:30%的HPMC E5、15%的HPMC K15、30%的PVPP K30、3%的微粉硅胶、10%的喷雾干燥乳糖、12%的微晶纤维素,压片硬度为13 kg/mm2,阻滞层为120mg。杯形体选择了45厘泊的乙基纤维素。片芯的硬度和崩解剂的用量对时滞后释药速率有一定的影响,随着片芯的硬度的增加和崩解剂的用量的增加,释药速率也相应的变大。随着HPMC K15量的增加,时滞时间加长,但是累积释放率明显变差。随着脉冲片的硬度的增加,时滞时间较长,但是累积释放速率变差。第二次脉冲可以通过改变第二个阻滞层的量控制时滞时间。溶出介质的pH值和离子强度对脉冲释药时滞基本无影响。酒石酸美托洛尔双脉冲杯形片的体外溶出曲线表明,两次释药时滞分别是（4.5±0.079）h和（8±0.069）h,两次释药时滞后的释放速率分别为（1.50±0.12）%/min和（2.4±0.37）%/min。影响因素试验中,制剂在相对湿度为75%、95%的条件下,都对制剂的时滞时间有影响,使时滞时间变短,但是含量不变。在高温试验中,60℃条件下,5天时没有变化,但是10天时影响了时滞时间。在40℃条件下,5天和10天都没有变化。强光照射条件下没有影响。药代动力学试验研究:色谱图表明样品峰和其他杂峰分离良好,在血药浓度在10ng/ml1300ng/ml内,线性良好,标准曲线方程为A=0.2646c+3.2034（r=0.9997）。酒石酸美托洛尔双脉冲杯形片和市售速释片的各项药动学的参数分别为: two-pulsed drug released rapidly-disintegrate tablet capsule Tmax（h） 5±0.4082 1.157±0.3094 9.13±0.4787 Cmax(ng·ml-1) 958.78±133.74 747.52±431.95 1095.55±158.66 Tlag（h） 4.375±0.25 0.4546±0.04241 8.5±0.41 Ke(h-1) 0.1924±0.04848 0.5164±0.1111 AUC(ng·h·ml-1) 4875.043±806.95 3273.65±430.92 Relative MT（%） 74.45±24.65 100.00结论:体内和体外试验结果表明阻滞层的处方组成可以影响脉冲制剂的释药时滞和时滞后的释药速率,而且自制的酒石酸美托洛尔双脉冲杯形片能够实现双脉冲释放,符合市场治疗的需要。